- Văn bản
- Lịch sử
13. Rules of thumb for defining ant
13. Rules of thumb for defining anti-infective potential in natural products
1. Identification and documentation of the plants (voucher specimen and number) and preparation and storage of extracts need to be reported. In a bioassay-guided fractionation, a scattered activity across the different fractions is mostly indicative for non-selectivity.
2. Test organisms are preferably ATCC strains as they are widely used and well-characterized. Defined clinical isolates may also be used, but only if the susceptibility to relevant reference compounds is reported.
3. In vitro models using the whole organism are the ‘golden’ standard and should be used whenever possible. If microorganisms can be cultivated either in cell-free medium (‘axenic’) or in cell cultures, the latter one is preferred since it resembles more the in vivo situation.
4. Antimicrobial activity must be discriminated from nonspecific toxicity by inclusion of a parallel cytotoxicity evaluation on mammalian cell lines or integration into a panel
of unrelated microbial screens (bacteria, fungi, parasites, viruses).
5. Total extracts and derived primary fractions exhibiting strong non-selective action in the panel of in vitro screens can only be properly evaluated in animal models.
6. Extended dose ranges with at least three doses are needed for establishing representative dose–response curves. Descriptive values are IC50and IC90. MIC and MBC-values are also common endpoints in antibacterial and antifungal screening.
7. To correct for too many false-positives, stringent endpoint criteria must be adopted. For all anti-infective bioassays, IC50-values should be below 100g/ml for mixtures and below 25M for pure compounds. Some micro-organisms even require more severe endpoint criteria.
8. A universal panel of test organisms does not exist and is
largely determined by the specific drug-finding objectives and the adopted plant selection criteria. Taking into account P. Cos et al. / Journal of Ethnopharmacology 106 (2006) 290–302 301
the sometimes broad traditional ethnomedical use, a minimum panel of test organisms is recommended (Table 2).
9. Inclusion of appropriate controls in each test replicate (blank-, infected- and reference controls) is necessary. For each test organism, one or more commercially available reference compounds can be considered (Table 2).
10. Differences in composition of the growth medium can
greatly affect the potency of a compound. Mueller-Hinton is recommended for antibacterial and Sabouraud for antifungal testing in agar and/or broth dilution tests. For fastidious bacteria, supplementation with growth factors or other
media are allowed.
11. The infective dose can have a profound impact on the test results. For most bacteria, 105CFU/ml is adequate, while for yeasts and fungi about 10and 104CFU/ml is satisfactory. For viruses and parasites, optimal infective doses are
species-specific.
12. For antibacterial and antifungal activities, follow-up of bioassay-guided fractionation can be performed with an assay of choice. Whenever possible, final reporting of active extracts or pure compounds should be done by applying the broth-dilution method. For essential oils, addition of solvents or emulsifiers may be necessary, but their final concentrations should be limited and reported.
13. The phenomenon of ‘additive’ or ‘synergistic’ effects in mixtures or extracts frequently causes loss-of-activity during bio-guided fractionation efforts and hence precludes the identification or characterization of the relevant fraction that
could be retained for further evaluation. In that case, further studies should focus on the defined crude extract.
Acknowledgements Paul Cos is a postdoctoral researcher of the Fund for Scientific Research (FWO-Flanders, Belgium). The integrated screening concept for tropical parasitic diseases was developed with
the support of UNICEF/UNDP/World Bank/WHO special programme for research and training in tropical diseases.
1. Identification and documentation of the plants (voucher specimen and number) and preparation and storage of extracts need to be reported. In a bioassay-guided fractionation, a scattered activity across the different fractions is mostly indicative for non-selectivity.
2. Test organisms are preferably ATCC strains as they are widely used and well-characterized. Defined clinical isolates may also be used, but only if the susceptibility to relevant reference compounds is reported.
3. In vitro models using the whole organism are the ‘golden’ standard and should be used whenever possible. If microorganisms can be cultivated either in cell-free medium (‘axenic’) or in cell cultures, the latter one is preferred since it resembles more the in vivo situation.
4. Antimicrobial activity must be discriminated from nonspecific toxicity by inclusion of a parallel cytotoxicity evaluation on mammalian cell lines or integration into a panel
of unrelated microbial screens (bacteria, fungi, parasites, viruses).
5. Total extracts and derived primary fractions exhibiting strong non-selective action in the panel of in vitro screens can only be properly evaluated in animal models.
6. Extended dose ranges with at least three doses are needed for establishing representative dose–response curves. Descriptive values are IC50and IC90. MIC and MBC-values are also common endpoints in antibacterial and antifungal screening.
7. To correct for too many false-positives, stringent endpoint criteria must be adopted. For all anti-infective bioassays, IC50-values should be below 100g/ml for mixtures and below 25M for pure compounds. Some micro-organisms even require more severe endpoint criteria.
8. A universal panel of test organisms does not exist and is
largely determined by the specific drug-finding objectives and the adopted plant selection criteria. Taking into account P. Cos et al. / Journal of Ethnopharmacology 106 (2006) 290–302 301
the sometimes broad traditional ethnomedical use, a minimum panel of test organisms is recommended (Table 2).
9. Inclusion of appropriate controls in each test replicate (blank-, infected- and reference controls) is necessary. For each test organism, one or more commercially available reference compounds can be considered (Table 2).
10. Differences in composition of the growth medium can
greatly affect the potency of a compound. Mueller-Hinton is recommended for antibacterial and Sabouraud for antifungal testing in agar and/or broth dilution tests. For fastidious bacteria, supplementation with growth factors or other
media are allowed.
11. The infective dose can have a profound impact on the test results. For most bacteria, 105CFU/ml is adequate, while for yeasts and fungi about 10and 104CFU/ml is satisfactory. For viruses and parasites, optimal infective doses are
species-specific.
12. For antibacterial and antifungal activities, follow-up of bioassay-guided fractionation can be performed with an assay of choice. Whenever possible, final reporting of active extracts or pure compounds should be done by applying the broth-dilution method. For essential oils, addition of solvents or emulsifiers may be necessary, but their final concentrations should be limited and reported.
13. The phenomenon of ‘additive’ or ‘synergistic’ effects in mixtures or extracts frequently causes loss-of-activity during bio-guided fractionation efforts and hence precludes the identification or characterization of the relevant fraction that
could be retained for further evaluation. In that case, further studies should focus on the defined crude extract.
Acknowledgements Paul Cos is a postdoctoral researcher of the Fund for Scientific Research (FWO-Flanders, Belgium). The integrated screening concept for tropical parasitic diseases was developed with
the support of UNICEF/UNDP/World Bank/WHO special programme for research and training in tropical diseases.
0/5000
13. quy tắc của ngón tay cái để xác định anti-infective tiềm năng trong sản phẩm tự nhiên1. xác định và tài liệu về thực vật (phiếu mẫu và số) và chuẩn bị và lưu trữ các chất chiết xuất từ cần được báo cáo. Trong một đoạn hướng dẫn bioassay, một hoạt động rải rác trên khắp các phần phân đoạn khác nhau chủ yếu là chỉ cho phòng không chọn lọc.2. các sinh vật thử nghiệm tốt hơn là ATCC giống như họ đang được sử dụng rộng rãi và đầy đủ đặc trưng. Xác định chủng lâm sàng cũng có thể được sử dụng, nhưng chỉ nếu tính nhạy cảm với các hợp chất có liên quan tham khảo được báo cáo.3. trong ống nghiệm mô hình bằng cách sử dụng các sinh vật toàn bộ các tiêu chuẩn 'vàng' và nên được sử dụng bất cứ khi nào có thể. Nếu vi sinh vật có thể được trồng trong miễn phí di động môi trường ('axenic') hoặc trong nền văn hóa tế bào, người sau này được ưa thích vì nó tương tự như nhiều tình hình tại vivo.4. kháng khuẩn hoạt động phải được phân biệt xử khỏi không đặc hiệu nhiễm độc bởi bao gồm của một đánh giá song song cytotoxicity trên tế bào động vật có vú dòng hoặc tích hợp vào một bảng điều khiểnkhông liên quan vi khuẩn màn hình (vi khuẩn, nấm, ký sinh trùng, virus).5. tổng số chiết xuất và dịch các phần phân đoạn chính trưng bày các hành động phòng không chọn lọc mạnh mẽ trong bảng điều khiển của màn hình trong ống nghiệm chỉ có thể được đúng cách đánh giá trong các mô hình động vật.6. mở rộng liều dãy với ít nhất ba liều là cần thiết cho việc thành lập đại diện liều-phản ứng đường cong. Mô tả giá trị là IC50and IC90. MIC và giá trị MBC cũng là hai điểm cuối phổ biến trong kiểm tra kháng khuẩn và kháng nấm.7. để điều chỉnh cho quá nhiều sai-tích cực, điểm cuối nghiêm ngặt tiêu chí phải được thông qua. Cho tất cả anti-infective bioassays, IC50-giá trị nên dưới 100 g/ml cho hỗn hợp và dưới 25 M cho hợp chất tinh khiết. Một số vi sinh vật thậm chí đòi hỏi nghiêm trọng hơn điểm cuối tiêu chí.8. một bảng phổ của bài kiểm tra sinh vật không tồn tại và làchủ yếu được xác định bởi mục tiêu tìm kiếm thuốc cụ thể và các tiêu chí lựa chọn thực vật nuôi. Tính đến P. Cos et al. / tạp chí Ethnopharmacology 106 (2006) 290-302 301sử dụng đôi khi rộng sử truyền thống, một bảng điều khiển tối thiểu của các sinh vật thử nghiệm khuyến khích (bảng 2).9. bao gồm các điều khiển thích hợp trong mỗi replicate thử nghiệm (trống-, bị nhiễm bệnh - và kiểm soát tài liệu tham khảo) là cần thiết. Cho mỗi sinh vật thử nghiệm, một hoặc nhiều tài liệu tham khảo thương mại có sẵn hợp chất có thể được xem xét (bảng 2).10. sự khác biệt trong thành phần của các phương tiện phát triển có thểrất nhiều ảnh hưởng đến hiệu lực của hợp chất. Mueller-Hinton được khuyến khích cho kháng khuẩn và Sabouraud để thử nghiệm kháng nấm trong bài kiểm tra pha loãng agar và/hoặc canh. Cho khó tính vi khuẩn, bổ sung với yếu tố tăng trưởng hoặc khácphương tiện truyền thông được cho phép.11. liều lây nhiễm có thể có một tác động sâu sắc về kết quả kiểm tra. Đối với hầu hết vi khuẩn, 105CFU/ml là đầy đủ, trong khi cho nấm men và nấm về 10and 104CFU/ml là thỏa đáng. Vi rút và ký sinh trùng, tối ưu lây nhiễm liềuspecies-specific.12. đối với hoạt động kháng khuẩn và kháng nấm, theo dõi của bioassay hướng dẫn phân có thể được thực hiện với một khảo nghiệm của sự lựa chọn. Bất cứ khi nào có thể, báo cáo cuối cùng của chất chiết xuất từ hoạt động hoặc tinh khiết hợp chất nên được thực hiện bằng cách áp dụng các phương pháp canh-pha loãng. Tinh dầu, bổ sung các dung môi hay natri NaNO2 có thể cần thiết, nhưng nồng độ cuối cùng của họ nên được hạn chế và báo cáo.13. hiện tượng của 'phụ' hoặc 'synergistic' hiệu ứng trong hỗn hợp hoặc chất chiết xuất từ thường xuyên gây ra thiệt hại của hoạt động trong những nỗ lực hướng dẫn sinh học phân và do đó ngăn cản nhận dạng hoặc đặc tính của các phần có liên quan màcó thể được giữ lại để tiếp tục đánh giá. Trong trường hợp đó, tiếp tục nghiên cứu nên tập trung vào các chiết xuất dầu thô được xác định.Lời cảm ơn Paul Cos là một nhà nghiên cứu sau tiến sĩ của Quỹ nghiên cứu khoa học (FWO-Flanders, Bỉ). Khái niệm tích hợp kiểm tra cho bệnh ký sinh nhiệt đới được phát triển vớisự hỗ trợ của UNICEF/UNDP/thế giới ngân hàng/WHO đặc biệt chương trình nghiên cứu và đào tạo trong các bệnh nhiệt đới.
đang được dịch, vui lòng đợi..
13. Quy định của ngón tay cái để xác định tiềm năng chống nhiễm trùng trong các sản phẩm tự nhiên
1. Xác định và tài liệu của các nhà máy (voucher mẫu và số lượng) và chuẩn bị và lưu trữ các chất chiết xuất cần phải được báo cáo. Trong một phân đoạn xét nghiệm sinh học dẫn đường, một hoạt động rải rác trên khắp các phần khác nhau chủ yếu là chỉ cho người không chọn lọc.
2. Sinh vật thử nghiệm là tốt ATCC chủng khi chúng được sử dụng rộng rãi và được đặc trưng. Phân lập lâm sàng được xác định cũng có thể được sử dụng, nhưng chỉ khi nhạy cảm với các hợp chất tham khảo liên quan được báo cáo.
3. Trong các mô hình ống nghiệm bằng cách sử dụng toàn bộ sinh vật là 'vàng' chuẩn và nên được sử dụng bất cứ khi nào có thể. Nếu vi sinh vật có thể được trồng hoặc trong môi trường di động miễn phí ('axenic') hoặc trong nuôi cấy tế bào, là sau này được ưa thích vì nó giống ai hơn tình hình trong cơ thể.
4. Hoạt động kháng khuẩn phải được phân biệt đối xử từ độc tính không đặc hiệu bằng cách bao gồm một đánh giá độc tế bào song song trên các dòng tế bào động vật có vú hoặc tích hợp vào một bảng điều khiển
màn hình của vi sinh vật không liên quan (vi khuẩn, nấm, ký sinh trùng, vi rút).
5. Tổng số chiết xuất và phân số chính bắt nguồn trưng bày hành động không chọn lọc mạnh mẽ trong bảng điều khiển trong ống nghiệm màn hình chỉ có thể được đánh giá đúng trong các mô hình động vật.
6. Mở rộng phạm vi liều với ít nhất ba liều là cần thiết cho việc thiết lập các đường cong đáp ứng liều đại diện. Giá trị mô tả là IC50and IC90. MIC và MBC-giá trị này cũng là thiết bị đầu cuối phổ biến trong sàng lọc kháng khuẩn và kháng nấm.
7. Để chính xác cho quá nhiều sai tích cực, tiêu chuẩn nghiêm ngặt endpoint phải được thông qua. Đối với tất cả các sinh trắc nghiệm chống nhiễm trùng, IC50-giá trị nên được dưới 100? G / ml cho hỗn hợp, dưới 25? M cho hợp chất tinh khiết. Một số vi sinh vật thậm chí đòi hỏi tiêu chí endpoint nghiêm trọng hơn.
8. Một bảng điều khiển phổ quát của các sinh vật thử nghiệm không tồn tại và là
yếu được xác định bởi các mục tiêu tìm thuốc cụ thể và các tiêu chí lựa chọn nhà máy thông qua. Đi vào tài khoản P. Cos et al. / Tạp chí Ethnopharmacology 106 (2006) 290-302 301
sử dụng ethnomedical truyền thống đôi khi rộng, một bảng điều khiển tối thiểu của các sinh vật thử nghiệm được đề xuất (Bảng 2).
9. Bao gồm các kiểm soát thích hợp trong mỗi lần lặp lại thử nghiệm (blank-, điều khiển infected- và tài liệu tham khảo) là cần thiết. Đối với mỗi vi khuẩn thử nghiệm, một hoặc thương mại hóa hơn các hợp chất có sẵn tài liệu tham khảo có thể được xem xét (Bảng 2).
10. Sự khác biệt trong thành phần của môi trường phát triển có thể
ảnh hưởng lớn đến hiệu lực của một hợp chất. Mueller-Hinton được khuyến khích cho kháng khuẩn và kháng nấm Sabouraud để thử nghiệm trong môi trường thạch và / hoặc xét nghiệm pha loãng nước dùng. Đối với vi khuẩn khó tính, bổ sung bằng các nhân tố khác hoặc
phương tiện truyền thông được phép.
11. Liều nhiễm có thể có một tác động sâu sắc đến các kết quả thử nghiệm. Đối với hầu hết các loại vi khuẩn, 105CFU / ml là đủ, trong khi đối với nấm men và nấm về 10and 104CFU / ml là thỏa đáng. Đối với vi rút và ký sinh trùng, nhiễm liều tối ưu là
loài cụ thể.
12. Đối với hoạt động kháng khuẩn và kháng nấm, theo dõi các xét nghiệm sinh học dẫn đường phân đoạn có thể được thực hiện với một xét nghiệm của sự lựa chọn. Bất cứ khi nào có thể, báo cáo cuối cùng của các chất chiết xuất hoạt động hoặc hợp chất tinh khiết nên được thực hiện bằng cách áp dụng phương pháp canh pha loãng. Đối với các loại tinh dầu, thêm dung môi hay các chất nhũ hoá có thể là cần thiết, nhưng nồng độ cuối cùng của họ nên được hạn chế và báo cáo.
13. Hiện tượng 'phụ' hoặc hiệu ứng 'hiệp' trong hỗn hợp hoặc chiết xuất thường xuyên gây ra mất mát-of-hoạt động trong nỗ lực cắt phân đoạn sinh học hướng dẫn và do đó ngăn cản việc xác định hay mô tả đặc điểm của các phần có liên quan
có thể được giữ lại để đánh giá thêm. Trong trường hợp đó, các nghiên cứu cần tiếp tục tập trung vào việc chiết xuất dầu thô được xác định. Lời cảm ơn Paul Cos là một nhà nghiên cứu của Quỹ Nghiên cứu Khoa học (FWO-Flanders, Bỉ). Các khái niệm chiếu tích hợp cho các bệnh ký sinh nhiệt đới đã được phát triển với sự hỗ trợ của UNICEF / UNDP / WB / WHO chương trình đặc biệt dành cho nghiên cứu và đào tạo trong các bệnh nhiệt đới.
1. Xác định và tài liệu của các nhà máy (voucher mẫu và số lượng) và chuẩn bị và lưu trữ các chất chiết xuất cần phải được báo cáo. Trong một phân đoạn xét nghiệm sinh học dẫn đường, một hoạt động rải rác trên khắp các phần khác nhau chủ yếu là chỉ cho người không chọn lọc.
2. Sinh vật thử nghiệm là tốt ATCC chủng khi chúng được sử dụng rộng rãi và được đặc trưng. Phân lập lâm sàng được xác định cũng có thể được sử dụng, nhưng chỉ khi nhạy cảm với các hợp chất tham khảo liên quan được báo cáo.
3. Trong các mô hình ống nghiệm bằng cách sử dụng toàn bộ sinh vật là 'vàng' chuẩn và nên được sử dụng bất cứ khi nào có thể. Nếu vi sinh vật có thể được trồng hoặc trong môi trường di động miễn phí ('axenic') hoặc trong nuôi cấy tế bào, là sau này được ưa thích vì nó giống ai hơn tình hình trong cơ thể.
4. Hoạt động kháng khuẩn phải được phân biệt đối xử từ độc tính không đặc hiệu bằng cách bao gồm một đánh giá độc tế bào song song trên các dòng tế bào động vật có vú hoặc tích hợp vào một bảng điều khiển
màn hình của vi sinh vật không liên quan (vi khuẩn, nấm, ký sinh trùng, vi rút).
5. Tổng số chiết xuất và phân số chính bắt nguồn trưng bày hành động không chọn lọc mạnh mẽ trong bảng điều khiển trong ống nghiệm màn hình chỉ có thể được đánh giá đúng trong các mô hình động vật.
6. Mở rộng phạm vi liều với ít nhất ba liều là cần thiết cho việc thiết lập các đường cong đáp ứng liều đại diện. Giá trị mô tả là IC50and IC90. MIC và MBC-giá trị này cũng là thiết bị đầu cuối phổ biến trong sàng lọc kháng khuẩn và kháng nấm.
7. Để chính xác cho quá nhiều sai tích cực, tiêu chuẩn nghiêm ngặt endpoint phải được thông qua. Đối với tất cả các sinh trắc nghiệm chống nhiễm trùng, IC50-giá trị nên được dưới 100? G / ml cho hỗn hợp, dưới 25? M cho hợp chất tinh khiết. Một số vi sinh vật thậm chí đòi hỏi tiêu chí endpoint nghiêm trọng hơn.
8. Một bảng điều khiển phổ quát của các sinh vật thử nghiệm không tồn tại và là
yếu được xác định bởi các mục tiêu tìm thuốc cụ thể và các tiêu chí lựa chọn nhà máy thông qua. Đi vào tài khoản P. Cos et al. / Tạp chí Ethnopharmacology 106 (2006) 290-302 301
sử dụng ethnomedical truyền thống đôi khi rộng, một bảng điều khiển tối thiểu của các sinh vật thử nghiệm được đề xuất (Bảng 2).
9. Bao gồm các kiểm soát thích hợp trong mỗi lần lặp lại thử nghiệm (blank-, điều khiển infected- và tài liệu tham khảo) là cần thiết. Đối với mỗi vi khuẩn thử nghiệm, một hoặc thương mại hóa hơn các hợp chất có sẵn tài liệu tham khảo có thể được xem xét (Bảng 2).
10. Sự khác biệt trong thành phần của môi trường phát triển có thể
ảnh hưởng lớn đến hiệu lực của một hợp chất. Mueller-Hinton được khuyến khích cho kháng khuẩn và kháng nấm Sabouraud để thử nghiệm trong môi trường thạch và / hoặc xét nghiệm pha loãng nước dùng. Đối với vi khuẩn khó tính, bổ sung bằng các nhân tố khác hoặc
phương tiện truyền thông được phép.
11. Liều nhiễm có thể có một tác động sâu sắc đến các kết quả thử nghiệm. Đối với hầu hết các loại vi khuẩn, 105CFU / ml là đủ, trong khi đối với nấm men và nấm về 10and 104CFU / ml là thỏa đáng. Đối với vi rút và ký sinh trùng, nhiễm liều tối ưu là
loài cụ thể.
12. Đối với hoạt động kháng khuẩn và kháng nấm, theo dõi các xét nghiệm sinh học dẫn đường phân đoạn có thể được thực hiện với một xét nghiệm của sự lựa chọn. Bất cứ khi nào có thể, báo cáo cuối cùng của các chất chiết xuất hoạt động hoặc hợp chất tinh khiết nên được thực hiện bằng cách áp dụng phương pháp canh pha loãng. Đối với các loại tinh dầu, thêm dung môi hay các chất nhũ hoá có thể là cần thiết, nhưng nồng độ cuối cùng của họ nên được hạn chế và báo cáo.
13. Hiện tượng 'phụ' hoặc hiệu ứng 'hiệp' trong hỗn hợp hoặc chiết xuất thường xuyên gây ra mất mát-of-hoạt động trong nỗ lực cắt phân đoạn sinh học hướng dẫn và do đó ngăn cản việc xác định hay mô tả đặc điểm của các phần có liên quan
có thể được giữ lại để đánh giá thêm. Trong trường hợp đó, các nghiên cứu cần tiếp tục tập trung vào việc chiết xuất dầu thô được xác định. Lời cảm ơn Paul Cos là một nhà nghiên cứu của Quỹ Nghiên cứu Khoa học (FWO-Flanders, Bỉ). Các khái niệm chiếu tích hợp cho các bệnh ký sinh nhiệt đới đã được phát triển với sự hỗ trợ của UNICEF / UNDP / WB / WHO chương trình đặc biệt dành cho nghiên cứu và đào tạo trong các bệnh nhiệt đới.
đang được dịch, vui lòng đợi..
Các ngôn ngữ khác
Hỗ trợ công cụ dịch thuật: Albania, Amharic, Anh, Armenia, Azerbaijan, Ba Lan, Ba Tư, Bantu, Basque, Belarus, Bengal, Bosnia, Bulgaria, Bồ Đào Nha, Catalan, Cebuano, Chichewa, Corsi, Creole (Haiti), Croatia, Do Thái, Estonia, Filipino, Frisia, Gael Scotland, Galicia, George, Gujarat, Hausa, Hawaii, Hindi, Hmong, Hungary, Hy Lạp, Hà Lan, Hà Lan (Nam Phi), Hàn, Iceland, Igbo, Ireland, Java, Kannada, Kazakh, Khmer, Kinyarwanda, Klingon, Kurd, Kyrgyz, Latinh, Latvia, Litva, Luxembourg, Lào, Macedonia, Malagasy, Malayalam, Malta, Maori, Marathi, Myanmar, Mã Lai, Mông Cổ, Na Uy, Nepal, Nga, Nhật, Odia (Oriya), Pashto, Pháp, Phát hiện ngôn ngữ, Phần Lan, Punjab, Quốc tế ngữ, Rumani, Samoa, Serbia, Sesotho, Shona, Sindhi, Sinhala, Slovak, Slovenia, Somali, Sunda, Swahili, Séc, Tajik, Tamil, Tatar, Telugu, Thái, Thổ Nhĩ Kỳ, Thụy Điển, Tiếng Indonesia, Tiếng Ý, Trung, Trung (Phồn thể), Turkmen, Tây Ban Nha, Ukraina, Urdu, Uyghur, Uzbek, Việt, Xứ Wales, Yiddish, Yoruba, Zulu, Đan Mạch, Đức, Ả Rập, dịch ngôn ngữ.
- phòng karaoke
- ga lăng , ai cũng thương
- đó là 1 tác phẩm tuyệt vời mà tôi đã đọc
- and the functions they carry out are wid
- nay vợ ăn 3 bát cơm
- Trong cuộc đời
- Ý
- Shizuo muttered under his breath before
- em nói không đúng à
- i miss you
- chúc mừng
- phim thái
- Bạn bao nhiêu tuổi rồi
- ...chào mừng các bạn đã quay trở lại chư
- Been to
- ...chào mừng các bạn đã quay trở lại chư
- 10 năm sau tôi muốn trở thành một người
- Grow
- dẫn theo 4 đứa con gái đi
- những mục tiêu ưu tiên
- Không có gì đâu
- How about going sưimming? Or cycling? Th
- Anh có thể giải thích sơ sơ không?Không
- Standardization Extent to which there is
