thể hiện như lượng CA được sản xuất cho 1 h mỗi
mg protein trong hỗn hợp phản ứng.
peroxidase (PO) được chiết xuất và xác định
trong ba phân số; sự hòa tan (SPO), ionically
(IPO) và đồng hóa trị (CPO) phân số bức tường bị ràng buộc.
Các fi đầu tiên một, sử dụng như là một nhà tài trợ guaiacol electron
được tham gia vào các phản ứng căng thẳng và hai lat-
ter, sử dụng như là một nhà tài trợ syringaldazine electron, là
cho là có liên quan đến các cation fi ligni
và suberization của tế bào (Fukuda và
Komamine, 1982;. Pandol fi ni et al, 1992). Mẫu
được đồng nhất trong 50 mM Tris-er maleate bu ff
(pH 6.0) và ly tâm ở 1000 • g trong 10 phút ở
2 ° C. Nổi trên mặt đã được tái ly tâm ở
18.000 • g trong 20 phút ở 2 ° C. Siêu thứ hai này
natant được sử dụng để khảo nghiệm PO hòa tan. Bột viên của các
tiên fi và centrifugations thứ hai được gộp chung,
ủ với 0,2 M CaCl2 cho 2 h tại phòng tem-
perature, và sau đó ly tâm ở 18.000 • g cho
20 phút ở 2 ° C. Nổi trên mặt đã được sử dụng để đo lường mức độ
chắc chắn hoạt động của IPO. Các viên được sử dụng
trực tiếp để khảo nghiệm của CPO (Pandol fi ni et al., 1992).
Hoạt động của SPO phần đã được khảo nghiệm tại 60 mM
K-phosphate er bu ff (pH 6.1) có chứa 28 mM
guaiacol và 5 mM H2O2. Sự gia tăng trong
hấp thụ được ghi nhận là 470 nm. Đối với IPO và
CPO khảo nghiệm, hỗn hợp phản ứng fi nal (3 ml) con-
trì 41.6 nM syringaldazine, 40 mM Tris-male-
ăn bu ff er (pH 6.0) và 16 mM H2O2. Những
loại anion của PO sử dụng syringaldazine như một biệt
ci fi c chất nền và đã được cho là có nhiều
liên quan đến fi cation ligni của thành tế bào và
trùng hợp của lĩnh vực phenolic của suberin
(Goldberg et al, 1983;.. Pandol fi ni et al, 1992) .
Hoạt động của IPO được thể hiện qua sự gia tăng
hấp thụ ở 530 nm mỗi phút mỗi protein và mg
hoạt động của CPO được thể hiện qua sự gia tăng
hấp thụ ở 530 nm so với trọng lượng khô của thành tế bào
đang được dịch, vui lòng đợi..
