Here, we optimized a method based o

Here, we optimized a method based on the
Qiagen DNA Mini Kit and showed efficient performance
in extracting nucleic acids from viral, as well as bacterial—
both gram-positive and -negative—sources, allowing rapid,
sensitive, and comprehensive downstream detection of a
wide range of pathogenic bacterial and viral agents. In this
method, the samples are concentrated by use of centrifugal
filters, instead of centrifugal precipitation, to prevent loss
of smaller viral particles; cells are enzymatically disrupted
by use of lysozyme, which efficiently lyses gram-positive
bacteria without compromising the detection of gramnegative
bacteria or viruses; and nucleic acid precipitation is
augmented by use of carrier RNA.
This study has certain limitations, such as the relatively
small number and concentrations of microbial strains used
in the spike-in experiments and the relatively small number
and type of clinical samples used to validate the method.
Furthermore, the developed method may be of great benefit
in other areas of molecular application outside of qPCR and
PLEX-ID, such as next-generation sequencing, but these
have not been explored within the scope of this research.

Kết quả (Việt) 1:

Ở đây, chúng tôi tối ưu hóa một phương pháp dựa trên cácQiagen ADN Mini Kit và cho thấy hiệu suất hiệu quảtrong chiết xuất axit nucleic từ virus, cũng như các vi khuẩn —gram Dương lẫn - tiêu cực-nguồn, cho phép nhanh chóng,nhạy cảm, và toàn diện về phía hạ lưu phát hiện mộtrộng phạm vi của các tác nhân gây bệnh do vi khuẩn và virus. Trong nàyphương pháp, các mẫu được tập trung bằng cách sử dụng của ly tâmbộ lọc, thay vì mưa ly tâm, để tránh mất mátnhỏ hơn các hạt virus; tế bào enzymatically bị gián đoạnbằng cách sử dụng lysozyme, hiệu quả lyses Gram dươngvi khuẩn mà không làm ảnh hưởng đến việc phát hiện gramnegativevi khuẩn hoặc virus; và lượng mưa axit nucleictăng cường bằng cách sử dụng các tàu sân bay RNA.Nghiên cứu này có những hạn chế nhất định, chẳng hạn như các tương đốisố lượng nhỏ và nồng độ của các chủng vi sinh vật được sử dụngtrong các cành trong thí nghiệm và số lượng tương đối nhỏvà các loại lâm sàng mẫu được sử dụng để xác nhận các phương pháp.Hơn nữa, các phương pháp phát triển có thể các lợi ích lớnở các khu vực khác của phân tử ứng dụng bên ngoài của qPCR vàPLEX-ID, chẳng hạn như thế hệ tiếp theo trình tự, nhưng đâykhông có được khám phá trong phạm vi của nghiên cứu này.

Kết quả (Việt) 2:

Ở đây, chúng tôi được tối ưu hóa một phương pháp dựa trên
Kit Qiagen DNA Mini và cho thấy hiệu suất hiệu quả
trong chiết xuất axit nucleic từ virus, cũng như bacterial-
Gram dương và -phủ-nguồn, cho phép nhanh chóng,
phát hiện hạ lưu nhạy cảm, và toàn diện của một
loạt các đại lý do vi khuẩn và virus gây bệnh. Trong
phương pháp, các mẫu được tập trung bằng cách sử dụng ly tâm
lọc, thay vì kết tủa ly tâm, để ngăn chặn sự mất mát
của các hạt virus nhỏ hơn; tế bào được enzym phá vỡ
do sử dụng lysozyme, mà làm tan hiệu quả Gram dương
vi khuẩn mà không ảnh hưởng việc phát hiện gramnegative
vi khuẩn hoặc virus; và lượng mưa axit nucleic được
tăng cường bằng cách sử dụng tàu sân RNA.
Nghiên cứu này có những hạn chế nhất định, chẳng hạn như là tương đối
số lượng nhỏ và nồng độ của các chủng vi sinh vật sử dụng
trong các thí nghiệm spike-in và số lượng tương đối nhỏ
và loại mẫu lâm sàng sử dụng để xác nhận các phương pháp.
Hơn nữa, phương pháp phát triển có thể được lợi ích lớn
trong các lĩnh vực khác của ứng dụng phân tử bên ngoài của qPCR và
PLEX-ID, chẳng hạn như trình tự thế hệ tiếp theo, nhưng những
chưa được khám phá trong phạm vi của nghiên cứu này.