These experiments suggest that whil

These experiments suggest that while tyrosine phosphorylation can explain part of the cooperative activation of MPF, it cannot provide a complete explanation for the lag and threshold to mitotic activation. An interesting possibility for an inhibitory mechanism independent of Cdc2 phosphorylation is suggested by analogy with the growing number of low molecular weight stoichometric inhibitors of Cdk2 that have been recently described (reviewed by Sherr, 1994 [this issue of Cell]). One of these, ~21, has been suggested to be a universal inhibitor of cyclin- dependent kinases and has been shown weakly to inhibit Cdc2 cyclin B in vitro (Gu et al., 1993; Harper et al., 1993; Xiong et al., 1993). So far, no direct stoichiometric inhibitor specific to Cdc2 has been identified. If such an inhibitor exists, it could set a threshold for cyclin accumulation and thus contribute to the lag period. It could also explain the finding that MPF is rapidly inactivated when added to interphase extracts, even when both inhibitory phosphoryla Cell 566
tion sites have been mutated (Lee et al., 1994). An interesting candidate for such an inhibitor is BimE from the fungus Aspergillus nidulans, mutants of which enter mitosis from any point in the cell cycle (Osmani et al., 1988, 1991 b). Other candidates might include homologs of the recently identified Cdc2 regulators Rum1 and Sic1 (Moreno and Nurse, 1994; Mendenhall, 1993; Nurse, 1994) or even the Cdd-associated Sucl protein (Hayles et al., 1986), for which no in vivo function has yet been discerned. Although we cannot yet describe how the lag and con- certed transition emerge from the kinetic interactions among the known components in the system, we may not be far from such an explanation. The autoactivating feed- back loops involving the activation of Cdc25 at mitosis and the inhibition of Wee1 or PPl at mitosis provide part of the fabric of interactions that would sharpen the transition and make the network capable of responding in an all- or-none fashion (Figure 3). Although in many cells tyrosine phosphorylation does control the transition, it is likely that other regulators linked to the central MPF activation machinery can limit mitosis in different circumstances. Some of these regulators may include kinases like MAP kinase that are not specific to the mitotic process; other kinases such as the MPM-2 epitope kinases, the nimA kinase, or the calmodulindependent kinases in Aspergillus and other phosphatases may be important as well (for examples see Kuang and Ashorn, 1993; Labib and Nurse, 1993; Lu et al., 1993; Osmani et al., 1991 a). Beyond finding new mitotic regulators, to understand the control of the central oscillator, we will need to understand better the architecture where our central players act. While bulk measurement of MPF activity has provided a workable model for mitotic oscillation in somatic cells and the cleavage cycles of Xenopus embryos, these measurements fail to reveal any oscillations in the earliest embryonic cell cycles of syncytial embryos, such as Drosophila, where nuclei undergo mitosis without cytokinesis (Edgar et al., 1994). One possibility is that these oscillations occur only in local domains surrounding the nuclei. While recent studies have begun to address how various components of the central MPF oscillator are localized to the nucleus or other cellular compartments, the importance of these localizations for the function of the oscillator is only beginning to be tested.

Kết quả (Việt) 1:

Các thí nghiệm cho thấy rằng trong khi tyrosine phosphorylation có thể giải thích một phần của hoạt MPF, hợp tác xã, nó không thể cung cấp một lời giải thích đầy đủ cho tụt hậu và ngưỡng để kích hoạt phân bào. Một khả năng thú vị cho một cơ chế ức chế độc lập của Cdc2 phosphorylation là gợi ý bằng cách tương tự với số lượng ngày càng tăng của các chất ức chế stoichometric thấp trọng lượng phân tử của Cdk2 đã được mô tả mới (xem xét lại bởi Sherr, năm 1994 [vấn đề này của tế bào]). Một trong những, ~ 21, đã được đề nghị để là một chất ức chế phổ quát của cyclin phụ thuộc vào kinase và đã được chứng minh yếu để ức chế Cdc2 cyclin B trong ống nghiệm (Gu et al., 1993; Harper et al., 1993; Sở hùng et al., 1993). Cho đến nay, không có trực tiếp stoichiometric chất ức chế cụ thể cho Cdc2 đã được xác định. Nếu một chất ức chế tồn tại, nó có thể thiết lập một ngưỡng cho cyclin tích lũy và do đó góp phần vào giai đoạn tụt hậu. Nó cũng có thể giải thích việc tìm kiếm rằng MPF là nhanh chóng inactivated khi thêm vào interphase chất chiết xuất từ, ngay cả khi cả hai phosphoryla ức chế tế bào 566 Các trang web tion đã là đột biến (Lee et al., 1994). Một ứng cử viên thú vị cho một chất ức chế là BimE từ nấm Aspergillus nidulans, người đột biến trong đó nhập nguyên phân từ bất kỳ điểm nào trong chu trình tế bào (nhận et al., 1988, 1991 b). Ứng cử viên khác có thể bao gồm homologs của các nhà quản lý xác định mới Cdc2 Rum1 và Sic1 (Moreno và y tá, 1994; Mendenhall, 1993; ««««Y tá, 1994) hoặc thậm chí các protein liên quan đến Cdd Sucl (Hayles et al., năm 1986), cho mà không có chức năng tại vivo đã được được discerned. Mặc dù chúng tôi không thể được mô tả như thế nào tụt hậu và con - các quá trình chuyển đổi certed nổi lên từ sự tương tác động trong số các thành phần được biết đến trong hệ thống, chúng tôi có thể không xa một lời giải thích. Autoactivating thức ăn trở lại vòng liên quan đến kích hoạt của Cdc25 tại nguyên phân và ức chế Wee1 hoặc PPl tại mitosis cung cấp một phần của vải của tương tác mà có thể làm sắc nét quá trình chuyển đổi và làm cho mạng có khả năng đáp ứng trong một tất cả-hay-không có thời trang (hình 3). Mặc dù ở nhiều tế bào tyrosine phosphorylation kiểm soát quá trình chuyển đổi, nó có khả năng rằng các cơ quan quản lý liên quan đến máy móc Trung kích hoạt MPF có thể hạn chế nguyên phân trong trường hợp khác nhau. Một số những điều chỉnh có thể bao gồm kinase như bản đồ kinase mà không phải là cụ thể cho quá trình phân bào; kinase khác chẳng hạn như MPM-2 epitope kinase, nimA kinase hoặc kinase calmodulindependent ở Aspergillus và phosphatases khác có thể là quan trọng là tốt (cho ví dụ xem Kuang và Ashorn, 1993; Labib và y tá, năm 1993; Lu et al., 1993; Nhận et al., 1991 một). Ngoài việc tìm kiếm mới điều chỉnh phân bào, để hiểu sự kiểm soát của dao động Trung tâm, chúng tôi sẽ cần phải hiểu tốt hơn kiến trúc mà cầu thủ trung tâm chúng tôi hành động. Trong khi đo lường số lượng lớn của hoạt động MPF đã cung cấp một mô hình hoàn toàn khả thi cho phân bào dao động trong tế bào Soma và chu kỳ cát khai của Xenopus phôi, các phép đo không tiết lộ bất kỳ dao động trong các đầu tiên phôi di động chu kỳ của phôi thai syncytial, chẳng hạn như Drosophila, nơi hạt nhân trải qua nguyên phân mà không có cytokinesis (Edgar và ctv., 1994). Một khả năng là những dao động xảy ra chỉ trong lĩnh vực địa phương xung quanh các hạt nhân. Trong khi nghiên cứu gần đây đã bắt đầu để giải quyết các thành phần như thế nào khác nhau của dao động MPF Trung tâm được bản địa hoá hạt nhân hoặc khác ngăn di động, tầm quan trọng của những hỗ trợ ngôn ngữ cho các chức năng của dao động chỉ bắt đầu để được kiểm tra.

Kết quả (Việt) 2:

Các thí nghiệm cho thấy rằng trong khi phosphoryl hóa tyrosine có thể giải thích một phần của các hợp tác xã hoạt của MPF, nó không thể cung cấp một lời giải thích đầy đủ cho sự tụt hậu và ngưỡng để kích hoạt phân bào. Một khả năng thú vị cho một cơ chế độc lập ức chế của cdc2 phosphoryl được mà phép so sánh với số lượng ngày càng tăng của các chất ức chế trọng lượng phân tử thấp stoichometric của CDK2 đã được mô tả gần đây (xem xét bởi Sherr, 1994 [vấn đề này của di động]). Một trong số này, ~ 21, đã được đề xuất là một chất ức chế phổ quát của kinase phụ thuộc cyclin- và đã được chứng minh một cách yếu ớt để ức chế cdc2 cyclin B trong ống nghiệm (Gu et al 1993,;.. Harper et al, 1993; Xiong et al ., 1993). Cho đến nay, không có chất ức chế cân bằng hóa học trực tiếp cụ thể để cdc2 đã được xác định. Nếu như một chất ức chế tồn tại, nó có thể thiết lập một ngưỡng cho tích lũy cyclin và do đó góp phần vào giai đoạn trễ. Nó cũng có thể giải thích những phát hiện mà MPF là nhanh chóng bất hoạt khi thêm vào interphase chiết xuất, thậm chí cả khi ức chế phosphoryla di động 566
trang web tion đã bị đột biến (Lee et al., 1994). Một ứng cử viên thú vị cho như một chất ức chế là BimE từ nấm Aspergillus nidulans, đột biến trong đó nhập nguyên phân từ bất kỳ điểm nào trong chu kỳ tế bào (Osmani et al., 1988, 1991 b). Ứng cử viên khác có thể bao gồm đồng đẳng của các nhà quản lý gần đây xác định cdc2 Rum1 và Sic1 (Moreno và Nurse năm 1994; Mendenhall, 1993; Nurse, 1994) (. Hayles et al, 1986) hoặc thậm chí các protein Sucl CDD-liên quan, mà không có trong chức năng cơ thể vẫn chưa được phân định. Mặc dù chúng ta không thể nào mô tả cách tụt hậu và chuyển tiếp certed con- nổi lên từ sự tương tác động giữa các thành phần được biết đến trong hệ thống, chúng ta có thể không xa một lời giải thích như vậy. Các autoactivating feed- lại vòng liên quan đến sự kích hoạt của cdc25 tại phân bào và ức chế Wee1 hoặc PPL ở phân bào cung cấp một phần của vải của các tương tác đó sẽ làm sắc nét các quá trình chuyển đổi và làm cho mạng có khả năng đáp ứng trong một thời trang tất cả các-hay-không ( Hình 3). Mặc dù trong nhiều tế bào phosphoryl hóa tyrosine không kiểm soát việc chuyển đổi, có khả năng là cơ quan quản lý khác liên quan đến máy móc hoạt MPF trung ương có thể hạn chế phân bào trong hoàn cảnh khác nhau. Một số các nhà quản lý có thể bao gồm kinase như MAP kinase mà không phải là cụ thể cho quá trình phân bào; kinase khác như MPM-2 kinase epitope, các kinase Nima, hoặc các kinase calmodulindependent trong Aspergillus và phosphatases khác có thể quan trọng cũng như (ví dụ xem Kuang và Ashorn năm 1993; Labib và Nurse năm 1993;. Lu et al, 1993;. Osmani et al, 1991 a). Ngoài việc tìm kiếm nhà quản lý phân bào mới, để hiểu sự kiểm soát của bộ dao động trung tâm, chúng tôi sẽ cần phải hiểu rõ hơn về kiến trúc, nơi người chơi trung tâm của chúng tôi hành động. Trong khi đo lớn các hoạt động MPF đã cung cấp một mô hình khả thi cho dao động phân bào ở tế bào soma và chu kỳ phân cắt của phôi Xenopus, các phép đo không tiết lộ bất kỳ dao động trong chu kỳ tế bào phôi sớm nhất của phôi hợp bào, chẳng hạn như ruồi giấm, các hạt nhân trải qua quá trình nguyên phân mà không cytokinesis (Edgar et al., 1994). Một khả năng là những dao động này chỉ xảy ra trong lĩnh vực địa phương xung quanh hạt nhân. Trong khi các nghiên cứu gần đây đã bắt đầu giải quyết như thế nào các thành phần khác nhau của bộ dao động MPF trung ương khu trú để nhân hoặc ngăn di động khác, tầm quan trọng của các địa phương hóa cho các chức năng của bộ dao động mới chỉ bắt đầu được thử nghiệm.