Protein concentrations of TNF-α, IL

Protein concentrations of TNF-α, IL-1β, TGF-β, and
IL-10 in the cell culture supernatants were measured by
ELISA according to the manufacturer’s recommendation.
Briefl y, standard, control, and samples were added to the
wells with coated monoclonal antibody specifi c for each
cytokine. After incubation for 2 h, the unbound substances
were washed away, and an enzyme-linked polyclonal antibody
specifi c for the cytokine was added to the wells to
sandwich the cytokine immobilized during the fi rst incubation.
A further 2 h of incubation was followed by a wash to
remove any unbound antibody-enzyme reagent, and then a
substrate solution was added to the wells, and color was developed
in proportion to the amount of the cytokine bound
in the initial step. The color development was stopped by
adding the stop solution, and the intensity of the color was
measured at 450 nm with the correction wavelength set at
530 nm. Concentrations were calculated from a standard
curve. All samples were analyzed in duplicate. The detection
limits of the ELISA kit for TNF-α, IL-1β, TGF-β, and
IL-10 analyses were 3.7, 10, 4.6, and 1.76 pg/mL, respectively. The intra-assay CV provided by the kit manufacture
(R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN) for TNF-α, IL-
1β, TGF-β, and IL-10 analyses were less than 3.5%, 4.4%,
2.5%, and 4.2%, respectively. The interassay CV provided
by the kit manufacture for TNF-α, IL-1β, TGF-β, and IL-
10 analyses were lower than 8.6%, 9.2%, 9.1%, and 7.2%,
respectively.

Kết quả (Việt) 1:

Nồng độ protein TNF-α, Il-1β, TGF-β, vàIL-10 ở các nền văn hóa tế bào supernatants được đo bằngELISA theo khuyến cáo của nhà sản xuất.Briefl y, tiêu chuẩn, kiểm soát và mẫu đã được thêm vào cácgiếng với tráng monoclonal kháng quí c cho mỗicytokine. Sau khi ủ cho 2 h, chất unboundbị cuốn trôi, và một liên kết với enzyme kháng thể polyclonalchỉ c cho cytokine đã được thêm vào các giếng đểSandwich cytokine hỏng trong thời gian ủ bệnh rst fi.Một h ủ thêm 2 tiếp theo là một rửa đểloại bỏ bất kỳ hoá kháng thể toạc, men tiêu hóa, và sau đó mộtgiải pháp chất nền đã được thêm vào các giếng, và màu sắc đã được phát triểntỷ lệ với số lượng cytokine ràng buộctrong bước đầu tiên. Sự phát triển màu sắc đã dừng lạithêm giải pháp ngăn chặn, và cường độ của màu sắcđo tại 450 nm với bước sóng chỉnh thiết lập530 nm. Nồng độ được tính toán từ một tiêu chuẩnđường cong. Tất cả các mẫu được phân tích trong trùng lặp. Phát hiệngiới hạn của kit ELISA cho TNF-α, IL-1β, TGF-β, vàIL-10 phân tích là 3,7, 10, 4.6 và 1,76 pg/mL, tương ứng. CV intra-khảo nghiệm được cung cấp bởi sản xuất kit(R & D Systems, Inc., Minneapolis, MN) cho TNF-α, IL -1β, TGF-β, và phân tích IL-10 đã là ít hơn 3,5%, 4,4%,2,5% và 4,2%, tương ứng. CV interassay cung cấpbởi sản xuất kit cho TNF-α, IL-1β, TGF-β, và IL -10 phân tích đã thấp hơn 8,6%, 9,2%, 9,1% và 7,2%,tương ứng.

Kết quả (Việt) 2:

Nồng độ protein của TNF-α, IL-1β, TGF-β, và
IL-10 trong nước nổi nuôi cấy tế bào được đo bằng
phương pháp ELISA theo khuyến cáo của nhà sản xuất.
Briefl y, tiêu chuẩn, kiểm soát, và các mẫu được thêm vào các
giếng với tráng kháng thể đơn dòng cụ thể theo từng
cytokine. Sau khi ủ trong 2 giờ, các chất không ràng buộc
đã bị cuốn trôi, và một liên kết enzyme kháng thể đa giá
cụ thể theo cho các cytokine đã được bổ sung vào các giếng để
bánh sandwich các cytokine cố định trong quá trình ủ fi đầu tiên.
Hơn 2 giờ ủ đã được theo sau bởi rửa để
loại bỏ bất cứ cởi ra kháng thể enzyme tinh khiết, và sau đó là một
giải pháp chất nền đã được bổ sung vào các giếng, và màu sắc đã được phát triển
tỷ lệ thuận với số lượng các cytokine bị ràng buộc
ở bước ban đầu. Sự phát triển màu sắc đã được ngừng lại bởi
thêm các giải pháp ngăn chặn, và cường độ của các màu được
đo ở 450 nm với bước sóng điều chỉnh thiết lập ở
530 nm. Nồng độ được tính toán từ một tiêu chuẩn
đường cong. Tất cả các mẫu được phân tích thành hai bản. Việc phát hiện
giới hạn của bộ kit ELISA cho TNF-α, IL-1β, TGF-β, và
IL-10 phân tích là 3,7, 10, 4.6, và 1,76 pg / ml, tương ứng. Các nội khảo nghiệm CV cung cấp bởi việc sản xuất bộ
(R & D Systems, Inc., Minneapolis, MN) cho TNF-α, il-
1β, TGF-β, và IL-10 phân tích đều được ít hơn 3,5%, 4,4%,
2,5% và 4,2%, tương ứng. CV interassay cung cấp
của nhà sản xuất bộ cho TNF-α, IL-1β, TGF-β, và il-
10 phân tích đều thấp hơn so với 8,6%, 9,2%, 9,1% và 7,2%,
tương ứng.