solation of protoplasts from brachy

solation of protoplasts from brachypodium. Hydroponically grown 25-day-old plants (A) were used for the isolation of protoplasts from leaf tissue. Chopped brachypodium leaves in filter-sterilized TVL solution are shown in (B). Enzymatic digestion of the cell wall and fractionation by sucrose density gradient yielded protoplasts at the interface of the enzyme solution and W5 solution (C, black arrow). Protoplasts were collected and purified from sucrose density gradient solution (D) and visualized under microscopy using bright-field filter sets (E). In our method, 0.2 g of leaf tissue from 25-day-old seedlings yields 5 × 106–107 protoplasts. Close-up of brachypodium protoplasts through bright-field (F) and FITC (G) filter sets to assess protoplast viability after staining with the membrane-permeable non-fluorescent dye, fluorescein diacetate. After diffusion into viable protoplasts fluorescein diacetate is hydrolyzed into a polar compound, causing the cytosoplasm of the cell to fluoresce under the FITC filter set. Scale bar = 20 μm.

Kết quả (Việt) 1:

solation protoplasts từ brachypodium. Hydroponically trồng cây 25 ngày tuổi (A) đã được sử dụng cho sự cô lập của protoplasts từ lá mô. Lá xắt nhỏ brachypodium trong bộ lọc khử trùng TVL được hiển thị trong mục (B). Enzym tiêu hóa các tế bào và phân của sucrose mật độ gradient mang protoplasts giao diện giải pháp enzym và giải pháp W5 (C, mũi tên màu đen). Protoplasts đã được thu thập và tinh khiết từ Sucroza mật độ gradient (D) và hình dung dưới kính hiển vi sử dụng các bộ lọc sáng lĩnh vực sets (E). Trong phương pháp của chúng tôi, cách 0.2 g lá mô từ 25 ngày, tuổi cây giống sản lượng 5 × 106-107 protoplasts. Cận cảnh brachypodium protoplasts thông qua sáng trường (F) và bộ lọc FITC (G) thiết lập để đánh giá khả năng protoplast sau khi nhuộm với thuốc nhuộm thấm màng-huỳnh, fluorescein diacetate. Sau khi khuếch tán thành khả thi protoplasts fluorescein diacetate thủy phân đạm vào một hợp chất phân cực, gây cytosoplasm của các tế bào để fluoresce theo bộ lọc FITC thiết lập. Quy mô bar = 20 μm.

Kết quả (Việt) 2:

solation tế bào trần từ Brachypodium. Hydroponically trồng cây 25 ngày tuổi (A) được sử dụng để phân lập tế bào trần từ mô lá. Brachypodium băm lá trong dung TVL lọc tiệt trùng được thể hiện trong (B). tiêu hóa enzyme của tế bào và phân đoạn của Gradient mật độ sucrose mang lại tế bào trần tại giao diện của giải pháp enzyme và giải pháp W5 (C, mũi tên đen). Bào trần được thu thập và tinh khiết từ giải pháp mật độ dốc sucrose (D) và hình dưới kính hiển vi sử dụng bộ lọc sáng trường (E). Trong phương pháp của chúng tôi, 0,2 g mô lá từ cây con 25 ngày tuổi mang 5 × 106-107 tế bào trần. Close-up của tế bào trần Brachypodium qua sáng trường (F) và FITC (G) lọc bộ để đánh giá khả năng tồn tại nguyên hình sau khi nhuộm với diacetate fluorescein màng thấm nhuộm không huỳnh quang,. Sau khi khuếch tán vào tế bào trần khả thi diacetate fluorescein được thủy phân thành một hợp chất phân cực, gây ra cytosoplasm của tế bào để phát sáng dưới bộ lọc FITC. thanh Scale = 20 mm.