Sau 1 h ủ ở nhiệt độ phòng trùng hợp xảy ra và các lớp alginate với tế bào trần nhúng vào như là một tấm rắn đã được chuyển giao một cách cẩn thận với những chiếc kẹp tiền phạt từ các tấm thạch đến 4 ml môi trường nuôi cấy lỏng trong 6 cm đĩa Petri. Mật độ cuối cùng của tế bào trần nhúng là 4 × 105 mỗi ml. Nguyên hình môi trường nuôi cấy được dựa trên các phương tiện CPP (Dirks et al., 1996) và bao gồm vĩ mô, vi lượng và các axit hữu cơ theo Kao và Mychayluk (1975), vitamin B5 theo trung bình (Gamborg et al. 1968), 74 gl-1 glucose, 250 mg l-1 casein enzyme thủy phân (Sigma), 0,1 mg l-1 2,4-D (2,4-D), và 0,2 mg l-1 zeatin (pH 5.6,-lọc tiệt trùng). nền văn hóa kiểu mẫu đầu tiên được ủ trong bóng tối ở 26 ± 2 ° C. Sau 10 ngày nuôi cấy, môi trường đã được thay thế bởi một tươi.
đang được dịch, vui lòng đợi..
