The lipid-based reagents used for l

The lipid-based reagents used for lipofection are generally composed of synthetic cationic lipids that are often mixed with helper lipids such as DOPE (1,2-dioleoyl-phosphatidyl-ethanolamine) or cholesterol. These lipids mixture assembles in liposomes or micelles with an overall positive charge at physiological pH and are able to form complexes (lipoplexes) with negatively charged nucleic acids through electrostatics interactions. The association of the lipid-based transfection reagent with nucleic acids results in a tight compaction and protection of the nucleic acids and these cationic complexes are mainly internalized by endocytosis.
Once inside the cells two mechanisms leading to the nucleic acids release into the cytoplasm have been described. One relies on the endosomes buffering capacity of the polycationic residues (called “proton sponge effect”). The other describes the ability of cellular negatively charged lipids to neutralize the cationic residues of the transfection reagent leading to destabilization of endosomal membranes.
Finally, the cellular and molecular events leading to the nuclear uptake of DNA (not required for siRNA) following by gene expression remain highly speculative. However, the significance of cell division on transfection efficiency favours the assumption that nuclear membrane disruption during the mitosis process promote DNA nuclear uptake. Nonetheless, transfections of primary cells (non-dividing) and in vivo are also achievable with lipofection demonstrating that DNA can make its way to the nucleus where gene expression takes place.

Kết quả (Việt) 1:

Dựa trên lipid chất được sử dụng cho lipofection thường bao gồm các tổng hợp các chất béo cation thường được trộn lẫn với helper chất béo như DOPE (1,2-dioleoyl-phosphatidyl-ethanolamine) hoặc cholesterol. Hỗn hợp chất béo lắp ráp tại liposomes hoặc micelles với một tổng thể tích cực tính ở pH sinh lý và có thể hình thức liên hợp (lipoplexes) với axít nucleic tiêu cực tính thông qua tương tác electrostatics. Hiệp hội của tinh khiết lipid dựa trên transfection với axít nucleic kết quả trong một nén chặt chặt chẽ và bảo vệ của nucleic acids và những tổ hợp cation chủ yếu là internalized endocytosis.Một lần bên trong các tế bào hai cơ chế dẫn đến các axit nucleic giải phóng vào tế bào chất đã được mô tả. Một dựa trên endosomes đệm công suất của dư lượng polycationic (được gọi là "proton sponge có hiệu lực"). Các mô tả khả năng di động tiêu cực trả chất béo để trung hòa các dư lượng cation của transfection tinh khiết dẫn đến destabilization của màng tế bào endosomal.Cuối cùng, tế bào và phân tử các sự kiện dẫn đến sự hấp thu hạt nhân của DNA (không bắt buộc cho siRNA) sau đây bằng cách biểu hiện gen vẫn rất suy đoán. Tuy nhiên, ý nghĩa của phân chia tế bào trên hiệu quả transfection ưa thích các giả định rằng hạt nhân màng gián đoạn trong quá trình nguyên phân thúc đẩy ADN hạt nhân hấp thu. Tuy nhiên, transfections của các tế bào chính (phòng không chia) và trong vivo cũng có thể đạt được với lipofection chứng tỏ rằng ADN có thể thực hiện theo cách của mình để các hạt nhân nơi biểu hiện gen diễn ra.

Kết quả (Việt) 2:

Các thuốc thử lipid dựa trên sử dụng cho lipofection thường bao gồm các cation tổng hợp chất béo thường được trộn với chất béo helper như DOPE (1,2-dioleoyl-phosphatidyl-ethanolamine) hoặc cholesterol. Những hỗn hợp chất béo kết tụ trong liposome hay mixen với một điện tích dương ở pH sinh lý tổng thể và có thể tạo ra các phức (lipoplexes) với các axit nucleic mang điện tích âm thông qua tương tác tĩnh điện. Sự kết hợp của các chất béo dựa trên thâm chuyển hoá chất với axit nucleic kết quả trong một nén chặt và bảo vệ các axit nucleic và các phức cation chặt chẽ chủ yếu là nội bởi endocytosis.
Một khi bên trong các tế bào hai cơ chế dẫn đến các axit nucleic phát hành vào tế bào chất đã mô tả. Một phụ thuộc vào khả năng endosomes đệm của dư polycationic (được gọi là "hiệu ứng bọt biển proton"). Khác mô tả khả năng của chất béo mang điện tích âm di động để trung hòa dư lượng cation của thuốc thử thâm chuyển dẫn đến mất ổn định của màng nội mô.
Cuối cùng, các sự kiện tế bào và phân tử dẫn đến sự hấp thu hạt nhân của DNA (không cần thiết cho siRNA) sau bởi sự biểu hiện gen duy trì tính đầu cơ cao. Tuy nhiên, ý nghĩa của phân chia tế bào đối với hiệu quả thâm chuyển ủng hộ giả thuyết rằng sự phá vỡ màng nhân trong quá trình phân bào thúc đẩy sự hấp thu hạt nhân DNA. Tuy nhiên, transfections của tế bào sơ cấp (không phân chia) và trong cơ thể cũng có thể đạt được với lipofection chứng minh rằng DNA có thể thực hiện theo cách của mình cho nhân nơi biểu hiện gen diễn ra.