4. Add 400 µL of Binding Buffer to the DNA Purification Micro Column placed into the
collection tube.
5. Load the converted DNA sample (from step 3) into the Binding Buffer in the column, mix
completely by pipetting.
6. Centrifuge the micro column placed into the collection tube at 12,000 rpm for 30 seconds.
Discard the flow-through. Place the micro column into the same collection tube.
7. Add 200 µL of Wash Buffer, prepared with ethanol, to the micro column and centrifuge at
12,000 rpm for 30 seconds. Discard the flow-through. Place the micro column into the
same collection tube.
8. Add 200 µL of Desulfonation Buffer, prepared with ethanol, to the micro column and let
the column stand at room temperature for 20 min.
9. Centrifuge the micro column placed into the collection tube at 12,000 rpm for 30 seconds.
Discard the flow-through. Place the micro column into the same collection tube.
10. Add 200 µL of Wash Buffer, prepared with ethanol, to the micro column and centrifuge at
12,000 rpm for 30 seconds. Discard the flow-through. Place a micro column into the same
collection tube.
11. Add an additional 200 µL of Wash Buffer, prepared with ethanol, to the micro column and
centrifuge at 12,000 rpm for 60 seconds.
12. Place the column into a clean1.5 ml microcentrifuge tube (not provided). Add 10 µL of
Elution Buffer to the micro column. Centrifuge at 12,000 rpm for 60 seconds.
Note: More than 10 µL (up to 20 µL) of Elution Buffer can also be used for converted DNA
elution. If a small amount (< 1 ng) of DNA was used for DNA conversion, elute DNA with
6-8 µL of Elution Buffer. Repeat the elution step twice (for a total volume of 12-16 µL).
13. Eluted converted DNA is ready for downstream analysis. DNA can be stored at -20 ºC for
more than 1 year.
4. Thêm 400 ml của ràng buộc đệm DNA lọc vi cột được đặt vào cácbộ sưu tập ống.5. tải các mẫu DNA đã được chuyển đổi (từ bước 3) vào bộ đệm ràng buộc trong cột, mixhoàn toàn bởi pipetting.6. ly tâm vi cột được đặt vào bộ sưu tập ống tại 12.000 vòng/phút trong 30 giây.Loại bỏ dòng chảy qua. Vị trí cột micro vào cùng một bộ sưu tập ống.7. thêm 200 ml của bộ đệm rửa, được chuẩn bị với ethanol, micro cột và máy ly tâm tại12.000 vòng/phút trong 30 giây. Loại bỏ dòng chảy qua. Đặt các cột nhỏ thành cáccùng một bộ sưu tập ống.8. thêm 200 ml Desulfonation đệm, chuẩn bị cồn, cột micro và cho phépcột đứng ở nhiệt độ phòng cho 20 phút.9. ly tâm vi cột được đặt vào bộ sưu tập ống tại 12.000 vòng/phút trong 30 giây.Loại bỏ dòng chảy qua. Vị trí cột micro vào cùng một bộ sưu tập ống.10. thêm 200 ml của bộ đệm rửa, được chuẩn bị với ethanol, micro cột và máy ly tâm tại12.000 vòng/phút trong 30 giây. Loại bỏ dòng chảy qua. Đặt một cột micro vào tương tựbộ sưu tập ống.11. thêm một bổ sung 200 ml của bộ đệm rửa, được chuẩn bị với ethanol, cột micro vàMáy ly tâm tại 12.000 vòng/phút trong 60 giây.12. đặt cột vào một clean1.5 ml microcentrifuge ống (không được cung cấp). Thêm 10 ml củaElution các bộ đệm để cột micro. Máy ly tâm tại 12.000 vòng/phút trong 60 giây.Lưu ý: hơn 10 ml (lên đến 20 ml) Elution đệm có thể cũng được sử dụng cho chuyển đổi DNAelution. Nếu một lượng nhỏ các DNA (< 1 ng) được sử dụng cho việc chuyển đổi DNA, elute DNA với6-8 ml Elution đệm. Lặp lại bước elution hai lần (đối với tổng khối lượng 12-16 ml).13. eluted chuyển đổi DNA đã sẵn sàng để phân tích về phía hạ lưu. ADN có thể được lưu trữ tại-20 ºC chohơn 1 năm.
đang được dịch, vui lòng đợi..

4. Thêm 400 ml Binding đệm để các cột DNA sạch Micro đặt vào
ống thu.
5. Tải các mẫu DNA được chuyển đổi (từ bước 3) vào Buffer Binding trong cột, trộn
hoàn toàn bởi trộn mẫu.
6. Ly tâm cột vi đặt vào ống thu gom ở 12.000 rpm trong 30 giây.
Bỏ dòng chảy qua. Đặt cột vi vào ống thu cùng.
7. Thêm 200 ml Rửa đệm, chuẩn bị với ethanol, đến cột vi và ly tâm ở
12.000 rpm trong 30 giây. Bỏ dòng chảy qua. Đặt cột vi vào các
ống thu cùng.
8. Thêm 200 ml Desulfonation đệm, chuẩn bị với ethanol, đến cột vi và để cho
các cột đứng ở nhiệt độ phòng trong 20 phút.
9. Ly tâm cột vi đặt vào ống thu gom ở 12.000 rpm trong 30 giây.
Bỏ dòng chảy qua. Đặt cột vi vào ống thu giống nhau.
10. Thêm 200 ml Rửa đệm, chuẩn bị với ethanol, đến cột vi và ly tâm ở
12.000 rpm trong 30 giây. Bỏ dòng chảy qua. Đặt một cột vi vào cùng một
ống thu.
11. Thêm thêm 200 ml Rửa đệm, chuẩn bị với ethanol, đến cột micro và
máy ly tâm ở 12.000 rpm trong 60 giây.
12. Đặt cột vào một ống microcentrifuge clean1.5 ml (không được cung cấp). Thêm 10 ml
Rửa giải đệm cột vi. Máy ly tâm ở 12.000 rpm trong 60 giây.
Lưu ý: Hơn 10 ml (lên đến 20 ml) của Rửa giải đệm cũng có thể được sử dụng để chuyển đổi DNA
rửa giải. Nếu một lượng nhỏ (<1 ng) của DNA được sử dụng để chuyển đổi DNA, rửa giải DNA với
6-8 ml Rửa giải đệm. Lặp lại các bước rửa giải hai lần (đối với tổng khối lượng 12-16 ml).
13. Tách rửa chuyển đổi DNA đã sẵn sàng để phân tích hạ lưu. DNA có thể được lưu trữ ở -20 ºC cho
hơn 1 năm.
đang được dịch, vui lòng đợi..
