2.4.3 High Performance Anion Exchan

2.4.3 High Performance Anion Exchange Chromatography (HPAEC)
Using HPAEC for carbohydrate analysis is highlighted again when the separation
of oligosaccharides is considered. The combination of column packing,
eluent composition, and sensitive electrochemical detection enables the
baseline resolution of a homologous series of oligosaccharides such as dextrins
(starch hydrolysates) up to DP 40. Unlike monosaccharide analysis,
where the mobile phase is typically sodium hydroxide alone, mobile phases
for oligosaccharides contain sodium acetate as well to increase ionic strength
and to ensure adequate pushing off of the oligosaccharides from the column.
The Dionex Carbopac PA1 column has been used to separate dextrins up to
DP 3040 using a mobile phase combination of 80% A and 20%B at time zero
with a linear gradient to 90% B and 10% A (where A = 100 mM NaOH and
B = 100 mM NaOH containing 600 mM NaOAC). In the case of dextrins,
sample preparation consists only of drying the sample, diluting an appropriate
amount with water, and filtering (0.45 um filter) prior to injection.
HPAEC has also been used as a preparative technique to separate the oligosaccharides
in beer.39 Again, using a NaOH/NaOAC buffer, an effluant
was collected from the column in 20 second fractions and subjected to further
analysis. Oligosaccharides (composed of glucose, galactose, and xylose)
released by the action of cellulase on seed xyloglucan were separated on a
CarboPak PA100 column (Dionex, Sunnyvale, CA) using gradient elution of
sodium hydroxide and sodium acetate buffers.45 Oligosaccharides such as
isomaltose, kojibiose, gentiobiose, nigerose, and maltose from different varieties
of honey have also been separated using HPAEC-PAD.48
Not limited to the separation of neutral oligosaccharides, oligogalacturonic
acids from strawberry juice have been separated on a HPAEC system using
a sodium hydroxide gradient and a CarboPac PA-100 column.23 Oligogalacturonic
acids resulting from pectin enzymatic depolymerisation were separated
on a Mono-Q anion exchange column (Pharmacia, Upsala, Sweden)
using gradient elution (Na2SO4 in phosphate buffer) and detected on a photodiode
array detector. The anion exchange resin permitted good resolution
of oligomers up to Dp 13.49
The main disadvantage of using HPAEC-PAD for analysing oligosaccharides
is the absence of adequate standards for many oligosaccharide types
(i.e., oligosaccharides from β-glucan, malto-oligosaccharides over DP 7),
which prevents their quantification. In addition, pulsed amperometric detector
response is not equivalent for all sample types and, in fact, detector
response decreases with the increase of DP;19 therefore purified standards
are required in order to facilitate accurate quantification.
2.4.4 Enzymatic Analysis
Enzymatic hydrolysis of oliogsaccharides coupled with chromatographic
separation and identification of released oligosaccharides is commonly used
to quantify oligosaccharides in both simple and complex food systems. This

Kết quả (Việt) 1:

2.4.3 hiệu suất cao Anion trao đổi sắc ký (HPAEC)Sử dụng HPAEC cho phân tích carbohydrate được đánh dấu một lần nữa khi chia tayoligosaccharide xem xét. Sự kết hợp của cột đóng gói,thành phần eluent, và phát hiện điện hóa nhạy cảm cho phép cácđường cơ sở giải quyết các dãy oligosaccharide như dextrins(tinh bột nghiên) lên đến DP 40. Không giống như phân tích monosacarit,giai đoạn di động ở đâu thường hiđrôxít natri, giai đoạn di độngcho oligosaccharide chứa natri axetat cũng như để tăng sức mạnh ionvà để đảm bảo đủ đẩy ra khỏi những oligosaccharide từ cột.Dionex Carbopac PA1 cột đã được sử dụng để tách dextrins lên đếnDP 3040 bằng cách sử dụng một sự kết hợp điện thoại di động giai đoạn 80% A và 20 %B tại thời điểm zerovới một gradient tuyến tính đến 90% B và 10% A (nơi A = 100 mM NaOH vàB = 100 mM NaOH có 600 mM NaOAC). Trong trường hợp của dextrins,chuẩn bị mẫu bao gồm chỉ sấy mẫu, pha loãng một thích hợplượng nước, và lọc (0,45 um lọc) trước khi tiêm.HPAEC cũng đã được sử dụng như là một kỹ thuật đáo để tách các oligosaccharidetrong beer.39 một lần nữa, bằng cách sử dụng một bộ đệm NaOH/NaOAC, một effluantđược thu thập từ cột trong phân số 20 thứ hai và phải chịu thêmphân tích. Oligosaccharide (sáng tác của glucose, galactose và xylose)phát hành bởi các hành động của cellulase trên hạt giống xyloglucan đã được tách ra trên mộtCarboPak PA100 cột (Dionex, Sunnyvale, CA) bằng cách sử dụng gradient elution củanatri hiđrôxit và natri axetat buffers.45 oligosaccharide chẳng hạn nhưisomaltose, kojibiose, gentiobiose, nigerose và maltose từ giống khác nhaumật ong có cũng được tách ra bằng cách sử dụng HPAEC-PAD.48Không giới hạn ở việc tách oligosaccharide trung lập, oligogalacturonicaxit từ nước ép dâu tây đã được tách ra trên một HPAEC hệ thống bằng cách sử dụngmột gradient natri hydroxit và một column.23 CarboPac PA-100 Oligogalacturonicaxit kết quả từ pectin enzym depolymerisation đã được tách ratrên một Mono-Q anion trao đổi cột (Pharmacia, Upsala, Thụy Điển)bằng cách sử dụng gradient elution (Na2SO4 trong vùng đệm phosphat) và được phát hiện trên một photodiodemảng detector. Nhựa anion exchange cho phép giải quyết tốtcủa oligomers đến Dp 13,49Những bất lợi chính của việc sử dụng HPAEC-PAD cho phân tích oligosaccharidelà sự vắng mặt của các tiêu chuẩn phù hợp cho nhiều loại oligosacarit(ví dụ, oligosaccharide từ β-glucan, malto-oligosaccharide hơn DP 7),mà ngăn cản họ định lượng. Ngoài ra, xung amperometric detectorphản ứng không phải là tương đương cho tất cả các loại mẫu, và trong thực tế, máy dòphản ứng giảm theo sự tăng lên của DP; 19 do đó tinh khiết tiêu chuẩnđược yêu cầu để tạo điều kiện chính xác định lượng.2.4.4 enzym phân tíchEnzym thủy phân oliogsaccharides cùng với chromatographicly thân và xác định các phát hành oligosaccharide thường được sử dụngđể định lượng oligosaccharide trong cả hai hệ thống thực phẩm đơn giản và phức tạp. Điều này

Kết quả (Việt) 2:

2.4.3 Hiệu suất cao Anion Trao đổi sắc ký (HPAEC)
Sử dụng HPAEC để phân tích carbohydrate được nhấn mạnh một lần nữa khi tách
các oligosaccharides được xem xét. Sự kết hợp của đóng gói cột,
thành phần dung dịch rửa giải, và phát hiện điện nhạy cảm cho phép
độ phân giải cơ bản của một dãy đồng đẳng của oligosaccharides như dextrin
(thủy phân tinh bột) lên đến DP 40. Không giống như phân tích monosaccharide,
nơi pha động thường là natri hydroxit một mình, điện thoại di động giai đoạn
cho oligosaccharides chứa sodium acetate cũng như để tăng cường độ ion
và đảm bảo sự đẩy ra khỏi các oligosaccharides từ cột.
cột Dionex Carbopac PA1 đã được sử dụng để dextrin tách tối đa
DP 3040 sử dụng một giai đoạn kết hợp điện thoại di động của 80% A và 20% B vào thời điểm zero
với một gradient tuyến tính đến 90% B và 10% A (trong đó A = 100 mM NaOH và
B = 100 mM NaOH có chứa 600 mM NaOAC). Trong trường hợp của dextrin,
chuẩn bị mẫu chỉ gồm khô mẫu, pha loãng một thích hợp
lượng nước, và lọc (0,45 um lọc) trước khi tiêm.
HPAEC cũng đã được sử dụng như là một kỹ thuật chuẩn bị để tách các oligosaccharides
trong beer.39 một lần nữa, sử dụng một bộ đệm NaOH / NaOAC, một effluant
được thu thập từ các cột trong 20 phân số thứ hai và phải chịu thêm
phân tích. Oligosaccharides (gồm glucose, galactose, và xylose)
phát hành bởi các hành động của cellulase trên hạt giống xyloglucan đã được tách ra trên một
cột CarboPak PA100 (Dionex, Sunnyvale, CA) sử dụng rửa giải gradient của
natri hydroxit và natri axetat oligosaccharides buffers.45 như
isomaltose , kojibiose, gentiobiose, nigerose, và maltose từ các giống khác nhau
của mật ong cũng đã được tách bằng HPAEC-PAD.48
Không giới hạn để phân tách các oligosaccharides trung tính, oligogalacturonic
axit từ nước ép dâu tây đã được tách ra trên một hệ thống HPAEC sử dụng
một gradient natri hydroxit và một CarboPac PA-100 column.23 Oligogalacturonic
axit do pectin enzyme depolymerisation đã được tách ra
trên một cột Mono-Q trao đổi anion (Pharmacia, upsala, Thụy Điển)
sử dụng rửa giải gradient (Na2SO4 trong đệm phosphate) và phát hiện trên một photodiode
dò mảng. Các nhựa trao đổi anion được phép giải quyết tốt
các oligomer lên đến Dp 13.49
Những bất lợi chính của việc sử dụng HPAEC-PAD để phân tích oligosaccharides
là sự vắng mặt của các tiêu chuẩn phù hợp cho nhiều loại oligosaccharide
(tức là, oligosaccharides từ β-glucan, malto-oligosaccharides hơn DP 7) ,
trong đó ngăn chặn lượng của họ. Ngoài ra, xung dò amperometric
trả lời là không tương đương cho tất cả các loại mẫu và, trên thực tế, phát hiện
phản ứng giảm với sự gia tăng của DP, 19 tiêu chuẩn do đó tinh khiết
được yêu cầu để tạo điều kiện định lượng chính xác.
2.4.4 Enzyme phân tích
enzyme thủy phân của oliogsaccharides kết hợp với sắc ký
tách và xác định các oligosaccharides phát hành thường được sử dụng
để định lượng oligosaccharides trong cả hai hệ thống thức ăn đơn giản và phức tạp. Điều này