After purification, protoplast yiel

After purification, protoplast yield was determined by counting, using Fuchs Rosenthal hemocytometer chamber. The working density of protoplasts was adjusted to 8 × 105 protoplasts per ml. Culture system with protoplast embedding in a thin calcium alginate layer (Ca-alginate) was used, based on a slightly modified protocol of Damm et al. (1989). Equal volumes of protoplast suspension in the culture medium and 2.8% (w/v) alginic acid sodium salt (Sigma) in 0.4 M mannitol solution were mixed carefully. Aliquots (app. 300 μl) of protoplasts/alginate mixture were spread onto 1% (w/v) agar (Biocorp) containing 20 mM CaCl2, 0.4 M mannitol in 6 cm Petri dishes. By circular movement of the Petri dish protoplast suspension was forced to form a thin layer.

Kết quả (Việt) 1:

Sau khi làm sạch, protoplast năng suất đã được xác định bằng cách đếm, bằng cách sử dụng Fuchs Rosenthal hemocytometer buồng. Mật độ làm việc của protoplasts được điều chỉnh để 8 × 105 protoplasts / ml. văn hóa hệ thống với protoplast nhúng trong một lớp Nitrite NaNO2 mỏng canxi (Ca-Nitrite NaNO2) được sử dụng, dựa trên một giao thức hơi sửa đổi của Damm et al. (1989). Bằng khối lượng protoplast hệ thống treo ở các phương tiện truyền thông văn hóa và 2,8% (w/v) alginic muối natri của axít (Sigma) 0.4 M mannitol giải pháp đã được pha trộn một cách cẩn thận. Aliquots (app. 300 μl) protoplasts/Nitrite NaNO2 hỗn hợp đã được lan truyền lên 1% (w/v) agar (Biocorp) chứa 20 mM CaCl2, 0.4 M mannitol 6 cm Petri món ăn. Bởi các chuyển động tròn của món Petri protoplast hệ thống treo buộc để tạo thành một lớp mỏng.

Kết quả (Việt) 2:

Sau khi tinh chế, sản lượng nguyên hình được xác định bằng cách đếm, sử dụng buồng hemocytometer Fuchs Rosenthal. Mật độ làm việc của tế bào trần đã được điều chỉnh đến 8 × 105 tế bào trần mỗi ml. hệ thống văn hóa với nguyên hình nhúng trong một lớp canxi alginate mỏng (Ca-alginate) đã được sử dụng, dựa trên một giao thức thay đổi chút ít của Damm et al. (1989). thể tích của hệ thống treo kiểu mẫu đầu tiên trong môi trường nuôi cấy và 2,8% (w / v) natri axit alginic muối (Sigma) trong 0,4 M giải pháp mannitol đã được pha trộn một cách cẩn thận. Dung dòch (ứng dụng. 300 ml) của tế bào trần hỗn hợp / alginate đã được lan truyền trên 1% (w / v) agar (Biocorp) có chứa 20 mM CaCl2 0,4 M mannitol trong 6 cm đĩa Petri. Bằng cách chuyển động tròn của Petri treo món ăn kiểu mẫu đầu tiên đã buộc phải hình thành một lớp mỏng.