4. Proceduresa. Requirements :The d

4. Procedures
a. Requirements :
The devices, instruments were sterile, light the alcohol lamp before beginning any culture transfer and always work close to your flame. Conduct fast, accurate operation. Flame the mouths of tubes and bottles before and after removing culture or media for them. Need to shake, shake well sample solution before dilution concentration. Use 1 sterile pipette /1 diluted concentration.
b. Steps:
Step 1: sample preparation
Prepare a 1:10 dilution of food sample by adding 10g (or ml) of it to the 90 ml sterile diluent (NaCl 0.85%) in the sterile blender. Blend for two minutes. Keep this suspension sterile.
Step 2: Sample dilution
Used sterile pipette added 1ml solution sample with concentration 10-1 into 9 ml NaCl tube was sterile and shake all dilutions 25 times or to use a mechanical shaker for 15 seconds and we had solution with 10-2. Then, serially diluting into the following tubes . Each tube will be a 10-fold dilution starting from the undiluted tube. The second a 10-2, the third a 10-3 and 10-4, etc . It is helpful to label all of your tubes before you begin so you don’t get confused once you begin with the dilutions.
Note:
Concentrations of diluted samples depend on the characteristics of the food such as processing conditions, shelf life, the origin of food and depend on the experience of controllers. So, when based on the sample features, we used 3 consecutive concentration is 10-2, 10-3 and 10-4 to culture.
Step 3: Culture sample dilution by pour plate method
- For corn milk sample we used 3 consecutive concentration is 10-2, 10-3 and 10-4 to culture. Two empty petri dish for each dilution to be plate and label them
- Operations:
+ Pipet 1ml from dilution 10-4 into each of two plates, appropriately label. Then put on the lid of tubes to prevent infection; After that, changed to other sterile pipettes for other dilutions.
+ After culturing sample into petri dish, we poured media. Nutrient Agar media after preparing and sterile, waiting for it became cooler about 40-450C (it is suitable for these temperatures because temperatures so hot , microorganisms would be die and if temperature at low point, media would be solidified). Pour until agar just cover bottom of plate about 15-20 ml, move plates gently around in a figure-8 pattern on the lab bench to mix inoculum with agar. Then allow plates to solidify completely.
Step 4: Incubation
Invert all plates gently and incubate t 300C for 48 hours, overthrow petri dish to prevent microorganisms grow on surface
Note: plates to solidify completely, we may incubate and always overthrow petri dish.
Step 5: Colony count
- Requirements :
+ The number of colonies / dish about 25-250 colonies, count them all.
+ Count colonies grown lonely.
+ In counting processing, do not open the lid of petri.
+ Use the pen put a dot on petri dish to count, each dot for each colony.

Kết quả (Việt) 2:

4. Thủ tục
một. Yêu cầu:
Các thiết bị, dụng cụ được vô trùng, ánh sáng đèn cồn trước khi bắt đầu bất kỳ chuyển giao văn hóa và luôn luôn làm việc gần với ngọn lửa của bạn. Tiến hành nhanh, hoạt động chính xác. Ngọn lửa miệng của ống và chai trước và sau khi loại bỏ văn hóa hoặc phương tiện truyền thông cho họ. Cần phải lắc, lắc giải pháp tốt mẫu trước khi nồng độ pha loãng. Sử dụng 1 pipet vô trùng / 1 nồng độ pha loãng.
B. Các bước:
Bước 1: chuẩn bị mẫu
Chuẩn bị pha loãng 1:10 mẫu thực phẩm bằng cách thêm 10g (hoặc mL) của nó vào 90 ml chất pha loãng vô trùng (NaCl 0,85%) trong máy xay sinh tố vô trùng. Xay trong hai phút. Giữ hệ thống treo này vô trùng.
Bước 2: Mẫu pha loãng
Dùng pipet vô trùng thêm mẫu giải pháp 1ml với nồng độ 10-1 vào 9 ml NaCl ống bị vô sinh và bắt tất cả các dung dịch pha loãng 25 lần hoặc sử dụng một shaker cơ khí cho 15 giây và chúng tôi đã có giải pháp với 10 -2. Sau đó, nối tiếp pha loãng vào ống sau. Mỗi ống sẽ được pha loãng 10 lần bắt đầu từ ống pha loãng. Thứ hai, một 10-2, thứ ba là 10-3 và 10-4, vv. Đó là hữu ích để nhãn tất cả các ống của bạn trước khi bạn bắt đầu để bạn không bị lẫn lộn khi bạn bắt đầu với những pha loãng.
Lưu ý:
Nồng độ của mẫu pha loãng phụ thuộc vào các đặc tính của thực phẩm như điều kiện chế biến, thời hạn sử dụng, nguồn gốc của thực phẩm và phụ thuộc vào kinh nghiệm của bộ điều khiển. Vì vậy, khi dựa trên các tính năng mẫu, chúng tôi sử dụng 3 tập trung liên tiếp là 10-2, 10-3 và 10-4 đến văn hoá.
Bước 3: Văn hoá mẫu pha loãng bởi đổ phương pháp tấm
- Đối với mẫu sữa ngô chúng tôi sử dụng 3 tập trung liên tiếp là 10-2, 10-3 và 10-4 đến văn hoá. Hai đĩa petri trống cho mỗi pha loãng là tấm và ghi nhãn
- Operations:
+ Pipet 1ml từ pha loãng 10-4 vào mỗi hai tấm, một cách thích hợp nhãn. Sau đó, đặt trên nắp ống để ngăn ngừa nhiễm trùng; Sau đó, thay đổi để pipet vô trùng khác để pha loãng khác.
+ Sau khi nuôi cấy mẫu vào đĩa petri, chúng tôi đổ phương tiện truyền thông. Phương tiện truyền thông dinh dưỡng Agar sau khi chuẩn bị và vô trùng, chờ đợi cho nó trở nên mát mẻ hơn về 40-450C (nó phù hợp cho những nhiệt độ này vì nhiệt độ quá nóng, các vi sinh vật sẽ chết và nếu nhiệt độ tại điểm thấp, phương tiện truyền thông sẽ được kiên cố hóa). Đổ cho đến khi agar chỉ bao gồm đáy biển khoảng 15-20 ml, di chuyển tấm nhẹ nhàng xung quanh trong một mẫu hình số 8 trên băng ghế dự bị trong phòng thí nghiệm để trộn cấy với môi trường thạch. Sau đó, cho phép các tấm kiên cố hóa hoàn toàn.
Bước 4: Ủ
Invert tất cả tấm nhẹ nhàng và ủ t 300C trong 48 giờ, lật đổ đĩa petri để ngăn chặn các vi sinh vật phát triển trên bề mặt
. Chú ý: tấm kiên cố hóa hoàn toàn, chúng tôi có thể ủ và luôn lật đổ đĩa petri
Bước 5 : Colony đếm
- Yêu cầu:
+ số lượng khuẩn lạc / món ăn về 25-250 thuộc địa, đếm tất cả.
+ đếm thuộc địa lớn cô đơn.
+ trong đếm chế biến, không mở nắp petri.
+ Sử dụng bút đặt một dấu chấm trên petri món ăn để đếm, mỗi chấm cho mỗi đàn.