mitochondrial membrane potential in

mitochondrial membrane potential in HT-29 cells. To identify the downstream effectors in the apoptotic signaling pathway, the activation of caspases-9 and -3 was examined by a colorimetric assay using specific chromophores, DEVD- pNA (specific substrate of caspase-3) and LEHD-pNA (specific substrate of caspase-9). As showed in Fig. 5A and B, EEHDW treatment significantly and dose-dependently induced activation of both caspases-9 and -3 in HT-29 cells (P

Kết quả (Việt) 1:

ti thể màng tiềm năng trong tế bào HT-29. Để xác định phồng hạ lưu trong chết rụng tín hiệu đường, kích hoạt caspase-9 và -3 được kiểm tra bởi một khảo nghiệm colorimetric bằng cách sử dụng cụ thể chromophores, DEVD-pNA (bề mặt cụ thể của caspase-3) và LEHD-pNA (bề mặt cụ thể của caspase-9). Như cho thấy trong hình 5A và B, EEHDW điều trị đáng kể và liều dependently gây ra kích hoạt caspase-9 và -3 trong tế bào HT-29 (P < 0,01 hoặc 0,05, so với không được điều trị kiểm soát các tế bào). Những dữ liệu này cho thấy rằng EEHDW thúc đẩy quá trình chết rụng tế bào HT-29 thông qua con đường phụ thuộc vào ti thể.EEHDW quy định sự biểu hiện của chống-chết rụng Bcl-2 và pro-chết rụng Bax. Protein Bcl-2 gia đình là điều chỉnh chính của ti thể trung gian chết rụng tế bào, trong đó có chống-chết rụng các thành viên như thành viên Bcl-2 và pro-chết rụng như Bax. Mô homeostasis được duy trì bằng cách kiểm soát tỷ lệ của hoạt động chống - và pro-chết rụng protein Bcl-2 gia đình. Tỷ lệ lớn Bcl-2 để Bax bởi các biểu hiện bất thường của các protein được tìm thấy thường trong bệnh ung thư khác nhau. Để tiếp tục theo học cơ chế của các hoạt động chống ung thư của EEHDW, chúng tôi thực hiện RT-Đảng Cộng sản Romania và Tây thấm để kiểm tra biểu hiện mRNA và protein của Bcl-2 và Bax trong tế bào điều trị EEHDW HT-29. Kết quả của các khảo nghiệm RT-PCR cho thấy rằng EEHDW điều trị sâu sắc tăng lên Bax và giảm Bcl-2 mRNA biểu hiện trong tế bào HT-29 (hình 6A); và các mô hình của protein biểu hiện của Bax và Bcl-2 là tương tự như của cấp độ mRNA tương ứng (hình 6B). Điều này cho thấy rằng EEHDW gây ra chết rụng tế bào phụ thuộc vào ti thể trong HT-29 tế bào thông qua các quy định của các biểu hiện của Bcl-2 gia đình protein.Thảo luậnTế bào ung thư được đặc trưng bởi sự gia tăng di động phổ biến vũ khí không được kiểm soát và/hoặc giảm trong quá trình chết rụng tế bào (15). Ngoài ra, gián đoạn quá trình chết rụng góp phần để kháng thuốc của các tế bào khối u, mà đã trở thành một trở ngại quan trọng cho việc quản lý thành công của các bệnh nhân có khối u ác tính bao gồm cả ung thư ruột già (CRC) (2-4). Hơn nữa, tác nhân chống ung thư hiện đang được sử dụng nhiều chứa nội tại và mạnh cytotoxicity để tế bào bình thường, có giới hạn sử dụng lâu dài của họ và do đó hiệu quả điều trị của họ (5). Những vấn đề này nhấn mạnh nhu cầu cấp thiết cho sự phát triển của tiểu thuyết ung thư chemotherapies. Kể từ khi sản phẩm tự nhiên, chẳng hạn như truyền thống thuốc thảo dược Trung Quốc (TCM), có tác dụng phụ tương đối ít hơn so với hiện đại chemotherapeutics và lâu đã được sử dụng lâm sàng để điều trị nhiều loại bệnh ung thư (8-11) bao gồm, khám phá nguồn gốc tự nhiên đại lý với pro-chết rụng hoạt động là một cách tiếp cận hứa hẹn cho điều trị chống ung thư.

Kết quả (Việt) 2:

tiềm năng của màng ty lạp thể trong HT-29 tế bào. Để xác định các quan tác động dây chuyền trong các đường tín hiệu tự hủy hoại, sự hoạt hóa caspase-9 và -3 đã được kiểm tra thông qua xét nghiệm đo màu sử dụng chromophore cụ thể, DEVD- PNA (chất nền cụ thể của caspase-3) và LEHD-PNA (chất nền cụ thể của caspase -9). Như cho thấy trong hình. 5A và điều trị B, EEHDW đáng kể và kích hoạt liều dependently gây ra của cả hai caspase-9 và -3 trong HT-29 tế bào (P <0,01 hoặc 0,05, so với các tế bào kiểm soát không được điều trị). Những dữ liệu này cho thấy rằng EEHDW thúc đẩy HT-29 tế bào apoptosis thông qua con đường phụ thuộc vào ty thể. EEHDW quy định sự biểu hiện của anti-apoptosis Bcl-2 và pro-apoptosis Bax. Protein Bcl-2 gia đình là nhà quản lý chủ chốt của ty thể qua trung gian apoptosis, bao gồm cả các thành viên tự hủy hoại như Bcl-2 và các thành viên pro-apoptosis như Bax. Mô homeostasis được duy trì bằng cách kiểm soát tỷ lệ chống chủ động và pro-apoptosis Bcl-2 protein gia đình. Bcl-2-to-Bax tỷ lệ cao hơn bằng cách biểu hiện khác thường của protein được tìm thấy phổ biến trong các bệnh ung thư khác nhau. Tiếp tục nghiên cứu cơ chế tác dụng chống ung thư của EEHDW, chúng tôi thực hiện RT-PCR và phương Tây thấm để kiểm tra các mRNA và protein biểu hiện của Bcl-2 và Bax trong EEHDW điều trị HT-29 tế bào. Các kết quả của thử nghiệm RT-PCR cho thấy điều trị EEHDW tăng sâu sắc Bax và giảm Bcl-2 biểu hiện mRNA trong tế bào HT-29 (Hình 6A.); và các dạng biểu hiện protein của Bax và Bcl-2 tương tự như mức độ mRNA tương ứng của họ (Hình. 6B). Điều này cho thấy rằng EEHDW gây ty thể phụ thuộc vào quá trình apoptosis trong HT-29 tế bào thông qua các quy định về biểu hiện của protein Bcl-2 gia đình. Thảo luận các tế bào ung thư được đặc trưng bởi sự gia tăng không được kiểm soát trong sự tăng sinh tế bào và / hoặc giảm tế bào chết theo chương trình (15). Ngoài ra, quá trình apoptosis gián đoạn góp phần vào sự kháng thuốc của các tế bào khối u, mà đã trở thành một trở ngại đáng kể cho quản lý thành công bệnh nhân có khối u ác tính như ung thư đại trực tràng (CRC) (2-4). Hơn nữa, nhiều chất chống ung thư hiện đang được sử dụng có khả năng gây độc nội tại và mạnh đến các tế bào bình thường, hạn sử dụng lâu dài của họ và do đó hiệu quả điều trị của họ (5). Những vấn đề nổi bật những nhu cầu cấp thiết cho sự phát triển của ung thư hóa trị liệu mới. Do các sản phẩm tự nhiên, chẳng hạn như các loại thuốc thảo dược cổ truyền Trung Quốc (TCM), có tương đối ít tác dụng phụ so với chemotherapeutics hiện đại và từ lâu đã được sử dụng trên lâm sàng để điều trị nhiều loại bệnh tật như ung thư (11/08), phát hiện đại lý tự nhiên với hoạt động chuyên nghiệp-apoptosis là một cách tiếp cận đầy hứa hẹn để điều trị chống ung thư.