After about 3–6 weeks of culture, v

After about 3–6 weeks of culture, visible protoplast-derived macrocolonies and somatic embryos were released from Ca-alginate layers by incubation for 1–2 h at room temperature in 20 mM sodium citrate solution containing 0.2 M mannitol. Then the alginate residues and citrate solution were removed by centrifugation (5 min at 100 g). The pellet was carefully washed in the CPPD medium containing 0.1 mg l−1 NAA and 0.2 mg l−1 zeatin, pH 5.6 (Dirks et al. 1996), and centrifuged for 5 min at 100 g. Finally, colonies and embryos derived from one alginate layer were resuspended in 4 ml of the CPPD medium and plated in 1 ml aliquots on filter paper placed on the solidified R medium. About 2–3 weeks later small rooted plantlets were transferred to a fresh R medium for further growth. During plant regeneration the cultures were maintained in a climate room at 26 ± 2°C under 16 h photoperiod and light intensity 55 μmol m−2s−1.

Kết quả (Việt) 1:

Sau khoảng 3-6 tuần văn hóa, có nguồn gốc protoplast macrocolonies có thể nhìn thấy và Soma phôi đã được phát hành từ Ca Nitrite NaNO2 lớp ủ cho 1-2 h ở nhiệt độ phòng trong dung dịch natri citrat 20 mM cách 0.2 M mannitol có chứa. Sau đó dư lượng Nitrite NaNO2 và citrate giải pháp đã được gỡ bỏ bằng số (5 min 100 g). Miếng đã được cẩn thận rửa ở trung CPPD có chứa 0.1 mg l−1 Ngocanh và cách 0.2 mg l−1 zeatin, pH 5,6 (Dirks et al. 1996), và ly cho 5 phút 100 g. Cuối cùng, thuộc địa và phôi bắt nguồn từ một Nitrite NaNO2 lớp resuspended trong 4 ml của Trung CPPD và mạ trong 1 ml aliquots trên giấy lọc được đặt trên các phương tiện R kiên cố hóa. Khoảng 2-3 tuần sau đó nhỏ bắt nguồn từ plantlets được chuyển cho một phương tiện R tươi để tiếp tục tăng trưởng. Trong thời gian thực vật tái tạo các nền văn hóa đã được duy trì trong một căn phòng khí hậu tại 26 ± 2oC dưới 16 h photoperiod và cường độ ánh sáng 55 μmol m−2s−1.

Kết quả (Việt) 2:

Sau khoảng 3-6 tuần nuôi cấy, macrocolonies nguyên hình có nguồn gốc rõ ràng và phôi soma đã được phát hành từ các lớp Ca-alginate bằng cách ủ trong 1-2 giờ ở nhiệt độ phòng trong dung dịch citrate 20 mM sodium chứa 0,2 M mannitol. Sau đó, dư lượng alginate và citrate giải pháp đã được gỡ bỏ bằng cách ly tâm (5 phút ở 100 g). Các viên đã được rửa cẩn thận trong trung CPPD chứa 0,1 mg l-1 NAA và 0,2 mg l-1 zeatin, pH 5.6 (Dirks et al. 1996), và ly tâm trong 5 phút ở 100 g. Cuối cùng, các thuộc địa và phôi có nguồn gốc từ một lớp alginate được lơ lửng trong 4 ml trung CPPD và mạ trong 1 ml dung dòch trên giấy lọc đặt trên các phương tiện R kiên cố. Khoảng 2-3 tuần sau đó cây con ra rễ nhỏ đã được chuyển giao cho một trung R tươi cho sự phát triển hơn nữa. Trong thời gian tái sinh cây nền văn hóa được duy trì trong một căn phòng khí hậu ở 26 ± 2 ° C trong 16 h gian chiếu sáng và cường độ ánh sáng 55 mmol m-2-1.