2. Thí nghiệm
2.1. Nguyên liệu
hành tây vàng thô (A. cepa L.) được mua từ một địa phương
siêu thị ở tỉnh Avignon (Nam Pháp). Củ hành tây
mà triển lãm đường kính 50-70 mm và có vẻ như miễn phí
thiệt hại bên ngoài đã được chọn và bóc vỏ bằng tay cho họ
xử lý sau.
2.2. Hóa chất
Tất cả các dung môi được sử dụng cho các mục đích sắc ký HPLC là
lớp. Methanol và axit formic là từ Merck (Darmstadt,
Đức) và acetonitrile là từ Fisher Scientific TNHH (Bishop
Meadow Road, Loughborough, Anh). HPLC lớp flavonol
tiêu chuẩn quercetin-3,4
-diglucoside và quercetin-4
-glucoside
(spiraeoside) được mua từ Extrasynthese (Lyon, Pháp).
Quercetin, quercetin-3-glucoside, kaempeferol và myricetin được
mua từ Sigma Hóa chất Chimie (Fallavier , Pháp).
2.3. Xác định hàm lượng ẩm
quyết Độ ẩm của hành tây đã được thực hiện trước hết
bởi bộ máy chưng cất Dean Stark thường theo
Mỹ Dầu Chemist 'Society (AOCS) phương pháp chính thức [26], và cũng
có một lò điện tại 80 ◦C. Độ ẩm trung bình đo
bởi cả hai quá trình là 88,5 ± 0,5%.
2.4. Bộ máy MHG và thủ tục
Microwave hydrodiffusion và trọng lực đã được thực hiện trong một
phòng thí nghiệm vi sóng Milestone EOS-G lò minh họa trong hình. 1.
Đây là một đa vi sóng lò phản ứng 2,45 GHz với tối đa
giao quyền lực của biến 900W trong 10W gia. Thời gian,
nhiệt độ, áp suất và năng lượng có thể được kiểm soát với "easyWAVE"
gói phần mềm. Các tàu khai thác được thực hiện từ
Pyrex và có dung lượng 1000 ml. Trong nhiệt độ thí nghiệm
được theo dõi bằng sợi quang cảm biến nhiệt độ đó
đã được đưa vào trung tâm và lớp ngoài của mẫu và cũng có trong
các lò phản ứng mẫu. Thay đổi nhiệt độ trong các phần khác nhau của
thực vật và lò phản ứng được đo liên tục và dữ liệu
được lưu tự động. Thông tin phản hồi này giúp trong việc kiểm soát
nhiệt độ bằng cách điều chỉnh công suất vi sóng.
Thủ tục MHG được thực hiện ở áp suất khí quyển; 500 g
của toàn bộ bóng đèn hành tây tươi đã được làm nóng bằng cách sử dụng mật độ công suất sửa chữa
mà không cần bổ sung các dung môi hoặc nước. Sự tương tác trực tiếp
của lò vi sóng với nước sinh học ủng hộ việc phát hành các hợp chất
bị mắc kẹt bên trong các tế bào của thực vật. Các hợp chất này
do đó di chuyển một cách tự nhiên bằng cách khuếch tán cùng với nước nóng hoặc dầu thô
nước ngoài của các tế bào của thực vật và di chuyển như vậy, tự nhiên
xuống dưới tác dụng của trọng lực trái đất trên một bình ngưng xoắn ốc
bên ngoài khoang lò vi sóng mà nó ngưng tụ. Các nước thô
được thu thập liên tục trong một xi lanh tốt nghiệp. Việc khai thác
được tiếp tục cho đến khi không có nhiều nước hơn đã thu được hoặc quá nóng đã được
phát hiện. Nước thô khai thác được thu thập và được đông khô.
2.5. Thông thường chiết lỏng rắn
Trong thông thường chiết rắn-lỏng quy mô hành tây tươi đã được
sử dụng, hành bóng đèn đã được gọt vỏ và cắt bằng tay và 5 g hành tây quy mô
được đồng nhất với 50 ml dung dịch 80% methanol trong một ultrahomogeniser
tại 8000 rpm trong 45 phút. Sau đó hỗn hợp được
lọc và gạn được thu thập và thực hiện lên đến 50 ml
methanol. Giải pháp lọc này đã được sử dụng trực tiếp cho HPLC và TPC
phân tích. Nồng độ cuối cùng của flavonoid khác nhau được tính
bằng mg / 100 g DW (trọng lượng khô).
2.6. Phân tích HPLC
phân tích HPLC được thực hiện bằng cách sử dụng Waters (Milford, MA)
hệ thống HPLC gồm một máy bơm Waters 600E, một Waters 717 nhãn
phun rheodyn, một Waters 2996 mảng photodiode dò.
Các máy bơm HPLC, hướng dẫn sử phun rheodyn, nhiệt độ cột,
và diode hệ thống -array được theo dõi và kiểm soát bằng cách sử dụng
Waters Trao quyền cho 2 chương trình phần mềm Sắc ký dữ liệu. Các
bước sóng được sử dụng cho việc định lượng các flavonoid hành
với các máy dò diode là 360 nm. Việc tách sắc ký
được tiến hành trên một Purospher sao RP-18 cuối mũ
cột (250 mm × 4 mm ID; 5 m kích thước hạt từ VWR), với
một cột bảo vệ RP18 (4 mm × 4 mm ID; 5 m kích thước hạt cũng
từ VWR). Cột và bảo vệ cột cuối cùng mũ đã được tổ chức
tại 37 ◦C và tốc độ dòng chảy đã được đặt ở 1 ml / phút. Pha động
gồm hai dung môi: (A) nước axit hóa (0,5% axit formic) và
(B) 100% acetonitrile. Gradient dung môi được sử dụng là như sau:
0 phút, (A) 95% và (B) 5%; 20 phút, (A) 60% và (B) 40%; 30 phút, (A)
0% và (B) 100%; 45 phút, (A) 95% và (B) 5%. Thể tích tiêm
đang được dịch, vui lòng đợi..
