Chuẩn bị Protein và 2 chiều (2-D) điện được theo phương pháp mô tả bởi Yoon et al.
[28]. Nền văn hóa của các chủng đã được rửa sạch hai lần với nước đá lạnh
đệm phosphat mặn (PBS; Invitrogen Co., Carlsbad,
CA, USA), và các mẫu được nghiền trực tiếp trong chất lỏng
nitơ bằng cối và chày. Giải pháp ly giải mẫu
có chứa 8 M urea (GE Healthcare, Uppsala, Thụy Điển),
2 M thiourea (GE Healthcare), 4% (w / v) 3 - [(3 cholamidopropyl) dimethyl-ammonio] -1-propanesulfonate
(Chaps; Sigma-Aldrich), 1% (w / v) dithiothreitol (DTT;
Sigma-Aldrich), và 1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride
(PMSF; Sigma-Aldrich) được trộn với các mẫu đất.
tricloaxetic mưa axit đã được thực hiện để tập trung và tinh chế các protein trong dung dịch ly giải nén.
Protein bột viên được hòa tan bằng dung dịch bù nước
[8 M urea, 2% (w / v) Chaps, và 0,002% (w / v) bromophenol xanh (Sigma-Aldrich)]
đang được dịch, vui lòng đợi..
