°C for 10 min and then were centrif

°C for 10 min and then were centrifuged for 10 min at
11,600 rpm. The supernatant fluid was used for DNA
extraction and frozen at –20 °C until further use
(1,10).
b- DNA extraction from lung and trachea tissue
samples
Bacterial DNA was extracted from lung and
tracheal tissue by using the DNeasy Tissue kits
(Qiagen GmbH, Hiden, Germany) according to the
manufacturer’s instructions. In this assay, 25 mg of
lung or tracheal tissue was placed into small pieces in
a 1.5 mL microcentrifuge tube and 180 μL of ATL
buffer was added. Then 20 μL of proteinase K was
added and mixed by vortexing and then incubated at
55 °C until the tissue was completely lysed. This was
followed by adding 200 μL of all buffer thoroughly by
pipetting to yield a homogeneous solution. The
solution was again incubated at 70 °C for 10 min and
then received 200 μL of ethanol (96%-100%) and was
mixed by vortexing. The mixture was pipeted into a
DNeasy Mini Spin Column that was placed in a 2 mL
collection tube and was centrifuged at 8000 rpm for 1
min. The DNeasy Mini Spin Column was replaced
with a new collection tube and 500 μL of AW1 buffer
was added and centrifuged as mentioned above. The
DNeasy Mini Spin Column was again replaced with
the new tube and 500 μL of AW2 buffer was added
and centrifuged for 3 min at 14,000 rpm. At the last
stage, the DNeasy Mini Spin Column was transferred
to another tube and 200 μL of AE buffer was pipeted
directly onto the DNeasy membrane and then
centrifuged for 1 min at 8000 rpm. The supernatant
fluid was used for DNA extraction.

Kết quả (Việt) 1:

° C trong 10 phút và sau đó đã ly cho 10 phút tại
11, 600 vòng/phút. Các chất lỏng supernatant được sử dụng ADN
khai thác và đông lạnh ở –20 ° C cho đến khi tiếp tục sử dụng
(1,10).
b-DNA khai thác từ các mô phổi và khí quản
mẫu
vi khuẩn DNA được chiết xuất từ phổi và
sự mô bằng cách sử dụng các bộ dụng cụ DNeasy mô
(Qiagen GmbH, Hiden, Đức) theo các
hướng dẫn của nhà sản xuất. Trong khảo nghiệm này, 25 mg của
phổi hoặc sự mô được đặt thành miếng nhỏ ở
một ống 1.5 mL microcentrifuge và 180 μL ATL
bộ đệm đã được bổ sung. Sau đó 20 μL proteinase K là
thêm và phối khí bởi vortexing và sau đó ủ tại
55 ° C cho đến khi các tế bào hoàn toàn phân. Đây là
theo sau bằng cách thêm 200 μL tất cả đệm triệt để bởi
pipetting để mang lại một giải pháp đồng nhất. Các
giải pháp một lần nữa được ủ tại 70 ° C trong 10 phút và
sau đó nhận được 200 μL ethanol (96% - 100%) và là
phối bởi vortexing. Hỗn hợp được pipeted vào một
DNeasy Mini quay cột được đặt trong một mL 2
bộ sưu tập ống và được ly 8000 rpm cho 1
min. DNeasy Mini quay cột được thay thế
với một ống bộ sưu tập mới và 500 μL AW1 đệm
được thêm vào và ly như đã đề cập ở trên. Các
DNeasy Mini quay cột được thay thế một lần nữa với
ống mới và 500 μL AW2 đệm đã được bổ sung
và ly cho 3 phút tại 14.000 vòng/phút. Lúc cuối
giai đoạn, DNeasy Mini quay cột được chuyển
một ống và 200 μL AE đệm được pipeted
trực tiếp lên màng DNeasy và sau đó
ly cho 1 phút 8000 rpm. Supernatant
chất lỏng được sử dụng cho khai thác DNA.

Kết quả (Việt) 2:

° C trong 10 phút và sau đó được ly tâm trong 10 phút ở
11.600 rpm. Dịch nổi được sử dụng cho DNA
khai thác và đông lạnh ở nhiệt độ -20 ° C cho đến khi sử dụng tiếp
(1,10).
khai thác b-DNA từ phổi và khí quản mô
mẫu
vi khuẩn DNA được chiết xuất từ phổi và
mô khí quản bằng cách sử dụng các bộ dụng cụ mô DNeasy
( Qiagen GmbH, Hiden, Đức) theo
hướng dẫn của nhà sản xuất. Trong khảo nghiệm này, 25 mg
phổi hoặc khí quản mô đã được đặt thành từng miếng nhỏ trong
một ml ống 1,5 microcentrifuge và 180 ml ​​ATL
đệm được thêm vào. Sau đó 20 ml proteinase K đã được
thêm vào và trộn bởi vortexing và sau đó ủ ở
55 ° C cho đến khi các mô đã hoàn toàn ly giải. Điều này đã được
theo sau bằng cách thêm vào 200 ml của tất cả các bộ đệm triệt để bởi
pipetting để mang lại một giải pháp đồng nhất. Các
giải pháp một lần nữa được ủ ở 70 ° C trong 10 phút và
sau đó nhận được 200 ml ethanol (96% -100%) và đã được
pha trộn bởi vortexing. Hỗn hợp này được pipeted thành một
spin Cột DNeasy Mini đã được đặt trong 2 ml
ống thu thập và được ly tâm ở 8000 rpm trong 1
phút. Spin Cột DNeasy Mini được thay thế
với một ống bộ sưu tập mới và 500 ml AW1 đệm
được thêm vào và ly tâm như đã đề cập ở trên. Các
spin Cột DNeasy Thống một lần nữa được thay thế bằng
ống mới và 500 ml AW2 đệm đã được thêm vào
và ly tâm trong vòng 3 phút ở 14.000 rpm. Ở cuối
giai đoạn, Spin Cột DNeasy Thống được chuyển
đến một ống và 200 ml AE đệm được pipeted
trực tiếp lên màng DNeasy và sau đó
ly tâm trong 1 phút tại 8000 rpm. Các bề
chất lỏng được sử dụng để chiết xuất DNA.