Broodstock: Spawning There are two

Broodstock: Spawning There are two general methods of spawning clams: passive and active. Passive spawning is less management-intensive. Multiple clams are placed in a tank. Spawning typically occurs at night,and broodstock are removed from the tank the next morning. Active spawning requires more management, as individual male and female clams are identified and separated when spawning to ensure an appropriate sperm-to-egg ratio. Passive spawning can produce large numbers of larvae, but broodstock are likely to ingest larvae and not all eggs released are fertilized successfully (they may be either unfertilized or subject to polyspermy). In addition, with passive spawning it is impossible to document spawning success of individual clams and to ensure adequate genetic variability (e.g., it is possible that only one female or one male spawns in a passive spawn). These problems are remedied by active spawning. At CCML, passive spawning is employed. The same 1,500 L tanks that held clams during conditioning are used. After a thorough tank cleaning, the batch of clams (10 PVC tubes, a total of about 30 clams) is returned to the tank which is gradually filled with 15 oC water. No thermal shockis used; temperatures are warmed gradually over several hours (approximately 1oC per hour) until 22 to 24 oC is attained. An 1,800 watt heater will warm a 1,500 L tank at a rate of about 1oC per hour. Generally, heaters are turned-on late in the day; clams are fed a broodstock dose of algae (Table 1) and left overnight. The next morning, seawater in the tank(s) is checked for presence of larvae. As a quick check, a flashlight is used to detect trochophore larvae. Larval presence and abundance is confirmed by volumetric samplings that are viewed microscopically. When larvae are detected, broodstock clams and PVC tubes are removed and placed into a separate tank gradually filled with 15 to 16oC seawater filtered to 1µm. Larval clams are not disturbed or siphoned for 30 to 36 hours post spawn to allow for shell formation and hardening.
At DEI, passive spawning is also used, but the preferred method is active spawning. Both techniques use thermal shock to stimulate spawning. In passive spawning, sandwiches filled with broodstock that have been maintained at 15 oC for 6 to 7 weeks are cleaned and transferred to a 2,000 L larval tank containing 23 to 24 oC seawater. Sandwiches are placed into floating wooden trays lined with nylon window screen. One to two liters of algae are concurrently added. Spawning typically occurs at night, and the next morning broodstock are removed from the tank. At that time, the number of trochophore larvae is estimated by draining the tank completely and catching larvae on a 44 µm sieve. Throughout the draining event, sieve contents are frequently and gently transferred to a 19 L bucket. Several samples (e.g., 1 mL) are taken from the bucket to estimate trochophore abundance per mL. In active spawning, clams are removed from the sandwiches and placed into a shallow tray containing 24oC seawater. Clams are watched carefully for a period of time that can take from 15 minutes to six hours. Typically, male clams spawn first. All spawning males are collected and placed into one bucket or dish and permitted to continue releasing gametes. As females spawn, each is removed from the shallow tray and gently placed into a 1 L glass bowl with seawater to facilitate observation. Females typically resume spawning after a few minutes. Eggs from a single female are collected and transferred to one 19 L bucket. This process is continued until all females that will spawn have done so. Typically from a batch of conditioned broodstock clams, only 40 to 60% will spawn at any given time. When done, sperm from all males is in one bucket and eggs from each female are in separate buckets. Actual fertilization proceeds cautiously by placing a small amount of the sperm water (about 250 mL) into each egg-containing bucket. Visual inspection of the eggs using a microscope is the best method to determine whether fertilization has been successful. Fertilization is noted when a polar bodyforms, which occurs within 20 minutes after the egg and sperm contact. Eggs and sperm remain viable at room temperature for several hours, so if the percent of successful fertilization is low, it is possible to add small aliquots of sperm and increase fertilization success. Small aliquots are used to prevent polyspermy. Resultant fertilized eggs, 50µm in diameter, are poured through a 125µm sieve held over the larval tank. The sieve removes larger debris, while eggs pass into the tank. An alternate approach used at the Eastham, Massachusetts Hatchery employs adult clams maintained in mussel tubing (25 mm mesh). T.chuii(1 L) is added to each bath. Clams and tubing are placed in one of two 30 L cylinders of water (Rubbermaid®). One cylinder is heated to 25 oC, while the other is cooled to 15 oC. Clams (25 to 30) in socks are alternately switched between the warm and cold baths at 45 minute intervals. After 8 or more cycles the clam socks are rinsed with fresh water and placed on a rack constructed of vinyl covered wire mesh suspended near the top of a 1,000 L conical tank filled with 1 µmfiltered seawater heated to 20 oC. Clams are left to spawn overnight. The rack, socks and clams are removed the following morning and clams are returned to the conditioning tank. Water exchanges and clam sieving begin on the second day after the spawn and follow procedures employed by CCML and DEI. Spawns of up to 30 million trochophores have been observed.

Kết quả (Việt) 2:

Cá bố mẹ: đẻ trứng Có hai phương pháp chung của sinh sản nghêu: thụ động và tích cực. Đẻ trứng thụ động là ít quản lý chuyên sâu. Nhiều loài trai được đặt trong một chiếc xe tăng. Đẻ trứng thường xảy ra vào ban đêm, và bố mẹ được ra khỏi hồ vào sáng hôm sau. Hoạt động sinh sản đòi hỏi phải quản lý hơn, khi con đực và trai nữ được xác định và tách ra khi đẻ để đảm bảo một tỷ lệ thích hợp tinh trùng-to-trứng. Đẻ trứng thụ động có thể sản xuất số lượng lớn ấu trùng, nhưng bố mẹ có khả năng ăn ấu trùng và không phải tất cả trứng được thụ tinh thành công phát hành (họ có thể là chưa được thụ tinh hoặc chịu polyspermy). Ngoài ra, với đẻ trứng thụ động đó là không thể để tài liệu sinh sản thành công của sò cá nhân và đảm bảo đa dạng di truyền thích hợp (ví dụ, nó có thể là chỉ có một phụ nữ hoặc một con đực đẻ trứng ở một spawn thụ động). Những vấn đề này được khắc phục bằng cách đẻ trứng hoạt động. Tại CCML, đẻ trứng thụ động được sử dụng. Cùng 1.500 L xe tăng mà tổ chức nghêu trong điều đang được sử dụng. Sau khi làm sạch bể kỹ lưỡng, lô nghêu (10 ống PVC, tổng cộng khoảng 30 trai) được trả về cho các xe tăng đang dần đầy nước 15 oC. Không shockis nhiệt được sử dụng; nhiệt độ đang ấm dần trong vài giờ (khoảng 1oC mỗi giờ) cho đến 22-24 oC được thành tựu. An nóng 1.800 watt sẽ ấm một bồn chứa 1.500 L ở tốc độ khoảng 1oC mỗi giờ. Nói chung, máy sưởi được bật-on vào cuối ngày; nghêu được cho ăn một liều cá bố mẹ của tảo (Bảng 1) và để qua đêm. Sáng hôm sau, nước biển trong hồ (s) được kiểm tra sự hiện diện của ấu trùng. Là một kiểm tra nhanh chóng, một đèn pin được sử dụng để phát hiện ấu trùng trochophore. Sự hiện diện của ấu trùng và phong phú được khẳng định bằng lấy mẫu thể tích được xem dưới kính hiển vi. Khi ấu trùng được phát hiện, nghêu giống bố mẹ và ống PVC được loại bỏ và đặt vào một hồ riêng dần dần lấp đầy với 15 đến 16oC nước biển được lọc để 1μm. Nghêu ấu trùng không bị quấy rầy hay bòn rút cho 30 đến 36 giờ sau khi đẻ trứng để cho phép hình thành vỏ và xơ cứng.
Tại DEI, đẻ trứng thụ động cũng được sử dụng, nhưng các phương pháp ưa thích là đẻ trứng hoạt động. Cả hai kỹ thuật sử dụng sốc nhiệt để kích thích sinh sản. Trong sinh sản thụ động, bánh mì đầy cá bố mẹ đã được duy trì ở 15 oC trong 6-7 tuần được làm sạch và chuyển giao cho một 2.000 L bể ấu trùng có chứa 23-24 oC nước biển. Sandwiches được đặt vào khay gỗ nổi lót bằng màn hình cửa sổ nylon. Một đến hai lít tảo được đồng thời nói thêm. Đẻ trứng thường xảy ra vào ban đêm, và những đàn cá bố mẹ sáng hôm sau ra khỏi hồ. Vào thời điểm đó, số lượng ấu trùng trochophore được ước tính bằng cách tháo các xe tăng hoàn toàn và bắt ấu trùng trên một cái rây 44 micromet. Trong suốt sự kiện thoát nước, nội dung sàng thường xuyên và nhẹ nhàng chuyển giao cho một thùng 19 L. Một số mẫu (ví dụ, 1 mL) được lấy từ các thùng để ước trochophore phong phú mỗi mL. Trong hoạt động sinh sản, nghêu được loại bỏ từ bánh mì và đặt vào một cái khay chứa cạn 24oC nước biển. Ngao được theo dõi cẩn thận trong một thời gian mà có thể mất từ 15 phút đến sáu giờ. Thông thường, ngao đực đẻ trứng đầu tiên. Tất cả con đực đẻ trứng được thu thập và đặt vào một cái xô hoặc món ăn và cho phép tiếp tục giải phóng giao tử. Như cái đẻ trứng, mỗi được lấy ra từ khay cạn và nhẹ nhàng đặt vào một 1 L bát thủy tinh với nước biển để tạo thuận lợi cho quan sát. Phụ nữ thường tiếp tục đẻ trứng sau một vài phút. Trứng từ một phụ nữ duy nhất được thu thập và chuyển giao cho một thùng 19 L. Quá trình này được tiếp tục cho đến khi tất cả phụ nữ đó sẽ đẻ trứng đã làm như vậy. Thông thường từ một loạt nghêu giống bố mẹ có điều kiện, chỉ có 40-60% sẽ đẻ trứng tại bất kỳ thời điểm nào. Khi thực hiện, tinh trùng của con đực là tất cả trong một cái xô và trứng từ mỗi cái có trong xô riêng biệt. Thụ thực tế tiến hành một cách thận trọng bằng cách đặt một lượng nhỏ nước tinh trùng (khoảng 250 ml) vào mỗi thùng chứa trứng. Sự kiểm tra trứng bằng cách sử dụng một kính hiển vi là phương pháp tốt nhất để xác định xem liệu thụ tinh đã thành công. Bón phân được ghi nhận khi một bodyforms cực, xảy ra trong vòng 20 phút sau khi trứng và tinh trùng tiếp xúc. Trứng và tinh trùng vẫn sống sót ở nhiệt độ phòng trong vài giờ, vì vậy nếu số phần trăm thụ tinh thành công thấp, nó có thể để thêm phần phân ước nhỏ của tinh trùng và tăng sự thành công thụ tinh. Phân ước nhỏ được sử dụng để ngăn chặn polyspermy. Quả trứng đã thụ tinh, có đường kính 50μm, được đổ vào một cái rây 125μm tổ chức trong các bồn chứa ấu trùng. Rây loại bỏ mảnh vỡ lớn hơn, trong khi trứng đi vào bể. Một cách tiếp cận thay thế được sử dụng tại các Eastham, Massachusetts Hatchery dụng nghêu lớn duy trì trong ống vẹm (25 mm lưới). T.chuii (1 L) được thêm vào mỗi tắm. Ngao và ống được đặt trong một trong hai xi-lanh 30 lít nước (Rubbermaid®). Một xi lanh được làm nóng đến 25 oC, trong khi khác được làm lạnh đến 15 oC. Ngao (25-30) trong vớ được luân phiên chuyển giữa các phòng tắm nóng và lạnh trong khoảng thời gian 45 phút. Sau 8 hoặc nhiều chu kỳ vớ nghêu được rửa bằng nước sạch và được đặt trên một giá đỡ xây dựng của vinyl phủ lưới dây treo ở gần đầu của một bể hình nón 1.000 L đầy 1 μmfiltered nước biển nóng đến 20 oC. Ngao là trái để đẻ trứng qua đêm. Các rack, vớ và nghêu được loại bỏ vào sáng hôm sau và trai đang quay trở lại bể điều hòa. Trao đổi nước và ngao sàng bắt đầu vào ngày thứ hai sau khi đẻ trứng và làm theo thủ tục làm việc của CCML và DEI. Đẻ lên đến 30 triệu trochophores đã được quan sát thấy.