Cell lines and culture conditions.

Cell lines and culture conditions. IEC-6 cells (rat
small intestinal epithelial cell line CRL-1592, ATCC)
were grown and maintained in minimal essential
medium (MEM; Gibco/BRL Life Technologies) containing
5% heat-inactivated fetal bovine serum
(HyClone Laboratories), 2 mM glutamine (Gibco/BRL)
and 0.1 U ml–1 bovine insulin (Sigma Chemical). The
Henle 407 cell line (human embryonic intestinal
epithelial cells, CCL-6, ATCC; kindly provided by P.
Mixter, Washington State University, Pullman) were
grown and maintained in Dulbecco’s modified Eagle’s
media (DMEM; Gibco/BRL) containing 10% heatinactivated
calf serum (HyClone) and Hank’s basic
salt solution (Gibco/BRL). Fathead minnow (FHM)
cells were grown in modified Eagle’s media (MEM;
Gibco/BRL) containing 10% heat-inactivated fetal
bovine serum. Stock cell cultures were maintained in
75 ml culture flasks (Becton Dickinson Labware) in
antibiotic-free media at 37°C in 5% CO2 (IEC-6 and
Henle 407) or 30°C (FHM) in normal atmosphere, and
split weekly. Monolayers for invasion assays were
prepared by seeding approximately 2.5 × 103 cells in
1 ml growth medium in each well of a 24-well tissueculture
plate (Falcon Primaria, Fischer Scientific,
Pittsburgh, Pennsylvania). Confluent monolayers
were obtained after 72 h. Immediately before
performing invasion assays, each medium was
removed from each well and replaced with 1.0 ml of
fresh medium, and cells were subsequently allowed
to acclimate to 26°C for several hours in normal
atmosphere.

Kết quả (Việt) 1:

Di động dây chuyền và điều kiện văn hóa. Tế bào IEC-6 (chuộtdòng nhỏ tế bào ruột biểu mô CRL-1592, ATCC)được phát triển và duy trì trong tối thiểu cần thiếtTrung bình (MEM; Gibco/BRL cuộc sống công nghệ) có chứa5% nhiệt-gan thai nhi bò huyết thanh(HyClone phòng thí nghiệm), 2 mM glutamine (Gibco/BRL)và cách 0.1 U ml-1 bò insulin (Sigma hóa học). CácDòng tế bào Henle 407 (nhân phôi đường ruộttế bào biểu mô, CCL-6, ATCC; vui lòng cung cấp bởi P.Mixter, đại học bang Washington, Pullman)phát triển và duy trì ở Dulbecco của lần của Eaglephương tiện truyền thông (DMEM; Gibco/BRL) có chứa 10% heatinactivatedbê huyết thanh (HyClone) và Hank's cơ bảndung dịch muối (Gibco/BRL). Fathead minnow (FHM)tế bào được trồng ở lần Eagle của phương tiện truyền thông (MEM;Gibco/BRL) có chứa 10% nhiệt-gan thai nhibò huyết thanh. Nền văn hóa tế bào cổ phiếu được duy trì trong75 ml văn hóa bình (Becton Dickinson Labware) trongkháng sinh miễn phí phương tiện truyền thông tại 37° C trong 5% CO2 (IEC-6 vàHenle 407) hoặc 30 ° C (FHM) trong bầu không khí bình thường, vàchia hàng tuần. Monolayers cho cuộc xâm lược thử nghiệmchuẩn bị của hạt giống khoảng 2,5 × 103 tế bào trong1 ml tăng trưởng trung bình trong mỗi tốt tissueculture 24-Vângtấm (Falcon Primaria, Fischer khoa học,Pittsburgh, Pennsylvania). Confluent monolayersđã thu được sau khi 72 h. ngay lập tức trước khithực hiện cuộc xâm lược thử nghiệm, mỗi phương tiệnloại bỏ từ mỗi tốt và thay thế với 1.0 mltươi phương tiện, và các tế bào sau đó đã được phépđể acclimate phải 26° C trong vài giờ ở normalbầu không khí.

Kết quả (Việt) 2:

Dòng tế bào và điều kiện nuôi cấy. IEC-6 tế bào (chuột
nhỏ dòng tế bào biểu mô ruột CRL-1592, ATCC)
đã được phát triển và duy trì ở mức tối thiểu cần thiết
trung bình (MEM; Gibco / BRL Cuộc sống Technologies) có chứa
5% huyết thanh nhiệt bất hoạt bào thai bò
(HyClone Laboratories), 2 mM glutamine (Gibco / BRL)
và 0,1 ml U-1 bò insulin (Sigma Chemical). Các
Henle 407 dòng tế bào (ruột phôi người
tế bào biểu mô, CCL-6, ATCC; vui lòng cung cấp bởi P.
Mixter, Đại học bang Washington, Pullman) đã được
phát triển và duy trì trong Dulbecco đổi Eagle của
phương tiện truyền thông (DMEM; Gibco / BRL) có chứa 10% heatinactivated
huyết thanh bê (HyClone) và cơ bản của Hank
dung dịch muối (Gibco / BRL). Fathead minnow (FHM)
các tế bào được nuôi cấy trong sửa đổi phương tiện truyền thông của Eagle (MEM;
Gibco / BRL) có chứa 10% thai nhiệt bất hoạt
huyết thanh bò. Nuôi cấy tế bào cổ đã được duy trì trong
75 ml bình nuôi cấy (Becton Dickinson cho phòng thí nghiệm) trong
phương tiện truyền thông kháng sinh miễn phí ở 37 ° C trong 5% CO2 (IEC-6 và
Henle 407) hoặc 30 ° C (FHM) trong bầu không khí bình thường, và
chia hàng tuần . Đơn lớp cho các xét nghiệm xâm lược đã được
chuẩn bị bằng cách gieo hạt khoảng 2,5 × 103 tế bào trong
1 ml môi trường tăng trưởng trong từng giếng của 24 cũng tissueculture
tấm (Falcon Primaria, Fischer khoa học,
Pittsburgh, Pennsylvania). Confluent lớp đơn
đã thu được sau 72 h. Ngay trước khi
thực hiện các xét nghiệm xâm lược, mỗi phương tiện đã được
loại bỏ từ mỗi giếng và thay thế bằng 1,0 ml
môi trường mới, và các tế bào sau đó được cho phép
để thích nghi đến 26 ° C trong vài giờ bình thường
không khí.