2.2. Tissue collection and extracti

2.2. Tissue collection and extraction

The animals were euthanized by cervical dislocation at day 14.5 of pregnancy since

the placenta is yet formed and after day 12 of pregnancy there is a clear difference

between resorbing foetal-placental units and normal units [22]. For each mouse, the

total number of implantation sites and number of foetal resorption was recorded.

The rate of post-implantation foetal-placental resorption (%R) was determined by

the following formula: %R = 100 x RF/(RF + VF) where RF, number of resorbed

foetuses and VF, number of viable foetuses [23]. The viable foetus with the placenta

and yolk sac attached and intact is removed and then the placentas were separated

from the foetus and extra-foetal membranes. Each foetus and its placenta obtained

were weighed individually. Placentas were pooled separately for each litter prior to

biochemical analysis. The pooled placental tissue samples were snap frozen in liquid

5
nitrogen then stored at -80°C. Placentas were homogenized separately in cold

phosphate buffer (50 mM, pH 7.4) and then the homogenates were centrifuged at

15,000 x g for 30 min at 4 °C. The resulting supernatant were stored at -80°C until

processed for the activities of SOD1, SOD2, CAT, GPX, GR and the contents of

GSH, GSSG and MDA. Protein concentrations were determined by Lowry's method

Kết quả (Việt) 1:

2.2. mô bộ sưu tập và khai thác Các loài động vật có euthanized bởi cổ tử cung phân chia ngày 14.5 của thai kỳ kể từ nhau thai được thành lập và sau ngày 12 của thai kỳ có là một sự khác biệt rõ ràng giữa đơn vị thai nhi nhau thai resorbing và bình thường đơn vị [22]. Cho mỗi chuột, các Tổng số của cấy ghép các trang web và số lượng tái hấp thu thai nhi đã được ghi lại. Tỷ lệ tái hấp thu thai nhi nhau thai sau cấy (%R) đã được xác định bởi theo công thức: %R = 100 x RF /(RF + VF) nơi RF, số lượng resorbed thai nhi và VF, số khả thi thai nhi [23]. Thai nhi khả thi với nhau thai và lòng đỏ sac đính kèm và còn nguyên vẹn được lấy ra và sau đó các placentas đã được tách ra từ bào thai và thai nhi ngoài màng. Mỗi thai nhi và nhau thai của nó thu được được cân nặng riêng. Placentas được gộp một cách riêng biệt cho mỗi rác trước khi phân tích sinh hóa. Mẫu tới nhau thai mô là snap đông lạnh trong chất lỏng 5nitơ sau đó được lưu trữ ở-80 ° C. Placentas đã được homogenized một cách riêng biệt trong lạnh bộ đệm phosphat (50 mM, độ pH 7.4) và sau đó các homogenates đã ly tại 15.000 x g trong 30 phút ở 4 ° C. Supernatant kết quả được lưu trữ ở-80 ° C cho đến khi xử lý cho các hoạt động của SOD1, SOD2, mèo, GPX, GR và nội dung của GSH, GSSG và MDA. Nồng độ chất đạm đã được xác định bằng phương pháp của Lowry

Kết quả (Việt) 2:

2.2. Bộ sưu tập mô và khai thác con vật được cho chết bằng cách vặn cổ vào ngày 14.5 của thai do nhau thai chưa hình thành và sau ngày 12 của thai kỳ có một sự khác biệt rõ ràng giữa các đơn vị resorbing thai-nhau thai và các đơn vị bình thường [22]. Đối với mỗi con chuột, con số tổng của các trang web cấy và số tái hấp thu của thai nhi đã được ghi lại. Tỷ lệ sau cấy thai-nhau thai tái hấp thu (% R) được xác định bằng công thức sau:% R = 100 x RF / (RF + VF ), nơi RF, số con và hấp thụ thai và VF, số lượng bào thai hữu hiệu [23]. Bào thai hữu hiệu đối với nhau và lòng đỏ sac kèm theo và còn nguyên vẹn được lấy ra và sau đó là nhau thai đã được tách ra từ bào thai và màng ngoài của thai nhi. Mỗi thai nhi và nhau thai của nó thu được được cân riêng. Nhau thai được gộp chung riêng cho mỗi lứa trước khi phân tích sinh hóa. Các mẫu mô nhau thai gộp được snap đóng băng trong chất lỏng 5 nitơ sau đó được lưu trữ ở -80 ° C. Nhau thai đã được đồng nhất một cách riêng biệt trong lạnh đệm phosphate (50 mM, pH 7,4) và sau đó là homogenates được ly tâm ở 15.000 xg trong 30 phút ở nhiệt độ 4 ° C. Kết quả là bề được bảo quản ở -80 ° C cho đến khi xử lý cho các hoạt động của SOD1, SOD2, CAT, GPX, GR và nội dung của GSH, GSSG và MDA. Nồng độ protein được xác định bằng phương pháp Lowry