in hydrobionts [70].Different probi

in hydrobionts [70].
Different probiotics in inactivated form also exhibited promising immunomodulatory and protection in various fish species. Although, immunostimulating potency of inactivated probiotics under in vitro [71] and in vivo conditions [64] as well as ability to control diseases [54] has been documented, viable probiotics are proved to be better stimulator of immune system in any animals including fish [76,101,152,153]. In a comparative study, Panigrahi et al. [64] reported that probiotic strain of L. rhamnosus in viable form is a better immune inducer compared to its heat inactivated form.
The immunomodulating activity of non-viable probionts could possibly be attributed to the presence of certain conserved micro- bial components such as capsular polysaccharides, peptidoglycans and lipoteichoic acids which are the potent stimulator of piscine immune system [153,154]. Therefore, the whole and/or certain components of the inactivated probiotics are believed to interact with the epithelial cells of the gut and ultimately leading to an enhanced immune response in host.

7.2. Dose of probiotics

Dose of probiotics could be limiting factor for achieving optimum beneficial effects in any host [155,156]. The optimum concentration of probiotics is not only required for establishment and subsequent proliferation in gut but also need to exert various beneficial effects including immunostimulatory activity. Different in vitro and in vivo studies indicate that immune response of fish varies with the concentration of probiotics. The dose of probiotics is usually selected based on their ability to enhance the growth and protection in host. For instance, Brunt et al. [48] determined the effective dose of the probiotic strain belong to Bacillus species to be
2 108 cells at which they have recorded least percentage
mortality in O. mykiss during challenge study. The in vitro stimu- latory activities of probiotics like Pdp11, 51M6, L. delbrueckii subsp. lactis and B. subtilis are found to be dose dependent [71]. Similarly, immunostimulatory activities of LAB and B. subtilis in fish under in vivo condition also vary in a dose dependant manner [57,64].
In aquaculture the dose of probiotics usually varies from
106e10 CFU/g feed. The optimum dose of a probiotics can vary with respect to host and also type of immune parameters. Panigrahi et al.
[63] recorded high serum lysozyme, phagocytic activity of head kidney leucocyte and complement activities in O. mykiss fed for 30 days with L. rhamnosus strain at 1011 CFU/g feed but not at a dose of
109 CFU/g feed. Furthermore, stimulation of a particular immune
response with respect to different tissue/organ also varies with dose. For instance, elevation of lysozyme activity in serum and skin in M. miiuy is reported at two different doses i.e., 107 and 109 CFU of
C. butyricum/g feed, respectively [75]. On the other hand Son et al. [74], found best dose of probiotic for grouper (Epinephelus coioides) to be 108 CFU/kg of feed compared to 106 and 1010 CFU/kg of
L. plantarum in terms of growth, immune enhancement and protection. Therefore, lower dose can fail to stimulate the piscine immune system while high dose can exert deleterious effects [157].
In another study, Son et al. [75] found higher dose (i. e. 1010 CFU/
kg feed) of L. platarum failed to protect fish on challenge study despite enhancement of certain immune parameters at the particular dose. Earlier, Nikoskelainen et al. [157] also recorded higher percentage of mortality in O. mykiss fed at high dose of
L. rhamnosus (1012 CFU/g feed) compared to lower dose (109 CFU/g

feed). Therefore, the dose of the individual probiotics needs to be determined for a particular host.

7.3. Duration of feeding

Duration of the probiotics feeding is another important factor that can affect the establishment, persistence and subsequent induction of immune responses in a host. In fish most of the beneficial effects like live weight gain, improved immunity and disease resistance have been recorded within a dietary probiotics feeding regime of 1e10 weeks. The time course for optimum induction of immune response differs with respect to probiotic strain and also type of immune parameter.
The time course of probiotics feeding for stimulating innate immunity can also vary among different strains of probiotics in the same family [49]. Similarly difference in stimulating specific immune parameter is also dependent on feeding duration. For example Diaz-Rosales et al.[52] observed significant enhancement of respiratory burst activity by feeding probiotics for 60 days but earlier Dıaz-Rosales et al. [50], failed to detect significant enhancement of this activity when fed the heat inactivated form of the same probiotics for 4 weeks.
However, several probiotics are often found to stimulate the piscine immune system within 2 weeks of supplementation. Shar- ifuzzaman and Austin [73] recorded highest cellular and humoral immunity at 2 weeks of feeding regime and further supplementa- tion lead to lowering at 3rd and 4th weeks of feeding. While some researchers believe a long feeding regime is not necessary for pro- biotics [49], the shorter feeding regime can cause sharp decline in immune response in fish [64]. Such type of decline may be due the failure of the probiotic strains to establish and multiply in the fish gut. Though, a long dietary feeding regime is advantageous to host in many aspects, more studies are required to establish the benefi- cial effect of short term regime is not just adjuvant effects.

7.4. Mode of supplementation

Although probiotics are used as dietary supplements, Moriarty [19] proposed to extend the definition of probiotics in aquaculture to microbial ‘‘water additives’’ and several probiotics are also directly used as water additives with documented health and environmental benefits [79]. In fish, probiotics are applied in different methods like bath, suspension and feed. However supplementation of probiotics as feed additive is best method for successful colonization and establishment in gut [19,23,158,159]. Oral administration of probiotics is more effective in enhancing immunity as well as subsequent protection as compared to water supplementation [76]. Likewise suspension or bioencapsulation of probiotics is usually adopted for fish larvae [146,159e163]. Pro- biotics like L. delbrueckii spp. delbrueckii when supplemented through live carriers like rotifers and artemia succeeded in stimu- lating local immunity in larvae [66,105].
Apart from dietary supplementation, water borne uptake of probiotics can also modulate the piscine immune system with elevation of several immune parameters [76,78,79]. In a study Zhou et al. [79] found that among three probiotics (B. subtilis, B. coagulans,
R. palustris) supplemented into water @1 107 CFU/ml in every
2 days for 40 days, B. coagulans and R. palustris, showed promising result with improved growth, immunity and health status of O. niloticus.

7.5. Environmental conditions

The effectiveness of probiotics is dependent on the successful establishment of the probiotics in the gut. Several factors that

Kết quả (Việt) 2:

trong hydrobionts [70].
probiotics khác nhau ở dạng bất hoạt cũng trưng bày đầy hứa hẹn điều hòa miễn dịch và bảo vệ các loài fi sh khác nhau. Mặc dù, immunostimulating hiệu lực của probiotics bất hoạt dưới in vitro [71] và trong điều kiện in vivo [64] cũng như khả năng kiểm soát bệnh [54] đã được ghi nhận, chế phẩm sinh học hữu hiệu được chứng minh là kích thích hơn về hệ thống miễn dịch ở bất kỳ động vật bao gồm fi sh [76101152153]. Trong một nghiên cứu so sánh, Panigrahi et al. [64] đã báo cáo rằng chủng probiotic L. rhamnosus trong hình thức khả thi là một chất cảm ứng miễn dịch tốt hơn so với dạng bất hoạt nhiệt của nó.
Các hoạt động miễn dịch của probionts không khả thi có thể có thể được quy cho sự hiện diện của một số thành phần bảo tồn vi Bial như polysaccharides nang, peptidoglycans và axit lipoteichoic đó là những chất kích thích mạnh của hệ thống miễn dịch piscine [153154]. Vì vậy, toàn bộ và / hoặc các thành phần nhất định của probiotics bất hoạt được cho là tương tác với các tế bào biểu mô của ruột và cuối cùng dẫn đến một phản ứng miễn dịch được tăng cường trong máy chủ. 7.2. Liều lượng của probiotics Liều probiotics có thể hạn chế yếu tố để đạt được tối ưu lợi ích fi tác tài trong bất kỳ máy chủ [155156]. Nồng độ tối ưu của chế phẩm sinh học không chỉ cần thiết cho việc thành lập và phổ biến tiếp theo trong ruột nhưng cũng cần phải nỗ khác nhau bene fi tác tài bao gồm các hoạt động kích thích miễn dịch. Khác nhau in vitro và in vivo cho thấy đáp ứng miễn dịch của fi sh thay đổi theo nồng độ của probiotics. Liều lượng của chế phẩm sinh học thường được lựa chọn dựa trên khả năng của mình để tăng cường sự tăng trưởng và bảo vệ trong máy chủ. Ví dụ, Brunt et al. [48] ​​xác định liều lượng hiệu quả của các chủng probiotic thuộc loài Bacillus được 2 108 tế bào mà họ đã ghi ít nhất tỷ lệ tử vong ở O. mykiss trong nghiên cứu thử thách. Các hoạt động in vitro stimu- latory của probiotics như Pdp11, 51M6, L. delbrueckii subsp. lactis và B. subtilis được tìm thấy là phụ thuộc liều [71]. Tương tự như vậy, các hoạt động miễn dịch của LAB và B. subtilis trong fi sh dưới điều kiện in vivo cũng khác nhau một cách phụ thuộc liều [57,64]. Trong nuôi trồng thủy sản liều probiotics thường thay đổi từ thức ăn 106e10 CFU / g. Liều tối ưu của một chế phẩm sinh học có thể khác nhau đối với tổ chức và có thể gõ các thông số miễn dịch với. Panigrahi et al. [63] ghi lại huyết thanh cao lysozyme, hoạt động thực bào của bạch cầu đầu thận và bổ sung cho các hoạt động tại O. mykiss ăn trong 30 ngày với L. rhamnosus căng thẳng tại 1.011 CFU / g thức ăn nhưng không phải ở một liều 109 CFU / g nuôi. Hơn nữa, kích thích miễn dịch đặc biệt của một phản ứng đối với các mô khác nhau / organ với cũng thay đổi với liều. Ví dụ, độ cao của hoạt động lysozyme trong huyết thanh và da ở M. miiuy được báo cáo ở hai liều khác nhau ví dụ, 107 và 109 CFU của C. thức ăn butyricum / g, tương ứng [75]. Mặt khác Sơn et al. [74], thấy liều tốt nhất của probiotic cho cá mú (Epinephelus coioides) là 108 CFU / kg thức ăn so với 106 và 1010 CFU / kg của L. plantarum về tăng trưởng, tăng cường miễn dịch và bảo vệ. Do đó, liều thấp hơn có thể thất bại để kích thích hệ thống miễn dịch piscine trong khi liều cao có thể gây tác dụng có hại [157]. Trong một nghiên cứu khác, Sơn et al. [75] đã cho thấy liều cao hơn (tức là 1.010 CFU / kg thức ăn) của L. platarum không thể bảo vệ fi sh vào nghiên cứu thử thách mặc dù tăng cường các thông số miễn dịch nhất định ở liều cụ thể. Trước đó, Nikoskelainen et al. [157] cũng ghi nhận tỷ lệ cao hơn tỷ lệ tử vong ở O. mykiss ăn ở liều cao của L. rhamnosus (1012 CFU thức ăn / g) so với liều thấp hơn (109 CFU / g thức ăn). Do đó, các liều của probiotics cá nhân cần phải được xác định cho một máy chủ cụ thể. 7.3. Thời gian cho ăn Thời gian cho ăn chế phẩm sinh học là một yếu tố quan trọng có thể ảnh hưởng đến việc thành lập, kiên trì và cảm ứng tiếp theo của các phản ứng miễn dịch ở một máy chủ. Trong fi sh hầu hết các lợi ích fi tác tài như tăng trọng, cải thiện khả năng miễn dịch và sức đề kháng bệnh đã được ghi nhận trong một chế độ ăn uống probiotics chế độ 1e10 tuần cho ăn. Quá trình thời gian cho cảm ứng tối ưu các phản ứng miễn dịch khác liên quan đến chủng probiotic và cũng loại thông số miễn dịch với. Các trình thời gian của probiotics ăn để kích thích hệ miễn dịch bẩm sinh cũng có thể khác nhau giữa các dòng khác nhau của các chế phẩm sinh học trong cùng một gia đình [49]. Tương tự như sự khác biệt trong kích thích Speci fi c thông số miễn dịch cũng phụ thuộc vào thời gian ăn. Ví dụ Diaz-Rosales et al. [52] quan sát trong yếu tăng cường fi không thể hoạt động hô hấp bùng nổ của probiotics ăn trong 60 ngày, nhưng trước đó Diaz-Rosales et al. [50], không phát hiện trong yếu tăng cường fi không thể của hoạt động này khi cho ăn các thức nóng bất hoạt của các chế phẩm sinh học tương tự trong 4 tuần. Tuy nhiên, một số chế phẩm sinh học thường được tìm thấy để kích thích hệ thống miễn dịch piscine trong vòng 2 tuần bổ sung. Ifuzzaman Shar- và Austin [73] ghi nhận cao nhất khả năng miễn dịch tế bào và miễn dịch dịch thể ở 2 tuần của chế độ và tiếp tục supplementa- sự dẫn ăn để hạ tại thứ 3 và thứ 4 tuần cho ăn. Trong khi một số nhà nghiên cứu tin rằng một chế độ ăn lâu dài là không cần thiết cho biotics trình [49], chế độ ăn ngắn hơn có thể gây ra sự suy giảm mạnh trong phản ứng miễn dịch trong fi sh [64]. Loại như vậy của sự suy giảm có thể là do sự thất bại của các chủng probiotic để thiết lập và nhân lên trong ruột fi sh. Mặc dù vậy, một chế độ ăn chế độ ăn uống lâu là thuận lợi để lưu trữ trong nhiều khía cạnh, nhiều nghiên cứu cần thiết để thiết lập các lợi ích fi- hiệu tài của chế độ ngắn hạn không được hưởng chỉ chất bổ trợ. 7.4. Phương thức bổ sung Mặc dù probiotics được sử dụng như là chất bổ sung chế độ ăn uống, Moriarty [19] đã đề xuất mở rộng trong định nghĩa fi de probiotic trong nuôi trồng thủy sản để vi khuẩn '' phụ gia nước '' và một số chế phẩm sinh học cũng được trực tiếp sử dụng làm phụ gia nước với sức khỏe tài liệu và bene ts fi môi trường [79 ]. Trong fi sh, chế phẩm sinh học được áp dụng trong các phương pháp khác nhau như tắm, hệ thống treo và thức ăn chăn nuôi. Tuy nhiên, bổ sung các chế phẩm sinh học như là phụ gia thức ăn chăn nuôi là phương pháp tốt nhất cho chế độ thực dân thành công và thành lập trong ruột [19,23,158,159]. Uống các chế phẩm sinh học có hiệu quả hơn trong việc nâng cao khả năng miễn dịch cũng như bảo hộ sau khi so sánh với việc bổ sung nước [76]. Tương tự như vậy đình chỉ hoặc bioencapsulation của probiotics thường được áp dụng cho ấu trùng fi sh [146,159e163]. Biotics Pro- như L. delbrueckii spp. delbrueckii khi được bổ sung thông qua các hãng sống như luân trùng artemia và thành công trong stimu- miễn dịch địa phương lating ở ấu trùng [66.105]. Ngoài việc bổ sung chế độ ăn uống, hút nước chịu của probiotics cũng có thể điều chỉnh hệ thống miễn dịch piscine với độ cao của một số thông số miễn dịch [76,78 , 79]. Trong một nghiên cứu Zhou et al. [79] cho thấy trong số ba probiotics (B. subtilis, B. coagulans, R. palustris), bổ sung vào nước @ 1 107 CFU / ml trong mỗi 2 ngày trong 40 ngày, B. coagulans và R. palustris, cho thấy hứa hẹn kết quả với cải thiện tăng trưởng, khả năng miễn dịch và tình trạng sức khỏe của O. niloticus. 7.5. Điều kiện môi trường Hiệu quả của chế phẩm sinh học phụ thuộc vào các thiết lập thành công các chế phẩm sinh học trong ruột. Một số yếu tố mà