Due to their low immunogenicity in

Due to their low immunogenicity in patients, humanized or fully
human mAbs are becoming increasingly important for the treatment
of a growing number of diseases, including cancer, infections, and
immune disorders. Here, we describe a technology allowing for the
rapid isolation of fully human mAbs. In contrast to previously described
methods, B cells specific for an antigen of interest are directly
isolated from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of human
donors. Recombinant, antigen-specific single-chain Fv (scFv) libraries
are generated from this pool of B cells and screened by mammalian
cell surface display by using a Sindbis virus expression system. This
method allows isolating antigen-specific antibodies by a single round
of FACS. The variable regions (VRs) of the heavy chains (HCs) and light
chains (LCs) are isolated from positive clones and recombinant fully
human antibodies produced as whole IgG or Fab fragments. In this
manner, several hypermutated high-affinity antibodies binding the
Q
virus like particle (VLP), a model viral antigen, as well as antibodies
specific for nicotine were isolated. All antibodies showed high expression
levels in cell culture. The human nicotine-specific mAbs were
validated preclinically in a mouse model. Thus, the technology presented
here allows for rapid isolation of high-affinity, fully human
antibodies with therapeutic potential from human volunteers.

Kết quả (Việt) 1:

Do của immunogenicity thấp ở những bệnh nhân, humanized hoặc đầy đủcon người mAbs đang trở nên ngày càng quan trọng để điều trịmột số ngày càng tăng của bệnh, trong đó có bệnh ung thư, nhiễm trùng, vàrối loạn miễn dịch. Ở đây, chúng tôi mô tả một công nghệ cho phép cácnhanh chóng cô lập của con người hoàn toàn mAbs. Ngược với trước đây mô tảphương pháp, các tế bào B cụ thể cho một kháng nguyên quan tâm trực tiếpbị cô lập từ các tế bào máu ngoại vi mononuclear (PBMC) của con ngườiCác nhà tài trợ. Tái tổ hợp, cụ thể kháng nguyên đơn-chuỗi thư viện Fv (scFv)được tạo ra từ điều này bơi B tế bào và được hộ tống bởi mammaliantế bào bề mặt Hiển thị bằng cách sử dụng một hệ thống biểu hiện Sindbis virus. Điều nàyphương pháp cho phép cô lập kháng thể kháng nguyên cụ thể bởi một vòng duy nhấtcủa FACS. Vùng biến (VRs) nặng chuỗi (HCs) và ánh sángdây chuyền (LCs) đều bị cô lập từ tích cực nhái và tái tổ hợpsản xuất kháng thể của con người như toàn bộ IgG hoặc Fab mảnh. Trong điều nàycách, một số hypermutated kháng thể cao-ái lực ràng buộc cácQ virus như hạt (VIP), một mô hình siêu vi kháng nguyên, cũng như các kháng thểcụ thể cho nicotin bị cô lập. Tất cả các kháng thể đã cho thấy biểu hiện caomức độ trong văn hóa tế bào. MAbs nicotin-cụ thể của con ngườixác nhận preclinically trong một mô hình chuột. Vì vậy, công nghệ trình bàyở đây cho phép nhanh chóng sự cách điện của ái lực cao, đầy đủ của con ngườikháng thể với các tiềm năng điều trị từ con người tình nguyện viên.

Kết quả (Việt) 2:

Do miễn dịch thấp ở những bệnh nhân, nhân bản hoặc đầy đủ
kháng thể đơn dòng của con người đang ngày càng trở nên quan trọng đối với việc điều trị
của một số ngày càng tăng của các bệnh như ung thư, nhiễm trùng, và
các rối loạn miễn dịch. Ở đây, chúng tôi mô tả một công nghệ cho phép các
cô lập nhanh chóng của kháng thể đơn dòng hoàn toàn con người. Ngược lại với mô tả trước đây
các phương pháp, các tế bào B cụ thể đối với một kháng nguyên quan tâm được trực tiếp
phân lập từ tế bào đơn nhân máu ngoại vi (PBMC) của con người
các nhà tài trợ. Tái tổ hợp, kháng nguyên đặc hiệu chuỗi đơn Fv (scFv) thư viện
được tạo ra từ hồ bơi này của tế bào B và sàng lọc bởi động vật có vú
hiển thị bề mặt tế bào bằng cách sử dụng một hệ thống biểu hiện vi rút Sindbis. Điều này
cho phép phương pháp cô lập kháng thể đặc hiệu kháng nguyên bởi một vòng duy nhất
của FACS. Các vùng biến đổi (VRS) của chuỗi nặng (HCS) và ánh sáng
chuỗi (LC) được phân lập từ các dòng vô tính tích cực và tái tổ hợp đầy đủ
kháng thể con người sản xuất như toàn bộ IgG hoặc Fab fragments. Trong này
theo cách thức, một số kháng thể có ái lực cao hypermutated ràng buộc các
Q? virus như hạt (VLP), một mô hình kháng nguyên virus, cũng như các kháng thể
cụ ​​thể đối với nicotine đã được cô lập. Tất cả các kháng thể cho thấy biểu hiện cao
cấp trong nuôi cấy tế bào. Các kháng thể đơn dòng nicotine cụ thể của con người đã được
xác nhận preclinically trong một mô hình chuột. Do đó, các công nghệ được trình bày
ở đây cho phép cô lập nhanh chóng của ái lực cao, hoàn toàn con người
kháng thể có tiềm năng điều trị từ những người tình nguyện.