by an increased fluorescence signal

by an increased fluorescence signal (Holland and others 1991). If the species under study is present in the matrix, a specific signal can be observed. As well as meeting the need for quantitative deter-mination in meat species, this technique also has other advantages like higher sensitivity and specifity, a larger dynamic range of detection and less carry-over contamination risk (Rojas and others 2011; Yusop and others 2011).
Many applications are based on intercalating fluorescent dyes like SYBR Green (Walker and others 2003; L´opez-Andreo and others 2006; Mart´ın and others 2009). This method requires the greatest sequence specificity due to the fact that these types of dyes bind to all double-stranded DNA present, including any nonspecificPCRproductsandtheprimer–dimercomplex.Thereforethe real-time quantitative PCR procedure for species identification is generally based on the use of a TaqMan fluorogenic probe (Hird and others 2005; Rodriguez and others 2005; Kesmen and others 2009; K¨oppel and others 2011). This method utilizes an additional primer, which is also bound specifically to the target DNA sequence during the annealing step. This primer is an oligonucleotide with both a reporter fluorescent dye and a quencher dye attached. The accumulation of specific PCR products is detected by hybridization and cleavage of a double-labelled fluorogenic probe during the amplification reaction. There are numerous PCR-based techniques available to identify precisely the origin of poultry meat. Some of these techniques include the restriction fragment length polymorphism (RFLP) of PCR products of mitochondrial 12S rRNA gene (Girish and others 2007), specific PCR (Rodr´ıguez and others 2003; Mane and others 2009), random amplified polymorphic DNA-PCR (RAPD-PCR)fingerprints(Calvoandothers2001;Saezandothers2004),andactingene-relatedpolymerasechainreaction(Hopwood and others 1999). Generally, these methods offer qualitative or semi-quantitative measurement. Although numerous studies,based on real-time PCR,have been devoted to the identification of red meat animal species, studies for detecting poultry species are rare. For example, Dooley and

Kết quả (Việt) 1:

bởi một tín hiệu tăng fluorescence (Hà Lan và những người khác năm 1991). Nếu các loài đang được nghiên cứu là hiện diện trong ma trận, một tín hiệu specific có thể được quan sát thấy. Cũng như đáp ứng nhu cầu định lượng ngăn chặn-mination trong thịt loài, kỹ thuật này cũng có lợi thế khác như độ nhạy cảm cao và specifity, một phạm vi lớn hơn năng động, phát hiện và ít nguy cơ ô nhiễm chi (Rojas và những người khác năm 2011; Yusop và những người khác năm 2011). Nhiều ứng dụng được dựa trên intercalating fluorescent thuốc nhuộm như SYBR màu xanh lá cây (Walker và những người khác năm 2003; L´opez-Andreo và những người khác năm 2006; Mart´ın và những người khác năm 2009). Phương pháp này đòi hỏi specificity chuỗi lớn nhất do thực tế là các loại thuốc nhuộm liên kết với tất cả đôi-stranded ADN hiện tại, bao gồm bất kỳ nonspecificPCRproductsandtheprimer-dimercomplex. Thereforethe thời gian thực định lượng PCR thủ tục cho loài identification nói chung được dựa trên việc sử dụng một thăm dò fluorogenic TaqMan (Hird và những người khác năm 2005; Rodriguez và những người khác năm 2005; Kesmen và những người khác năm 2009; K¨oppel và những người khác năm 2011). Phương pháp này sử dụng một mồi bổ sung, cũng là bị ràng buộc specifically đến mục tiêu trình tự ADN trong bước tôi. Mồi này là một oligonucleotide với một phóng viên fluorescent thuốc nhuộm và thuốc nhuộm quencher thuộc. Sự tích tụ của specific PCR sản phẩm được phát hiện bởi lai ghép và cleavage một thăm dò đôi với nhãn hiệu fluorogenic trong phản ứng amplification. Có rất nhiều đảng Cộng sản Romania dựa trên kỹ thuật có sẵn để xác định chính xác nguồn gốc của gia cầm thịt. Một số các kỹ thuật này bao gồm đa hình chiều dài đoạn hạn chế (RFLP) của Đảng Cộng sản Romania sản phẩm của ti thể 12S rRNA gene (Girish và những người khác năm 2007), specific Đảng Cộng sản Romania (Rodr´ıguez và những người khác năm 2003; Mane và những người khác năm 2009), ngẫu nhiên amplified bướu DNA-Đảng Cộng sản Romania (RAPD PCR) fingerprints (Calvoandothers2001; Saezandothers2004), andactingene-relatedpolymerasechainreaction(Hopwood and others 1999). Nói chung, những phương pháp này cung cấp đo lường chất lượng hoặc bán định lượng. Mặc dù rất nhiều nghiên cứu, dựa trên thời gian thực Đảng Cộng sản Romania, đã được dành cho identification thịt đỏ loài động vật, nghiên cứu để phát hiện gia cầm loài là rất hiếm. Ví dụ, Dooley và

Kết quả (Việt) 2:

bằng một tín hiệu tăng fl uorescence (Hà Lan và những người khác 1991). Nếu loài được nghiên cứu có trong ma trận, một tín hiệu fi c Speci có thể được quan sát thấy. Cũng như đáp ứng nhu cầu về số lượng ngăn chặn-mination trong loài thịt, kỹ thuật này cũng có những ưu điểm khác như độ nhạy cao hơn và Speci fi ty, một dải động lớn hơn của phát hiện và ít thực hiện giao nguy cơ ô nhiễm (Rojas và những người khác 2011; Yusop và những người khác 2011 .)
Nhiều ứng dụng dựa trên intercalating fl uorescent thuốc nhuộm như SYBR Green (Walker và những người khác 2003; L'opez-Andreo và những người khác 2006; Mart'ın và những người khác 2009). Phương pháp này đòi hỏi phải có trình tự đặc hiệu thành phố fi lớn nhất do thực tế rằng các loại thuốc nhuộm liên kết với tất cả các mặt DNA sợi kép, bao gồm bất kỳ thủ tục PCR định lượng nonspeci fi cPCRproductsandtheprimer-dimercomplex.Thereforethe thời gian thực cho các loài fi identi cation nói chung là dựa trên việc sử dụng một TaqMan fl dò uorogenic (Hird và những người khác 2005; Rodriguez và những người khác 2005; Kesmen và những người khác 2009; Koppel và những người khác 2011). Phương pháp này sử dụng một lớp sơn lót bổ sung, mà cũng là ràng buộc fi Speci biệt với trình tự DNA mục tiêu trong bước ủ. Mồi này là một oligonucleotide với cả một phóng viên fl uorescent thuốc nhuộm và chất nhuộm thức uống kèm theo. Sự tích lũy các sản phẩm c fi PCR đặc hiệu được phát hiện bằng cách lai tạo và phân tách của một tàu thăm dò fl uorogenic đúp dán nhãn trong phản ứng fi cation ampli. Có nhiều kỹ thuật PCR dựa trên sẵn để xác định chính xác nguồn gốc của thịt gia cầm. Một số các kỹ thuật bao gồm các đa hình độ dài hạn chế fragment (RFLP) của sản phẩm PCR của ty thể gen 12S rRNA (Girish và những người khác 2007), fi Speci c PCR (Rodr'ıguez và những người khác 2003; Mane và những người khác 2009), ngẫu nhiên fi ampli ed polymorphic DNA-PCR và những người khác, 1999). Nói chung, các phương pháp đo lường cung cấp tính hoặc bán định lượng. Mặc dù nhiều nghiên cứu, dựa trên PCR thời gian thực, đã được dành cho các fi cation identi đỏ các loài động vật thịt, nghiên cứu để phát hiện các loài gia cầm là rất hiếm. Ví dụ, Dooley và