Giới thiệuGalactoza oxidase (GalOx1; d-galactoza: oxy 6-oxidoreductaza, EC 1.1.3.9) là một loại enzyme monomeric 68-kDa chứa một ion đồng đơn [1] và một cofactor bắt nguồn axit amin [2] và [3], được hình thành bởi qua một Cys và một dư lượng Tyr trong vùng lân cận trực tiếp của đồng [4] [5] và [6]. Kết Thiôête cross-link Tyr-Cys là tạo ra post-translationally [4] và [7] và đã được chứng minh để ảnh hưởng đến sự ổn định, việc giảm tiềm năng [8] và hiệu quả tác dụng xúc tác của enzym [9] và [10]. Nó đã được phân loại như là một thành viên của gia đình hoạt động-men tiêu hóa carbohydrate AA5, phân họ 2 [11]. GalOx catalyzes quá trình oxy hóa hai-điện tử [3] và [12] của nhóm C6-hiđrôxyl của dư lượng d-galactoza nonreducing [13] và một loạt các chính rượu để aldehyde tương ứng với đồng thời giảm oxy để hydrogen peroxide [14], [15], [16] và [17]. Trong thời gian xúc tác ion kim loại và nhóm cysteine-sửa đổi tyrosine trải qua 1-điện tử redox interconversions [18]. Mặc dù một đặc trưng bề mặt rộng, GalOx đúng là regioselective và không có rượu thứ cấp là oxy hóa [19]. Tuy nhiên, enzym chấp nhận nhiều rượu chính chẳng hạn như benzyl rượu [20], và glycerol [21] như giảm chất nền. GalOx Hiển thị stereospecificity đáng kể trong phản ứng với đường [22], đang rất nhạy cảm nhất định hướng nhóm C4-OH, và do đó nó cho thấy hoạt động với galactoza nhưng không phải với đường. Vì đặc trưng này, kỹ thuật phân tích khác nhau được dựa trên GalOx, chẳng hạn như việc xác định đường sữa lactoza trong sữa và các sản phẩm sữa [23] hoặc kiểm tra histochemical của các tế bào chất nhờn tiết [24]. Hơn nữa, GalOx đã được sử dụng trong biosensors cho các phép đo galactoza và dẫn xuất của nó trong sinh học chất lỏng [25], để nhãn dư lượng galactoza trong glycoconjugates [26], và cảm ứng của interferon trong nhân tế bào lympho văn hóa [27] và [28]. GalOx được xem như một chất xúc tác cạnh tranh và hiệu quả chi phí so với chuyển hóa cho sản xuất hóa chất tốt cho mục đích dược phẩm hoặc trong công nghiệp thực phẩm, ví dụ GalOx được sử dụng cho việc chuyển đổi đường như d-galactoza cho các thực phẩm cấp qua đại lý [29], [30], [31] và [32]. Ứng dụng quan trọng khác cho GalOx là istomodification của tế bào bề mặt carbohydrate và đã được sử dụng trong tế bào ghi nhãn nghiên cứu và hchemical nhuộm [19]. GalOx là thú vị để sử dụng trong các quá trình công nghiệp chẳng hạn như derivatization của Nhựa guar và liên quan polyme là tốt [33] và [34].The enzyme is secreted by a number of fungal species, of which Fusarium graminearum (formerly classified as Dactylium dendroides) is the most extensively studied [35], [36], [37], [38], [39], [40], [41], [42] and [43]. The production and purification of GalOx has been reported from its natural fungal source [26], [39], [44], [45], [46], [47], [48] and [49], furthermore, various GalOx genes were cloned and successfully expressed in the filamentous fungi Aspergillus nidulans [50] and [51], Aspergillusoryzae and Fusarium venenatum [52], which have no endogenous GalOx, in the methylotrophic yeast Pichia pastoris [4], [10], [33], [36], [53], [54], [55] and [56] and in the bacterium Escherichia coli [55], [57], [58] and [59]. Typically, wild-type fungal GalOx is produced as a preproform carrying an N-terminal signal sequence, which is removed upon secretion, yielding the immature proform. The prosequence in this form was suggested to function as an intramolecular chaperone supporting copper binding and cofactor formation [42] and [50]. The maturation of GalOx requires several successive steps including cleavage of the signal sequence, which directs translocation, metal binding and cofactor processing [12] and [43]. Subsequently, the prosequence is removed and the Tyr-Cys cofactor is formed by self-processing reactions [2] and [7].Trong giấy hiện nay chúng tôi mô tả thể hiện nhân bản và tái tổ hợp của một gen gao mới mà không có của nó tự prepro từ Fusarium sambucinum trong E. coli. Hơn nữa, làm sạch và các đặc tính sinh hóa của enzyme được báo cáo. Chất nhận khác ở điện tử, và có thể tính cũng như các chất ức chế đã được thử nghiệm cho hiệu quả của họ trên GalOx hoạt động
đang được dịch, vui lòng đợi..