5.2.3 DiscussionAlkaline protease p

5.2.3 Discussion

Alkaline protease produced by Vibrio sp. (V26) was found to be effective in the recovery of silver from X-ray films. With the increase in the incubation temperature from 30ºC to 60 ºC, a corresponding increase in the rate of hydrolysis of gelatin was noted. In a similar study, Sankar et al. (2010) too have reported of an increase in gelatin hydrolysis with increase in temperature. There was however no major difference in action at 50 and 60ºC in this study. Therefore 50ºC was chosen as the optimal temperature for hydrolysis due to lesser heating requirements. Nakiboglu et al. (2001) too selected 50ºC as the stripping temperature for the enzyme from B. subtilis ATCC 6633. In the present study, maximum gelatin hydrolysis was observed in the initial 15 minutes. The protease from Vibrio sp. (V26) took 25 minutes for the complete removal of gelatin, whereas the protease from a fungal isolate Conidiobolus coronatus ATCC PTA-4132 (Sankar et al., 2010) took only 6 minutes. However the enzymes of the latter study, showed hydrolytic action only at 40ºC unlike the protease of this study which functioned over broad temperature range (40-60ºC). Masui et al. (1999) reported that the alkaline protease from the Bacillus sp. B21-2 mutant took 30 minutes for the complete hydrolysis of gelatin layer at 50ºC.

Hydrolysis of gelatin occurred best when Tris-Cl buffer of pH 9 was used; indicating that it was the most ideal pH for hydrolysis of gelatin. The optimum pH for stripping of the waste film by the enzymatic extract of B. subtilis ATCC 6633 was found to be 8 (Nakiboglu et al., 2001). Most other workers (Masui et al., 1999; Sankar et al., 2010) have found pH 10 or above to be ideal for gelatin hydrolysis. The ability of the protease used in this study, to work in different pH environments (tap water, distilled water and buffer) is highly advantageous from the industrial point of view. The conditions pH9 and 50ºC were found to be most ideal for the alkaline protease from Vibrio sp.







(V26) for carrying out the hydrolysis of gelatin and the release of silver from X-ray films.

The ability of an enzyme to retain its activity for repeated use makes it suitable for commercial application. It was found that the protease from Vibrio sp. (V26) could be reused for 4 runs. The efficiency was found to drop after the 3rd run resulting in longer treatment time for achieving complete hydrolysis in the 4th run. Sankar et al. (2010) too noted that the protease from C. coronatus could be reused 4 times and that, lowering the enzyme concentration resulted in longer reaction time for complete gelatin removal and also reduced the number of recycles. Masui et al. (1999) observed that the treatment time increased after every reuse of enzyme and the first decomposition was complete in 60 minutes while 2nd use required more than 2 hrs. When compared to the protease reported by Masui et al. (1999) the alkaline protease used in this study seems to be more efficient as it was capable of withstanding reuse to a greater extent.


In this era where natural mineral resources are getting depleted rapidly all over the world; reuse or recycle remains the most feasible option to slow down this exhaustion. This study clearly indicated that the alkaline protease of Vibrio sp. (V26) has the potential of being applied for recycling of silver from X-ray films and that too in an eco-friendly manner. As single dose of enzyme could be repeatedly used for recovery of silver from X-ray films, it clearly exhibited an important trait that is essential for commercial application.

5.3 Application as detergent additive

Proteolytic enzymes from microorganisms are the most widely exploited enzymes in the detergent industry world wide (Godfrey and West, 1996; Showell, 1999; Maurer, 2004). Microbial alkaline protease dominates with a significant share of the market captured by subtilisins and /or alkaline protease from Bacillus sp. for laundry detergent applications (Ward, 1985).

Kết quả (Việt) 1:

5.2.3 thảo luậnKiềm protease được sản xuất bởi Vibrio sp. (V26) đã được tìm thấy có hiệu quả trong việc thu hồi bạc từ bộ phim x-quang. Với sự gia tăng nhiệt độ ủ bệnh từ 30ºC đến 60 ºC, một sự gia tăng tương ứng với tỷ lệ thủy phân gelatin đã được ghi nhận. Trong một nghiên cứu tương tự, hảo et al. (2010) cũng đã thông báo của tăng thủy phân gelatin với sự gia tăng nhiệt độ. Đã có sự khác biệt Tuy nhiên không lớn trong hành động tại 50 và 60ºC trong nghiên cứu này. Do đó 50ºC được chọn là nhiệt độ tối ưu cho thủy phân do thấp hơn yêu cầu hệ thống sưởi. Nakiboglu et al. (2001) cũng chọn 50ºC làm nhiệt độ bóc cho enzyme từ B. subtilis ATCC 6633. Trong nghiên cứu hiện tại, thủy phân tối đa gelatin được quan sát thấy trong 15 phút đầu tiên. Protease từ Vibrio sp. (V26) kéo dài 25 phút cho việc loại bỏ hoàn toàn các gelatin, trong khi cô lập protease từ một nấm Conidiobolus coronatus ATCC PTA-4132 (hảo và ctv., 2010) đã chỉ 6 phút. Tuy nhiên các enzym trong các nghiên cứu sau này, cho thấy hành động hydrolytic chỉ 40ºC không giống như protease của nghiên cứu này mà hoạt động trong phạm vi nhiệt độ rộng (40-60ºC). Masui et al. (1999) báo cáo rằng protease kiềm từ Bacillus sp. B21-2 đột biến kéo dài 30 phút để thủy phân hoàn toàn gelatin lớp tại 50ºC.Thủy phân gelatin xảy ra tốt nhất khi Tris-Cl bộ đệm ph 9 đã được sử dụng; chỉ ra rằng nó đã là độ pH lý tưởng nhất cho thủy phân gelatin. PH tối ưu cho tước của bộ phim thải bởi trích B. subtilis ATCC 6633, enzyme được tìm thấy là 8 (Nakiboglu và ctv., 2001). Hầu hết các công nhân khác (Masui et al., năm 1999; Hảo et al., 2010) đã tìm thấy pH 10 hoặc cao hơn là lý tưởng cho gelatin thủy phân. Khả năng của protease được sử dụng trong nghiên cứu này, để làm việc trong các môi trường khác nhau pH (nước máy, nước cất và đệm) là rất thuận lợi từ góc nhìn công nghiệp. Điều kiện pH9 và 50ºC đã được tìm thấy là lý tưởng nhất cho kiềm protease từ Vibrio sp. (V26) để thực hiện sự thủy phân của gelatin và phát hành các bạc từ bộ phim x-quang.Khả năng của một loại enzyme để duy trì hoạt động của mình để sử dụng lặp đi lặp lại làm cho nó phù hợp cho các ứng dụng thương mại. Nó được tìm thấy rằng protease từ Vibrio sp. (V26) có thể được tái sử dụng cho 4 chạy. Hiệu quả đã được tìm thấy để thả sau khi 3 chạy kết quả trong thời gian điều trị lâu hơn để đạt được các thủy phân hoàn toàn trong 4 chạy. Hảo et al. (2010) cũng lưu ý rằng protease từ C. coronatus có thể được tái sử dụng 4 lần và đó, làm giảm nồng độ enzym dẫn đến phản ứng thời gian lâu hơn để loại bỏ hoàn toàn gelatin và cũng làm giảm số lượng tái chế. Masui et al. (1999) quan sát thấy rằng thời gian điều trị tăng sau mỗi tái sử dụng men tiêu hóa và sự phân hủy đầu tiên đã được hoàn tất trong 60 phút, trong khi 2 sử dụng yêu cầu nhiều hơn 2 giờ. Khi so sánh với protease báo cáo bởi Masui et al. (1999) kiềm protease được sử dụng trong nghiên cứu này dường như có hiệu quả hơn vì nó có khả năng chịu tái sử dụng đến một mức độ lớn hơn.Trong thời đại này mà tài nguyên thiên nhiên tự nhiên bị cạn kiệt nhanh chóng khắp nơi trên thế giới; tái sử dụng hoặc tái chế vẫn là lựa chọn khả thi nhất để làm chậm này kiệt sức. Nghiên cứu này rõ ràng chỉ ra rằng protease Vibrio sp. (V26), kiềm có tiềm năng đang được áp dụng để tái chế bạc từ bộ phim x-quang và rằng quá một cách thân thiện với sinh thái. Như liều duy nhất của enzym có thể được sử dụng nhiều lần để phục hồi bạc từ bộ phim x-quang, nó rõ ràng trưng bày một đặc điểm quan trọng là điều cần thiết cho các ứng dụng thương mại.5.3 các ứng dụng như là chất tẩy rửa, phụ giaProteolytic enzym từ vi sinh vật là enzym khai thác rộng rãi nhất trong chất tẩy rửa công nghiệp trên toàn thế giới (Godfrey và West, năm 1996; Showell, năm 1999; Maurer, 2004). Vi khuẩn kiềm protease chi phối với một phần đáng kể của thị trường bị bắt bởi subtilisins và/hoặc kiềm protease từ Bacillus sp. cho các ứng dụng chất tẩy rửa Giặt ủi (p., 1985).

Kết quả (Việt) 2:

5.2.3 Thảo luận

Alkaline protease sản xuất bởi vi khuẩn Vibrio sp. (V26) đã được tìm thấy là có hiệu quả trong việc thu hồi bạc từ những bộ phim X-ray. Với sự gia tăng nhiệt độ ủ bệnh từ 30 o C đến 60 o C, tăng tương ứng tỷ lệ thủy phân gelatin đã được ghi nhận. Trong một nghiên cứu tương tự, Sankar et al. (2010) cũng đã báo cáo về sự gia tăng trong gelatin thủy phân khi nhiệt độ tăng. Tuy nhiên cũng không có sự khác biệt lớn trong hành động ở 50 và 60ºC trong nghiên cứu này. Vì vậy 50ºC được chọn là nhiệt độ tối ưu cho quá trình thủy phân do yêu cầu nhiệt thấp hơn. Nakiboglu et al. (2001) cũng chọn 50ºC khi nhiệt độ tước cho các enzyme từ B. subtilis ATCC 6633. Trong nghiên cứu này, tối đa gelatin thủy phân đã được quan sát trong 15 phút đầu tiên. Các protease từ vi khuẩn Vibrio sp. (V26) mất 25 phút để loại bỏ hoàn toàn của gelatin, trong khi các protease từ nấm phân lập Conidiobolus coronatus ATCC PTA-4132 (Sankar et al., 2010) chỉ mất 6 phút. Tuy nhiên các enzym của nghiên cứu thứ hai, cho thấy hành động thủy phân chỉ ở 40ºC không giống như các protease của nghiên cứu này có chức năng trên phạm vi nhiệt độ rộng (40-60ºC). Masui et al. (1999) báo cáo rằng các protease kiềm từ Bacillus sp. Đột biến B21-2 mất 30 phút cho quá trình thủy phân hoàn toàn lớp gelatin ở 50ºC.

Thủy phân gelatin xảy ra nhất khi Tris-Cl đệm pH 9 đã được sử dụng; chỉ ra rằng đó là độ pH lý tưởng nhất cho quá trình thủy phân gelatin. PH tối ưu cho tước của bộ phim lãng phí bởi các chiết xuất enzyme của B. subtilis ATCC 6633 đã được tìm thấy là 8 (Nakiboglu et al., 2001). Hầu hết các công nhân khác (Masui et al, 1999;.. Sankar et al, 2010) đã tìm thấy pH 10 hoặc cao hơn là lý tưởng cho gelatin thủy phân. Khả năng của protease được sử dụng trong nghiên cứu này, để làm việc trong môi trường pH khác nhau (nước máy, nước cất và bộ đệm) là thuận lợi rất lớn từ các điểm công nghiệp của xem. Các điều kiện pH9 và 50ºC đã được tìm thấy là lý tưởng nhất cho các protease kiềm từ vi khuẩn Vibrio sp. (V26) để thực hiện quá trình thủy phân gelatin và phát hành bạc từ những bộ phim X-ray. Khả năng của một loại enzyme để giữ lại hoạt động của nó đối với lặp đi lặp lại sử dụng làm cho nó phù hợp cho các ứng dụng thương mại. Nó đã được tìm thấy rằng protease từ vi khuẩn Vibrio sp. (V26) có thể được tái sử dụng cho 4 chạy. Hiệu quả đã được tìm thấy để thả sau khi chạy thứ 3 kết quả trong thời gian điều trị lâu hơn để đạt được thủy phân hoàn toàn trong thời gian 4. Sankar et al. (2010) cũng lưu ý rằng các protease từ C. coronatus có thể được tái sử dụng 4 lần và rằng, hạ thấp nồng độ enzyme dẫn đến thời gian phản ứng dài hơn để loại bỏ hoàn toàn gelatin và cũng làm giảm số lượng tái chế. Masui et al. (1999) quan sát thấy rằng thời gian điều trị tăng lên sau mỗi tái sử dụng các enzyme và phân hủy đầu tiên đã được hoàn tất trong vòng 60 phút khi sử dụng 2 cần nhiều hơn 2 giờ. Khi so sánh với các protease báo cáo của Masui et al. (1999) protease kiềm được sử dụng trong nghiên cứu này dường như có hiệu quả hơn vì nó có khả năng chịu được tái sử dụng đến một mức độ lớn hơn. Trong thời đại này, nơi tài nguyên khoáng sản đang bị cạn kiệt nhanh chóng trên toàn thế giới; tái sử dụng hoặc tái chế vẫn là lựa chọn khả thi nhất để làm chậm kiệt sức này. Nghiên cứu này rõ ràng chỉ ra rằng các protease kiềm Vibrio sp. (V26) có tiềm năng được áp dụng để tái chế bạc từ những bộ phim X-quang và rằng quá một cách thân thiện với môi. Như liều duy nhất của enzyme có thể được lặp đi lặp lại sử dụng để phục hồi bạc từ những bộ phim X-ray, nó thể hiện rõ một đặc điểm quan trọng đó là cần thiết cho các ứng dụng thương mại. 5.3 ứng dụng như chất tẩy rửa phụ proteolytic enzyme từ vi sinh vật là các enzym được khai thác rộng rãi nhất trong các chất tẩy rửa rộng ngành công nghiệp thế giới (Godfrey và Tây, 1996; Showell, 1999; Maurer, 2004). Protease kiềm vi khuẩn chiếm ưu thế với một phần đáng kể của thị trường bắt subtilisins và / hoặc kiềm protease từ vi khuẩn Bacillus sp. cho các ứng dụng bột giặt (Ward, 1985).