Biodistribution studies were carrie

Biodistribution studies were carried out on tumor bearing
female Balb/c mice. Modified orthotopic model of lung tumor
was developed on mice as earlier reported (Garbuzenko et al.,
2010). Briefly, A549 cells transfected with luciferase (5–8 106
)
were resuspended in 0.1 mL of RPMI medium containing 20%
FBS, mixed with 5 lM EDTA and administered intratracheally to
the murine lung through a catheter. It was shown that a slight disruption
of the pulmonary epithelium or the surfactant layer by coadministration
of EDTA allowed significantly better tumor engraftment.
Four weeks after the instillation of tumor cells, mice were
used for biodistribution study. Biodistribution of the drug was
determined, with slight modifications as earlier reported (Yoo
and Park, 2004), to study the distribution of drug in different organs.
Twenty-seven healthy Balb/c mice were selected and divided
into three groups of nine mice each group for Free GEM, GEM
loaded-CTS/PEG and CTS/PEG-AA NPs. Plain GEM, GEM loadedCTS/PEG
and CTS/PEG-AA NPs were administered through tail vein
in a dose equivalent to 18 mg/kg body weight. Three animals from
each group were sacrificed at 2, 12, and 24 h, and various organ
masses such as hearts, livers, spleens and kidneys were collected
and washed with saline; and weighed prior to homogenization in
saline. Tissue samples were cooled on ice after homogenization
procedure; the homogenate was then centrifuged at 19,000 g
for 12 min. Methanol and acetonitrile were added to the supernatant
(1:1) to precipitate unwanted proteins; samples were centrifuged
(19,000 g, 10 min) as described above. The aliquots were
assayed for GEM levels using RP-HPLC to estimate the total amount
of GEM was performed using RP-HPLC method according to the
method mentioned in Section 2.3.
2

Kết quả (Việt) 1:

Biodistribution nghiên cứu đã được thực hiện trên khối u mangtỷ Balb/c con chuột. Orthotopic sửa đổi mô hình của khối u phổiđược phát triển trên chuột như trước đó được báo cáo (Garbuzenko et al.,Năm 2010). một thời gian ngắn, các tế bào A549 transfected với luciferase (5-8 106)đã được resuspended trong 0.1 mL RPMI vừa có chứa 20%FBS, trộn với 5 lM EDTA và quản lý intratracheally đểphổi chuột thông qua một ống thông. Nó đã được chỉ ra rằng một sự phá vỡ nhỏbiểu mô phổi hoặc lớp chất bởi coadministrationcủa EDTA cho phép tốt hơn đáng kể khối u engraftment.Bốn tuần sau khi instillation của tế bào khối u, những con chuộtsử dụng cho biodistribution học. Biodistribution của thuốc làxác định, với một chút sửa đổi trước đó như báo cáo (Yoovà Park, 2004), để nghiên cứu sự phân bố của thuốc trong các cơ quan khác nhau.Hai mươi bảy khỏe mạnh Balb/c con chuột đã được lựa chọn và chiathành ba nhóm chín con chuột mỗi nhóm cho miễn phí đá quý, đá quýnạp-CTS/PEG và CTS/PEG-AA NPs. đồng bằng đá quý, đá QUÝ loadedCTS/PEGvà NPs CTS/PEG-AA được quản lý thông qua các tĩnh mạch đuôitrong một liều lượng tương đương với 18 mg/kg trọng lượng cơ thể. Ba con vật từmỗi nhóm đã hy sinh tại 2, 12, và 24 h và cơ quan khác nhaukhối lượng như trái tim, gan, lá lách và thận được thu thậpvà rửa sạch với nước muối; và nặng trước homogenization ởdung dịch muối. Mẫu mô được làm mát bằng trên băng sau homogenizationthủ tục; homogenate được sau đó ly 19.000 gcho 12 phút Methanol và acetonitrile đã được thêm vào supernatant(1:1) để kết tủa protein không mong muốn; mẫu được ly(19.000 g, 10 min) như mô tả ở trên. Các aliquots đãassayed cho đá quý cấp bằng cách sử dụng RP-HPLC để ước tính tổng số tiềnđá quý đã được thực hiện bằng cách sử dụng phương pháp RP HPLC theo cácphương pháp được đề cập trong phần 2.3.2

Kết quả (Việt) 2:

Nghiên cứu Biodistribution được thực hiện trên khối u mang
nữ Balb chuột / c. Thay đổi mô hình chiều thẳng của khối u phổi
đã được phát triển trên chuột như thông báo trước đó (Garbuzenko et al.,
2010). Tóm lại, các tế bào A549 transfected với luciferase (5-8 106
)
đã được lơ lửng trong 0,1 ml dung dịch vừa RPMI chứa 20%
FBS, trộn với 5 LM EDTA và quản intratracheally đến
phổi của chuột thông qua một ống thông. Người ta thấy rằng một sự gián đoạn nhẹ
của biểu mô phổi hoặc các lớp bề mặt do việc dùng chung
của EDTA phép cấy ghép khối u tốt hơn đáng kể.
Bốn tuần sau khi nhỏ thuốc của các tế bào khối u, con chuột này được
sử dụng để nghiên cứu biodistribution. Biodistribution của thuốc đã được
xác định, với những thay đổi nhỏ như báo cáo trước đó (Yoo
và Park, 2004), để nghiên cứu sự phân bố của thuốc trong các cơ quan khác nhau.
Hai mươi bảy Balb / c chuột khỏe mạnh đã được lựa chọn và được chia
thành ba nhóm của chín con chuột mỗi nhóm cho GEM miễn phí, GEM
nạp-CTS / PEG và CTS / PEG-AA NP. GEM Plain, GEM loadedCTS / PEG
và CTS / PEG-AA NP được quản lý thông qua tĩnh mạch đuôi
ở một liều lượng tương đương với 18 mg / kg trọng lượng cơ thể. Ba loài động vật từ
mỗi nhóm đã hy sinh vào lúc 2, 12, và 24 giờ, và cơ quan khác nhau
quần chúng như tim, gan, lá lách và thận đã được thu thập
và rửa sạch với nước muối; và cân trước khi đồng nhất trong
dung dịch muối. Mẫu mô được làm lạnh trên băng sau khi đồng nhất
thủ tục; các đồng chất sau đó được ly tâm ở 19.000 g
trong 12 phút. Methanol và acetonitrile đã được thêm vào các bề
(1: 1) để kết tủa protein không mong muốn; mẫu được ly tâm
(19.000 g, 10 phút) như mô tả ở trên. Các phần phân ước đã được
kiểm định về mức độ sử dụng GEM RP-HPLC để ước tính tổng số tiền
của GEM được thực hiện bằng phương pháp RP-HPLC theo
phương pháp nêu tại mục 2.3.
2