Bacterial adaptive immune systems u

Bacterial adaptive immune systems use CRISPRs (clustered regularly interspaced short palindromic repeats) and CRISPR-associated (Cas) proteins for RNA-guided nucleic acid cleavage1, 2. Although most prokaryotic adaptive immune systems generally target DNA substrates3, 4, 5, type III and VI CRISPR systems direct interference complexes against single-stranded RNA substrates6, 7, 8, 9. In type VI systems, the single-subunit C2c2 protein functions as an RNA-guided RNA endonuclease (RNase)9, 10. How this enzyme acquires mature CRISPR RNAs (crRNAs) that are essential for immune surveillance and how it carries out crRNA-mediated RNA cleavage remain unclear. Here we show that bacterial C2c2 possesses a unique RNase activity responsible for CRISPR RNA maturation that is distinct from its RNA-activated single-stranded RNA degradation activity. These dual RNase functions are chemically and mechanistically different from each other and from the crRNA-processing behaviour of the evolutionarily unrelated CRISPR enzyme Cpf1 (ref. 11). The two RNase activities of C2c2 enable multiplexed processing and loading of guide RNAs that in turn allow sensitive detection of cellular transcripts.

Kết quả (Việt) 1:

Hệ thống miễn dịch thích nghi do vi khuẩn sử dụng CRISPRs (nhóm thường xuyên interspaced ngắn palindromic lặp đi lặp lại) và kết hợp CRISPR (Cas) protein RNA hướng dẫn nucleic acid cleavage1, 2. Mặc dù hệ thống miễn dịch thích nghi nhất định thường nhắm mục tiêu các DNA substrates3, 4, 5, loại III và VI CRISPR hệ thống trực tiếp giao thoa phức hợp chống lại đơn-stranded RNA substrates6, 7, 8, 9. Trong hệ thống loại VI, C2c2 đơn-tiểu đơn vị protein chức năng như một hướng dẫn RNA RNA endonuclease (RNase) 9, 10. Làm thế nào mua lại enzym này trưởng thành CRISPR Rnas và Bắc Ireland (crRNAs) mà là rất cần thiết cho miễn dịch giám sát và làm thế nào nó thực hiện qua trung gian crRNA RNA cleavage vẫn còn chưa rõ ràng. Ở đây chúng tôi cho rằng vi khuẩn C2c2 sở hữu một RNase duy nhất hoạt động chịu trách nhiệm về sự trưởng thành của CRISPR RNA là riêng biệt từ RNA kích hoạt đơn-stranded RNA sự thoái hóa hoạt động của nó. Các chức năng kép này RNase là về mặt hóa học và mechanistically khác nhau từ mỗi khác và từ hành vi xử lý crRNA loại enzyme CRISPR cuốn không liên quan Cpf1 (ref. 11). Hai RNase hoạt động của C2c2 sử multiplexed xử lý và tải về hướng dẫn Rnas và Bắc Ireland lần lượt cho phép nhạy cảm phát hiện các tế bào bảng điểm.

Kết quả (Việt) 2:

hệ thống miễn dịch thích ứng của vi khuẩn sử dụng CRISPRs (nhóm thường xuyên lặp đi lặp lại interspaced xuôi ngược ngắn) và (Cas) protein CRISPR liên quan cho cleavage1 axit nucleic RNA dẫn đường, 2. Mặc dù hầu hết các hệ thống miễn dịch thích ứng prokaryote thường nhắm mục tiêu DNA substrates3, 4, 5, loại III và hệ thống CRISPR VI phức hợp can thiệp trực tiếp đối với sợi đơn RNA substrates6, 7, 8, 9. Trong loại VI hệ thống, các đơn tiểu đơn vị chức năng protein C2c2 như một RNA-RNA hướng dẫn endonuclease (RNase) 9, 10. làm thế nào enzyme này mua lại trưởng thành RNA CRISPR (crRNAs) là rất cần thiết để giám sát miễn dịch và làm thế nào nó thực hiện crRNA qua trung gian RNA tách vẫn chưa rõ ràng. Ở đây chúng tôi cho thấy rằng vi khuẩn C2c2 sở hữu một hoạt động độc đáo RNase trách nhiệm CRISPR RNA trưởng thành đó là khác biệt từ hoạt động phân hủy RNA sợi đơn RNA kích hoạt của nó. Các chức năng này RNase kép là hóa học và mechanistically khác nhau từ mỗi khác và từ các hành vi crRNA chế biến của CRISPR enzyme tiến hóa không liên quan Cpf1 (ref. 11). Hai hoạt động RNase của C2c2 cho phép xử lý được ghép và tải các hướng dẫn RNA mà lần lượt cho phép phát hiện nhạy cảm của bảng điểm của tế bào.