A T4 polynucleotide kinase lacking

A T4 polynucleotide kinase lacking 3′-phosphatase activity has been purified from E. Coli infected with a mutant T4 phage producing an altered pse T1 gene product. Like the wild-type enzyme, the mutant polynucleotide kinase is made of four subunits of 33 kDa each, effectively transfers the gamma phosphate of ATP to the 5′-OH terminus of DNA and RNA. In addition, the mutant and the wild type polynucleotide kinases require similar magnesium ion concentrations, have the same pH optima and are both inhibited by inorganic phosphate. The mutant polynucleotide kinase is very useful when the 3′- exonuclease activity must be avoided (e.g. 5′-32P terminal labeling of 3′-CMP in view of 3′ end-labeling of RNA species prior to fingerprinting or sequencing).

Kết quả (Việt) 1:

Một polynucleotide T4 kinase thiếu 3 '-phosphatase hoạt động đã được tinh khiết từ E. Coli bị nhiễm một đột biến T4 phage sản xuất một sản phẩm gen thay đổi pse T1. Như enzyme loại hoang, kinase đột biến polynucleotide được thực hiện của bốn subunits 33 kDa, có hiệu quả chuyển phosphate gamma ATP terminus 5 '-OH của DNA và RNA. Ngoài ra, đột biến và hoang dã loại polynucleotide kinase yêu cầu tương tự như nồng độ ion magiê, có cùng một độ pH optima và được cả hai ức chế bởi phốt phát vô cơ. Kinase đột biến polynucleotide là rất hữu ích khi hoạt động 3 '-exonuclease phải được tránh được (ví dụ như 5 ' - 32P thiết bị đầu cuối ghi nhãn của 3 '-CMP theo quan điểm của 3 ' kết thúc nhãn loài RNA trước khi fingerprinting hoặc trình tự).

Kết quả (Việt) 2:

Một kinase T4 polynucleotide thiếu hoạt động 3'-phosphatase đã được tinh chế từ E. Coli bị nhiễm phage T4 đột biến sản xuất một sản phẩm biến đổi gen PSE T1. Giống như các enzyme hoang dại, các polynucleotide kinase đột biến được làm bằng bốn tiểu đơn vị của 33 kDa mỗi, hiệu quả trong việc phosphate gamma của ATP đến ga cuối 5'-OH của DNA và RNA. Ngoài ra, các đột biến và các loại hoang dã kinase polynucleotide đòi hỏi nồng độ ion magiê tương tự, có optima pH tương tự và đều bị ức chế bởi phosphate vô cơ. Các polynucleotide kinase đột biến là rất hữu ích khi các hoạt động 3'- exonuclease phải tránh (ví dụ: 5'-32P terminal ghi nhãn 3'-CMP trong quan điểm của 3 'cuối dán nhãn của các loài RNA trước khi lăn tay hoặc sequencing).