Mẫu (250 ml) được deproteinized bằng cách thêm acetonitrile (500 ml), vortexed cho một phút sau đó ly tâm 10 phút ở 5.000 vòng mỗi phút. Một chất lỏng trên bề rõ ràng đã được gạn trong một chèn kính (tàu sampler tự động) mà từ đó 50 ml được bơm vào hệ thống HPLC. Giai đoạn di động bao gồm một hỗn hợp của các bộ đệm và acetonitrile (62:38). Các bộ đệm đã được chuẩn bị bằng cách hòa tan 1,78 g di-sodium hydrogen phosphate dihydrate và 1,0 g N-acetyl-N, N, N-trimethyl ammonium bromide trong 950 mL của Milli Q nước, pH (7.0) đã được điều chỉnh với axit orthophosphoric. Pha động được lọc qua bộ lọc Millipore 0.45μ. Pha động được bơm qua cột với tốc độ dòng chảy 1,0 ml / phút, ở nhiệt độ môi trường xung quanh 25 ° C. Việc rửa giải được theo dõi ở bước sóng 254 nm. Tất cả các hóa chất được sử dụng trong nghiên cứu này là của HPLC lớp.
đang được dịch, vui lòng đợi..
![](//viimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)