To validate the effectiveness ofthe

To validate the effectiveness of

the surface sterilization procedure, the surface-sterilized tissues

(control) and the last rinsing water were inoculated onto nutrient

agar plates and any bacteria growth in the control agar plates within

24 h of incubation (30 °C ± 2 °C) indicates ineffective surface-
sterilization and samples discarded. After surface sterilization, the

tissues were gently homogenized separately with sterile 12.5 mM

potassium phosphate buffer (pH 7.1) using sterile test-tube and glass

rod to release the microbes in the tissues. The resulting homogenates

were centrifuge at 8000 ×g for 3 min and the supernatants were collect-
ed separately in triplicate per tissue. Bacteria genomic DNA was extract-
ed from the supernatants using GF-1 bacterial DNA extraction kit by

Vivantis. The extracted genomic DNA was quantified and checked for

purity at A260/280 nm (1.9–2.0) (Nanodrop, Thermo Fisher Scientific,

U.S.A.) and stored at −20 °C.

Kết quả (Việt) 1:

Để xác nhận tính hiệu quả củaquy trình khử trùng bề mặt, khử trùng bề mặt mô(điều khiển) và rinsing nước cuối cùng đã được tiêm chủng vào dinh dưỡngAgar tấm và bất kỳ tăng trưởng vi khuẩn trong mảng agar kiểm soát trong24 h ấp (30 ° C ± 2 ° C) cho thấy bề mặt không hiệu quả-khử trùng và mẫu bị loại bỏ. Sau khi khử trùng bề mặt, cácmô được nhẹ nhàng homogenized riêng rẽ với vô trùng 12.5 mMkali phosphat đệm (pH 7.1) bằng cách sử dụng vô trùng ống và thủy tinhque phát hành vi khuẩn trong các mô. Homogenates kết quảMáy ly tâm 8000 × g cho 3 phút và các supernatants thu-Ed một cách riêng biệt trong triplicate mỗi mô. Vi khuẩn gen DNA là trích-Ed từ supernatants GF-1 do vi khuẩn DNA khai thác bộ bằng cách sử dụngVivantis. Gen DNA chiết xuất được định lượng và kiểm tra chođộ tinh khiết tại A260/280 nm (1,9-2.0) (Nanodrop, Thermo Fisher khoa họcMỸ.) và được lưu trữ ở nhiệt độ-20 ° C.

Kết quả (Việt) 2:

Để xác nhận tính hiệu quả của

quy trình khử trùng bề mặt, các mô bề mặt tiệt trùng

(điều khiển) và nước rửa cuối cùng được tiêm vào chất dinh dưỡng

đĩa thạch và bất kỳ vi khuẩn phát triển trong biển kiểm soát môi trường thạch trong vòng

24 giờ ủ (30 ° C ± 2 ° C) cho thấy surface- không hiệu quả
khử trùng và mẫu bị loại bỏ. Sau khi khử trùng bề mặt, các

mô đã được nhẹ nhàng đồng nhất riêng với vô trùng 12.5 mM

đệm kali phosphate (pH 7.1) sử dụng vô trùng trong ống nghiệm và kính

que để phát hành các vi khuẩn trong các mô. Các homogenates kết quả

là máy ly tâm ở 8000 xg trong 3 phút và nước nổi là collect-
ed riêng trong ba lần mỗi mô. Vi khuẩn DNA là extract-
ed từ các nước nổi sử dụng GF-1 vi khuẩn kit tách chiết DNA bằng

Vivantis. Các DNA chiết xuất được định lượng và kiểm tra

độ tinh khiết tại A260 / 280 nm (1,9-2,0) (Nanodrop, Thermo Fisher Scientific,

Mỹ) và được lưu trữ ở -20 ° C.