and complete its cell cycle. This p

and complete its cell cycle. This point is termed ‘restriction point’ (R point);it is a central event in normal cellular proliferation control (Lundberg et al., 1999). It has been demonstrated that pRb is the molecular device that serves as the R point switch. pRb is hypophosphorylated in resting G0 cells, is increasingly phosphorylated during progression through G1 and is maintained in a hyperphosphorylated state until late mitosis (Weinberg, 1995;Claudio et al., 1996, 2002). pRb phosphorylation seems to be related to mitogenic signals, which converge on the cell cycle machinery, represented by the cyclin D1/cdk4 (cdk6) complex in the early and mid-G1, and composed of cyclin E/cdk2 in late G1. Like pRb, p107 is phosphorylated by the cyclin D1– cdk4/6 complex activity, whereas Rb2/p130 phosphorylation depends on the cyclin D3–cdk4 complex activity. All of the three pocket proteins are phosphorylated by the cyclin E/cdk2 complex, and Rb2/p130 and p107, but not Rb/p105, are phosphorylated by cyclin A–cdk2. Pocket proteins may also regulate the earlier transition from G0 to G1 (Cobrinik, 2005). In G0, the RNA content is at low levels and hypophosphorylated pocket proteins contribute to the G0 state by repressing ribosomal RNA and tRNA gene expression. Ren and Rollins (2004) recently found that the cyclin C/cdk3 complex is able to increase the RNA content while mediating G0 exit by phosphorylating pRb in the G0 state. As expression of cyclin C precedes that of the cyclin D, in keeping with these considerations, the pRb phosphorylation by cyclin C–Cdk3 mediates the G0–G1 transition. When in its actively growth-suppressing hypophosphorylated state, pRb physically associates with E2F factors and blocks their ability to activate expression of genes that encode products necessary for S-phase progression. The Rb proteins repress gene transcription, required for transition from G1 to S phase, by directly binding to the transactivation domain of E2F and by binding to the promoter of these genes as a complex with E2F (Adams et al., 1995). Pocket proteins regulate G1–S transition also through E2F-independent mechanisms: (1) p107 and p130 bind and inhibit the cyclin E/cdk2 and cyclin A/cdk2 kinases and (2) pRb inhibits cdk activity and G1–S progression by increasing the expression of p27 and stabilizing the p27 protein by binding the Skp2 protein and interfering with the Skp2–p27 complex, thus avoiding p27 ubiquitination. Progression of the cells through G1 and S phases requires inactivation of Rb protein phosphorylation. The phosphorylation status of these proteins is regulated by Cdk inhibitor (CKI) binding to the cyclin/cdk complexes (Sherr et al., 1995). The CKI inhibitors p15, p16 and p17 specifically act on cyclin D kinase activity, whereas p21, p27 and p57 act on all other cyclin/cdk complexes. It has been reported that both cyclin D1 overexpression and related CKI inhibitor alterations produce persistent hyperphosphorylation of pRb, resulting in cell cycle arrest. Extracellular physiological signals induce the phosphorylation of Rb protein, affecting the decision totransit the R point. Mitogens directly induce rapid expression of cyclin D, which begins to inactivate pRb through its ability to associate with its previously cited cdk4 (cdk6) partners (Matsushime et al., 1991). Each type of cyclin D could receive different upstream signals that converge on it, so that we can say that the control of cell proliferation in various cell types, known to be exercised by different mitogens, is modulated via expression of a distinct D-type cyclin gene, which is under the control of a distinct transcriptional promoter. The common point is that all these different signals converge to a common target, which is pRb. There is no evidence that mitogenic stimuli directly modulate the levels of cyclin E or cyclin/cdk2 complex. Extracellular signals can negatively affect the cyclin/cdk machinery as well. Serum starvation leads to a collapse of cyclin D levels and activity and to an increase of specific CKI (Resnitzky et al., 1994). Rb activity in cell cycle machinery can also be regulated at the transcriptional and protein levels by the transcription factor ICBP90 (Hopnefer, 2000). ICBP90 (inverted CCAAT box binding protein of 90 kDa) is a transcriptional regulator of the topoisomerase II alpha gene and it has also two consensus binding sites for pRb in its primary sequence. The promoter of the Rb gene contains several putative binding sites for ICBP90. Overexpression of ICBP90 induces downregulation of pRb expression in lung fibroblasts, as a result of mRNA decrease, and increases both the S- and G2/M-phase cell fractions of fibroblasts and the topoisomerase IIalpha expressions. DNA chromatin immunoprecipitation experiments show that ICBP90 binds to the Rb gene promoter under its methylated status. These results show that ICBP90 regulates Rb at the protein and gene transcription levels, thus favoring

Kết quả (Việt) 1:

và hoàn thành chu kỳ tế bào của nó. Điểm này được gọi là 'hạn chế điểm' (R điểm); đó là một sự kiện Trung tâm kiểm soát sự gia tăng tế bào bình thường (Lundberg và ctv., 1999). Nó đã được chứng minh rằng pRb là thiết bị phân tử mà phục vụ như chuyển đổi điểm R. pRb là hypophosphorylated trong nghỉ ngơi G0 tế bào, ngày càng phosphorylated trong sự tiến triển qua G1 và được duy trì trong một trạng thái hyperphosphorylated cho đến cuối nguyên phân (Weinberg, 1995; Claudio ctv., 1996, 2002). pRb phosphorylation dường như có liên quan đến tín hiệu mitogenic, hội tụ về các máy móc chu kỳ tế bào, đại diện bởi các cyclin D1/cdk4 (cdk6) phức tạp ở đầu và giữa G1, và gồm các cyclin E/cdk2 ở cuối G1. Giống như pRb, p107 phosphorylated bởi các hoạt động phức tạp cyclin D1-cdk4/6, trong khi Rb2/p130 phosphorylation phụ thuộc vào các hoạt động phức tạp cyclin D3-cdk4. Tất cả các protein ba túi được phosphorylated bởi cyclin E/cdk2 phức tạp, và Rb2/p130 và p107 nhưng không Rb/p105, phosphorylated bởi cyclin A-cdk2. Túi protein cũng có thể điều chỉnh chuyển đổi trước đó từ G0 G1 (Cobrinik, 2005). Ở G0, nội dung RNA là ở mức thấp và hypophosphorylated túi protein đóng góp cho nhà nước G0 bởi repressing RNA ribosome và những biểu hiện gen. Ren và Rollins (2004) đã tìm thấy rằng cyclin C/cdk3 phức tạp có thể làm tăng nội dung RNA trong khi trung gian G0 thoát bởi phosphorylating pRb bang G0. Như biểu hiện của cyclin C đến trước của cyclin D, để phù hợp với những cân nhắc, phosphorylation pRb bởi cyclin C-Cdk3 hàm chuyển đổi G0-G1. Khi bang của nó tích cực tăng trưởng đàn áp hypophosphorylated, pRb cơ thể kết hợp với các yếu tố E2F và khối các khả năng của họ để kích hoạt các biểu hiện của gen mã hóa sản phẩm cần thiết cho S-giai đoạn tiến triển. Các protein Rb repress gen phiên mã, cần thiết cho quá trình chuyển đổi từ G1 sang giai đoạn S, bằng cách trực tiếp ràng buộc để miền transactivation của E2F và ràng buộc promoter của những gen là một phức hợp với E2F (Adams và ctv., 1995). Túi protein điều chỉnh quá trình chuyển đổi G1-S cũng thông qua cơ chế độc lập E2F: (1) p107 p130 ràng buộc và ức chế các cyclin E/cdk2 và cyclin kinase A/cdk2 và (2) pRb ức chế hoạt động cdk và tiến triển G1-S bằng cách tăng sự biểu hiện của p27 và ổn định p27 protein binding Skp2 protein và can thiệp với khu phức hợp Skp2-p27, như vậy tránh p27 ubiquitination. Sự tiến triển của các tế bào thông qua giai đoạn G1 và S yêu cầu ngừng hoạt động của Rb protein phosphorylation. Tình trạng phosphorylation các protein này được quy định bởi Cdk chất ức chế (CKI) ràng buộc để cyclin cdk tổ hợp (Sherr và ctv., 1995). Các thuốc ức chế p15 CKI, p16 và p17 đặc biệt hành động cyclin D kinase hoạt động, trong khi p21, p27 và p57 hành động trên tất cả các tổ hợp cyclin cdk khác. Nó đã được báo cáo liên quan đến CKI chất ức chế thay đổi và cyclin D1 tế sản xuất liên tục hyperphosphorylation pRb, dẫn đến bắt giữ chu kỳ tế bào. Tín hiệu ngoại bào sinh lý gây ra việc phosphorylation protein Rb, ảnh hưởng đến quyết định totransit điểm R. Mitogens trực tiếp gây ra các biểu hiện nhanh chóng của cyclin D, bắt đầu để hủy kích hoạt pRb thông qua khả năng của mình để liên kết với cdk4 trước đó trích dẫn (cdk6) đối tác (Matsushime và ctv., năm 1991). Mỗi loại cyclin D có thể nhận được tín hiệu ngược dòng khác nhau hội tụ về nó, do đó chúng tôi có thể nói rằng sự kiểm soát của sự gia tăng tế bào trong tế bào khác nhau, được biết đến phải được thực hiện bởi mitogens khác nhau, điệu thông qua biểu hiện của một khác biệt D-type cyclin gen, mà là dưới sự kiểm soát của một promoter transcriptional khác biệt. Điểm chung là tất cả các tín hiệu khác nhau hội tụ về một mục tiêu chung là pRb. Có là không có bằng chứng rằng mitogenic kích thích trực tiếp điều chỉnh mức độ của cyclin E hoặc cyclin/cdk2 phức tạp. Tín hiệu ngoại bào tiêu cực có thể ảnh hưởng đến bộ máy cyclin cdk. Huyết thanh đói dẫn đến một sự sụp đổ của cyclin D cấp và hoạt động và tăng trưởng dân số cụ thể CKI (Resnitzky và ctv., 1994). RB hoạt động trong chu trình tế bào máy móc cũng có thể được quy định tại transcriptional và protein cấp của yếu tố phiên mã ICBP90 (Hopnefer, 2000). ICBP90 (đảo ngược CCAAT hộp ràng buộc protein của 90 kDa) là một điều transcriptional của topoisomerase II gen alpha và nó có cũng hai đồng thuận ràng buộc các trang web cho pRb trong trình tự chính mình. Promoter của Rb gen chứa nhiều giả định ràng buộc các trang web ICBP90. Tế ICBP90 gây ra downregulation pRb biểu hiện ở phổi fibroblasts, là kết quả của mRNA giảm, và tăng cả S - và M-G2 giai đoạn phân số di động của fibroblasts và các biểu hiện IIalpha topoisomerase. DNA chromatin immunoprecipitation thí nghiệm Hiển thị ICBP90 liên kết với Rb promoter gen dưới tình trạng xitôzin của nó. Những kết quả hiển thị ICBP90 quy định Rb ở cấp protein và gen phiên mã, do đó favoring

Kết quả (Việt) 2:

và hoàn thành chu kỳ tế bào của nó. Điểm này được gọi là "điểm hạn chế '(R điểm), nó là một sự kiện trung ương trong việc kiểm soát sự tăng sinh tế bào bình thường (Lundberg et al., 1999). Nó đã được chứng minh rằng PRB là thiết bị phân tử phục vụ như là chuyển đổi điểm R. PRB là hypophosphorylated trong nghỉ ngơi tế bào G0, đang ngày càng được phosphoryl hóa trong quá trình tiến triển thông qua G1 và được duy trì trong trạng thái hyperphosphorylated cho đến cuối quá trình nguyên phân (Weinberg, 1995;. Claudio et al, 1996, 2002). PRB phosphoryl dường như có liên quan đến tín hiệu mitogenic, hội tụ trên máy chu kỳ tế bào, đại diện bởi các phức tạp cyclin D1 / CDK4 (cdk6) trong / CDK2 đầu và giữa G1, và bao gồm các cyclin E vào cuối G1. Giống như PRB, p107 được phosphoryl hóa bởi các cyclin D1- CDK4 / 6 hoạt động phức tạp, trong khi Rb2 / p130 phosphoryl hóa phụ thuộc vào cyclin D3-CDK4 hoạt động phức tạp. Tất cả ba protein túi được phosphoryl hóa bởi sự phức tạp cyclin E / CDK2, và Rb2 / p130 và p107, nhưng không Rb / P105, được phosphoryl hóa bởi cyclin A-CDK2. Pocket protein cũng có thể điều chỉnh quá trình chuyển đổi trước đó từ G0 để G1 (Cobrinik, 2005). Trong G0, nội dung RNA đang ở mức thấp và protein túi hypophosphorylated đóng góp cho nhà nước G0 bởi kiềm RNA ribosome và biểu hiện gen tRNA. Ren và Rollins (2004) gần đây cho thấy rằng phức cyclin C / cdk3 có thể làm tăng hàm lượng RNA trong khi trung gian xuất cảnh G0 bởi phosphorylating PRB ở bang G0. Là biểu hiện của cyclin C trước đó của cyclin D, phù hợp với những nhận xét này, phosphoryl hóa PRB bởi cyclin C-Cdk3 làm trung gian chuyển đổi G0-G1. Khi ở trạng thái hypophosphorylated tích cực tăng trưởng ức chế của nó, PRB thể chất cộng với các yếu tố E2F và các khối khả năng của họ để kích hoạt biểu hiện của gen mã hóa sản phẩm cần thiết cho S-giai đoạn tiến triển. Các protein Rb áp phiên mã gen, cần thiết cho quá trình chuyển đổi từ G1 đến pha S, bằng cách liên kết trực tiếp đến miền transactivation của E2F và bằng cách gắn vào promoter của các gen này là một phức hợp với E2F (Adams et al., 1995). Pocket protein điều tiết G1-S chuyển đổi cũng thông qua cơ chế E2F-độc lập: (1) p107 và p130 ràng buộc và ức chế cyclin E / CDK2 và cyclin A / CDK2 kinase và (2) PRB ức chế cdk hoạt động và G1-S tiến triển bằng cách tăng biểu hiện của p27 và ổn định các protein p27 bằng cách gắn các protein Skp2 và can thiệp với sự phức tạp Skp2-p27, do đó tránh p27 ubiquitination. Tiến triển của các tế bào thông qua G1 và S giai đoạn đòi hỏi bất hoạt của phosphoryl hóa protein Rb. Tình trạng phosphoryl hóa các protein này được quy định bởi CDK chất ức chế (CKI) liên kết với các khu phức hợp cyclin / cdk (Sherr et al., 1995). Các chất ức chế CKI P15, p16 và P17 đặc biệt hành động về hoạt động kinase cyclin D, trong khi p21, p27 và hành động P57 trên tất cả các khu phức hợp cyclin / cdk khác. Nó đã được báo cáo rằng cả cyclin D1 quá mức và biến đổi chất ức chế CKI liên quan sản xuất hyperphosphorylation dai dẳng của PRB, dẫn đến bắt giữ chu kỳ tế bào. tín hiệu sinh lý ngoại bào gây phosphoryl hóa protein Rb, ảnh hưởng đến quyết định totransit điểm R. Mitogen trực tiếp gây ra biểu hiện nhanh chóng của cyclin D, mà bắt đầu làm bất hoạt PRB thông qua khả năng của mình để kết hợp với trước đây mình trích dẫn CDK4 (cdk6) đối tác (Matsushime et al., 1991). Mỗi loại cyclin D có thể nhận được tín hiệu ngược dòng khác nhau hội tụ về nó, để chúng ta có thể nói rằng việc kiểm soát sự tăng sinh tế bào trong các loại tế bào khác nhau, được gọi để được thực hiện bởi mitogen khác nhau, được điều chế thông qua biểu hiện của một D-loại riêng biệt cyclin gen, mà là dưới sự kiểm soát của một promoter phiên mã riêng biệt. Điểm chung là tất cả các tín hiệu khác nhau hội tụ về một mục tiêu chung, đó là PRB. Không có bằng chứng rằng các kích thích mitogenic trực tiếp điều chỉnh các cấp độ của cyclin E hoặc cyclin / CDK2 phức tạp. tín hiệu ngoại bào có thể ảnh hưởng tiêu cực đến các máy móc cyclin / cdk là tốt. đói huyết thanh dẫn đến sự sụp đổ của các cấp D cyclin và hoạt động và tăng CKI cụ thể (Resnitzky et al., 1994). Hoạt động Rb trong máy chu kỳ tế bào cũng có thể được quy định ở các mức độ phiên mã và protein bằng các ICBP90 yếu tố phiên mã (Hopnefer, 2000). ICBP90 (ngược hộp CCAAT ràng buộc protein 90 kDa) là một điều phiên mã của gen alpha topoisomerase II và nó cũng có hai vị trí gắn kết đồng thuận cho PRB trong chuỗi chính của nó. Các promoter của gen Rb chứa một số các trang web liên kết giả định cho ICBP90. Quá mức của ICBP90 gây ức chế tuyến yên của biểu PRB trong nguyên bào sợi phổi, như là kết quả của mRNA giảm, và tăng cả S và các phần phân đoạn tế bào G2 / M-pha của các nguyên bào sợi và topoisomerase biểu IIalpha. DNA thí nghiệm nhiễm sắc immunoprecipitation thấy ICBP90 liên kết với các promoter gen Rb dưới tình trạng methyl hóa của nó. Những kết quả này cho thấy ICBP90 chỉnh Rb ở cấp protein và phiên mã gen, do đó ưu