Each PCR mixture contained 2.0 μl o

Each PCR mixture contained 2.0 μl of a 2 mM deoxynucleoside
triphosphate mixture, 2.5 μl of 10X reaction buffer,
2.5 μl of 25 mM MgCl2, 0.25 μl of HotStart Taq DNA
polymerase (MBI, Fermentas), 1 μl of a 100 μM primer
mixture containing 23S rRNA (0.5 μM), hipO (1 μM) and
glyA (0.5 μM) primers, 1 μl of chromosomal DNA, and
MiliQ water to a final volume of 25 μl. DNA amplification
was carried out in a thermocycler using an initial denaturation
step at 95°C for 6 min followed by 30 cycles of amplification
(denaturation at 0.5 min, annealing at 53°C for
0.5 min, and extension at 72°C for 0.5 min), ending with a
final extension at 72°C for 7 min. Each PCR product
(11 μl) was loaded into a 1.3% TopVisionLM GQ Agarose
(MBI, Fermentas) gel wells containing 0.05 μl/ml of ethidium
bromide solution and analyzed by gel electrophoresis.
The gel was visualized on an UV board. The
GeneRulerTM 100 bp DNA Ladder (MBI, Fermentas) was
used as the molecular size marker.

Kết quả (Việt) 1:

Mỗi Đảng Cộng sản Romania hỗn hợp chứa 2.0 μl deoxynucleoside 2 mMhỗn hợp triphosphate, 2.5 μl 10 X phản ứng đệm,2.5 μl MgCl2 25 mM, 0,25 μl HotStart Taq ADNpolymerase (MBI, Fermentas), 1 μl primer 100 μMhỗn hợp chứa 23S rRNA (cách 0.5 μM), hipO (1 μM) vàglyA (cách 0.5 μM) chất nền, mồi, 1 μl nhiễm sắc thể ADN, vàMiliQ nước để cuối cùng diện tích 25 μl. DNA khuếch đạiđược thực hiện trong một thermocycler bằng cách sử dụng một denaturation ban đầubước tại 95° C trong 6 phút tiếp theo các chu kỳ 30 của khuếch đại(denaturation lúc cách 0.5 phút, ủ ở 53° C chocách 0.5 min, và phần mở rộng ở 72 ° C cho min cách 0.5), kết thúc với mộtcuối cùng mở rộng tại 72° C trong 7 phút. Mỗi sản phẩm PCR(11 μl) đã được nạp vào một 1,3% TopVisionLM GQ Agarose(MBI, Fermentas) gel wells chứa 0,05 μl/ml ethidiumgiải pháp bromua và phân tích bằng gel electrophoresis.Các gel được hình dung trên một ban tia UV. CácGeneRulerTM 100 bp bậc thang DNA (MBI, Fermentas) làsử dụng các điểm đánh dấu kích thước phân tử.

Kết quả (Việt) 2:

Mỗi hỗn hợp PCR chứa 2,0 ml một mM 2 deoxynucleoside
hỗn hợp triphosphate, 2,5 ml đệm 10X phản ứng,
2,5 ml 25 mM MgCl 2, 0,25 ml HotStart Taq DNA
polymerase (MBI, Fermentas), 1 ml 100 mM mồi
hỗn hợp chứa 23S rRNA (0,5 mM), HiPo (1 mM) và
glyA (0,5 mM) mồi, 1 ml DNA nhiễm sắc thể, và
nước MiliQ đến một khối lượng cuối cùng của 25 ml. Khuếch đại DNA
được thực hiện trong một thermocycler sử dụng một biến tính ban đầu
bước ở 95 ° C trong 6 phút tiếp theo là 30 chu kỳ khuếch đại
(biến tính ở mức 0,5 phút, ủ ở 53 ° C trong
0,5 phút, và mở rộng ở 72 ° C trong 0,5 phút ), kết thúc với một
phần mở rộng cuối cùng ở 72 ° C trong 7 phút. Mỗi sản phẩm PCR
(11 ml) được nạp vào một TopVisionLM 1,3% GQ Agarose
(MBI, Fermentas) giếng gel có chứa 0,05 ml / ml ethidium
giải pháp bromide và phân tích bằng điện di gel.
Gel này đã được nhìn thấy trên một ban UV. Các
GeneRulerTM 100 bp DNA Ladder (MBI, Fermentas) đã được
sử dụng như kích thước marker phân tử.