Bacillus thuringiensis (Bt) is wide

Bacillus thuringiensis (Bt) is widely used in agriculture for pest control against
Lepidoptera, Diptera and Coleoptera orders. It is very difficult to control of Coleoptera pests
such as larvae of Scarabaeidae family, which damage the roots of tusf grass and other
horticultural and agricultural plants, because they are living in soil where sprayable insecticidal
formulation is hard to reach the target insects. The Cry8-type proteins specified to larvae of
scarab beetles. The Cry8-type proteins are insecticidal to larvae of scarab beetles. Bacillus
thuringiensis Cry8D (Cry8Da, Cry8Db) insecticidal proteins are unique among Cry8 family
protein in terms of its insecticidal activity against larvae and adult Scarab beetles, such as
Japanese beetle (Anomala cuprea, Popillia japonica). In this study, cry8Da gene encoding
nature protein Cry8Da, which were isolated in Vietnam, was expressed in E. coli. The 2031 bp
of cry8Da gene is digested from recombinant plasmid pGEM-cry8Da with BamHI và sacI and
ligated into pET32a(+) vector treated with the same enzymes. The recombinant plasmids
pET32a(+)-cry8Da were expressed in BL21(DE3)LysS strain under induction of IPTG. The
highest level for expression of Cry8Da recombinant E. coli has been obtained after induction by
1 mM IPTG at 30 0C for 4 hrs. Recombinant Cry8Da protein has molecular mass about 96 kDa
and purified by Ni(2+) affinity chromatography column, concentration 0,45 mg/ml after
purification. The expressed recombinant Cry8Da protein was confirmed by Western blot using
anti-Cry8Da antibody.

Kết quả (Việt) 1:

Bacillus thuringiensis (Bt) được dùng rộng rãi trong nông nghiệp kiểm soát dịch hại chống lạiLepidoptera, Diptera và Coleoptera đơn đặt hàng. Nó là rất khó kiểm soát sâu bệnh Coleopterachẳng hạn như ấu trùng của phân họ Bọ kìm gia đình, có gây thiệt hại gốc rễ của tusf cỏ và kháclàm vườn và nông nghiệp cây trồng, vì họ đang sống trong đất nơi sprayable chống côn trùngxây dựng là khó khăn để đạt được mục tiêu côn trùng. Cry8-loại protein được chỉ định để các ấu trùng củascarab bọ cánh cứng. Cry8-loại protein được chống côn trùng ấu trùng của scarab bọ cánh cứng. Trực khuẩnthuringiensis Cry8D (Cry8Da, Cry8Db) chống côn trùng protein là duy nhất trong số các gia đình Cry8bọ cánh cứng protein trong điều khoản của hoạt động chống côn trùng chống lại ấu trùng và Scarab dành cho người lớn, chẳng hạn nhưTiếng Nhật beetle (Anomala cuprea, Popillia japonica). Trong nghiên cứu này, cry8Da gen mã hóabản chất protein Cry8Da, mà đã được cô lập ở Việt Nam, được thể hiện trong E. coli. 2031 bpcủa cry8Da gen tiêu hóa từ tái tổ hợp plasmid pGEM-cry8Da với BamHI và sacI vàligated vào pET32a(+) vector được điều trị với các enzyme tương tự. Plasmid tái tổ hợppET32a (+)-cry8Da đã được thể hiện trong BL21 (DE3) LysS căng theo cảm ứng của IPTG. Cácmức cao nhất cho các biểu hiện của Cry8Da tái tổ hợp E. coli đã thu được sau khi cảm ứng bởi1 mM IPTG lúc 30 0C cho 4 giờ. Tái tổ hợp Cry8Da protein có khối lượng phân tử về 96 kDavà tinh khiết bởi Ni(2+) ái lực sắc kí cột, nồng độ 0,45 mg/ml sau khithanh lọc. Tái tổ hợp bày tỏ Cry8Da protein được xác nhận bằng cách sử dụng Western blotkháng thể Anti-Cry8Da.

Kết quả (Việt) 2:

Bacillus thuringiensis (Bt) được sử dụng rộng rãi trong nông nghiệp để kiểm soát dịch hại chống lại
Lepidoptera, Diptera và Coleoptera đơn đặt hàng. Nó là rất khó khăn để kiểm soát sâu bệnh Coleoptera
như ấu trùng của Scarabaeidae gia đình, phá hoại rễ của tusf cỏ và các
nhà máy làm vườn và nông nghiệp, bởi vì họ đang sống trong đất, nơi côn sprayable
xây dựng là khó khăn để đạt được mục tiêu côn trùng. Các protein Cry8 kiểu quy định để ấu trùng của
con bọ hung. Các protein Cry8 kiểu côn là ấu trùng của con bọ hung. Bacillus
thuringiensis Cry8D (Cry8Da, Cry8Db) protein diệt côn trùng là duy nhất trong gia đình Cry8
protein trong điều kiện hoạt động của nó đối với ấu trùng côn trùng và bọ cánh cứng Scarab người lớn, chẳng hạn như
bọ cánh cứng Nhật Bản (Anomala cuprea, Popillia japonica). Trong nghiên cứu này, cry8Da gen mã hóa
protein chất Cry8Da, được phân lập ở Việt Nam, được thể hiện trong E. coli. The 2031 bp
của gen cry8Da được tiêu hóa từ plasmid tái tổ hợp pGEM-cry8Da với BamHI and SACI và
gắn vào pET32a (+) vector điều trị bằng các enzyme tương tự. Các plasmid tái tổ hợp
pET32a (+) - cry8Da được thể hiện trong BL21 (DE3) LysS căng thẳng dưới cảm ứng của IPTG. Các
cấp độ cao nhất cho biểu hiện của Cry8Da tái tổ hợp E. coli đã được thu được sau khi cảm ứng bằng
1 mM IPTG ở 30 0 C trong 4 giờ. Protein tái tổ hợp Cry8Da có khối lượng phân tử khoảng 96 kDa
và tinh chế bằng Ni (2+) cột sắc ký ái lực, nồng độ 0,45 mg / ml sau khi
lọc. Các protein tái tổ hợp Cry8Da bày tỏ đã được khẳng định bằng Western blot sử dụng
anti-Cry8Da kháng thể.