The embryogenic calluses were trans

The embryogenic calluses were transferred to multiple shoot regeneration medium (C5), which was developed after attempts using nine other media recipes that were unsuccessful. Modification was for the concentration of IAA, and BAP. Embryos turned brown when TDZ (thidiazuron) was added to C5 medium. Shoots were transferred to fresh C5 medium at 3–4 weeks intervals (Singh 2010). Actively growing shoots were transferred to a rooting medium [2.22 g MS basal medium w/vitamins (http://www.phytotechlab.com) + 15 g sucrose (Sigma; Lot # SLBC23332 V) + 3 g Gelzan™ (Sigma; Lot # 03M0031 V,)/L, pH 5.8]. Approximately 50 % of the shoots formed healthy seedlings that were transplanted to pots in the greenhouse. Amphidiploid (2n = 118) plants from the crosses of ‘Dwight’ × PI 441001, ‘Macon’ × PI 441001, ‘Ina’ × PI 441001 were produced by treating multiple, actively growing shoots (one to two leaf stage) in a filter sterilized solution of 0.2 % colchicine + 2 % dimethyl sulfoxide (DMSO) + 10 drops Tween® 20 + 10 mg GA3/L for 4–6 h in the culture incubator. Shoots were subsequently washed twice in sterile distilled-water in a sanitized laminar flow cabinet, and were transferred to C5 medium. All amphidiploids were identified cytologically using root tip chromosome preparations (Singh 2003). We used only amphidiploid plants of ‘Dwight’ (genome, G1G1; 2n = 40) × PI 441001 (genome, D3D3EE; 2n = 78) for producing backcross derived lines. ‘Dwight’ was used as a recurrent parent. Backcrossing was continued until self-fertile plants were produced. Backcross-derived plants were identified morphologically based on growth habit and leaf size and shape (compared with ‘Dwight’ and PI 441001) and cytologically (mitotic and meiotic chromosome count). Plants were also propagated through cuttings by treating with a commercial powder (Hormex Rooting Powder # 8, Brooker Chemical Corporation, Chatsworth, CA 91313). Mitotic and meiotic chromosomes were examined according to methods including fluorescence in situ hybridization (FISH) described by Singh (2003). Fertile plants with 2n = 40, 41, 42, 43 derived from BC3 to BC6 generations were planted in the field during summer.
Results
Production of intersubgeneric F1 hybrids between Glycine max and G. tomentella, G. argyrea, and G. latifolia
Crossability rate
Table 2 shows the crossability rates between soybean cultivars and 40- and 78-chromosome G. tomentella

Kết quả (Việt) 1:

Embryogenic calluses được chuyển đến nhiều shoot tái sinh trung (C5), được phát triển sau khi cố gắng sử dụng chín các phương tiện truyền thông công thức nấu ăn mà không thành công. Sửa đổi cho nồng độ của IAA, và BAP. Phôi chuyển màu nâu khi TDZ (thidiazuron) đã được thêm vào phương tiện C5. Cành được chuyển cho tươi C5 trung bình khoảng 3-4 tuần (Singh 2010). Tích cực phát triển cành được chuyển sang một phương tiện rooting [2.22 g MS cơ sở vừa w/vitamin (http://www.phytotechlab.com) + 15 g sucrose (Sigma; Lot # SLBC23332 V) + 3 g Gelzan™ (Sigma; Lot # 03M0031 V,)/L, pH 5.8]. Khoảng 50% các shoots hình thành cây giống khỏe mạnh đã được transplanted vào chậu trong nhà kính. Amphidiploid (2n = 118) cây từ vượt qua 'Dwight' × PI 441001, 'Macon' × PI 441001, 'Ina' × PI 441001 được sản xuất bằng cách điều trị nhiều, tích cực phát triển cành (giai đoạn 1-2 lá) trong một bộ lọc khử trùng các giải pháp của 0,2% colchicine + 2% dimethyl sulfôxít (DMSO) + 10 giọt Tween® 20 + 10 mg GA3/L cho 4 – 6 h trong lồng ấp văn hóa. Cành đã được sau đó rửa sạch hai lần trong vô trùng chưng cất nước trong một dòng chảy bề mặt sanitized nội, và được chuyển đến trung bình C5. Tất cả amphidiploids đã được xác định bằng cách sử dụng cytologically gốc Mẹo nhiễm sắc thể chế (Singh 2003). Chúng tôi sử dụng chỉ amphidiploid cây của 'Dwight' (gen, G1G1; 2n = 40) × PI 441001 (gen, D3D3EE; 2n = 78) để sản xuất backcross nguồn gốc dòng. 'Dwight' được sử dụng như là một phụ huynh thường xuyên. Backcrossing đã được tiếp tục cho đến khi tự thực vật đã được sản xuất. Backcross có nguồn gốc thực vật đã được xác định về mặt hình thái Dựa trên sự phát triển thói quen và lá kích thước và hình dạng (so với 'Dwight' và PI 441001) và cytologically (phân bào và meiotic nhiễm sắc thể số). Nhà máy đã được truyền cũng bằng cách điều trị với thương mại bột (Hormex Rooting bột # 8, Tổng công ty hóa chất Brooker, Chatsworth, CA 91313) thông qua các cành giâm. Nhiễm sắc thể phân bào và meiotic đã được kiểm tra theo phương pháp trong đó có huỳnh quang trong situ lai (cá) được mô tả bởi Singh (2003). Cây màu mỡ với 2n = 40, 41, 42, 43 xuất phát từ BC3 để BC6 thế hệ đã được trồng trong lĩnh vực này trong suốt mùa hè.Kết quảSản xuất intersubgeneric F1 lai giữa Glycine max và G. tomentella, G. argyrea và G. latifoliaTỷ lệ crossabilityBảng 2 cho thấy tỷ lệ crossability giữa các giống cây trồng đậu tương và 40 - và 78-nhiễm sắc thể G. tomentella

Kết quả (Việt) 2:

Các vết chai phôi đã được chuyển giao cho nhiều tái sinh chồi trung bình (C5), được phát triển sau khi cố gắng sử dụng chín công thức nấu ăn phương tiện truyền thông khác mà không thành công. Sửa đổi đã cho nồng độ IAA, và BAP. Phôi quay màu nâu khi TDZ (thidiazuron) được thêm vào C5 trung bình. Chồi được chuyển giao cho trung C5 tươi ở 3-4 tuần khoảng (Singh 2010). Tích cực chồi phát triển đã được chuyển giao cho một rễ trung bình [2.22 g môi trường MS cơ bản w / vitamin (http://www.phytotechlab.com) + 15 g sucrose (Sigma; Lô # SLBC23332 V) + 3 g Gelzan ™ (Sigma; lô # 03M0031 V,) / L, pH 5,8]. Khoảng 50% số chồi hình thành cây con khỏe mạnh đã được cấy vào chậu trong nhà kính. Amphidiploid (2n = 118) Cây từ thập của 'Dwight' × PI 441.001, 'Macon' PI × 441.001, 'Ina' × PI 441.001 được sản xuất bằng cách xử lý nhiều, măng tích cực phát triển (1-2 lá giai đoạn) trong một bộ lọc giải pháp tiệt trùng 0,2% colchicine + 2% dimethyl sulfoxide (DMSO) + 10 giọt Tween® 20 + 10 mg GA3 / L cho 4-6 h trong lồng ấp văn hóa. Chồi sau đó được rửa hai lần trong vô trùng cất nước trong một tủ cấy làm vệ sinh, và đã được chuyển giao cho C5 trung bình. Tất cả amphidiploids đã được xác định cytologically sử dụng các chế đầu rễ nhiễm sắc thể (Singh 2003). Chúng tôi chỉ sử dụng các nhà máy amphidiploid của 'Dwight' (gen, G1G1; 2n = 40) × PI 441.001 (gen, D3D3EE; 2n = 78) để sản xuất dòng hồi giao nguồn gốc. 'Dwight' đã được sử dụng như một phụ huynh tái phát. Lai trở lại được tiếp tục cho đến khi máy tự màu mỡ đã được sản xuất. Cây hồi giao có nguồn gốc được xác định hình thái dựa trên thói quen tăng trưởng và kích thước lá và hình dạng (so với 'Dwight và PI 441.001) và cytologically (phân bào và số lượng nhiễm sắc thể phân bào giảm nhiễm). Cây cũng được phổ biến qua cành giâm bằng cách xử lý với một loại bột thương mại (Hormex rễ Powder # 8, Brooker Chemical Corporation, Chatsworth, CA 91.313). Phân bào và nhiễm sắc thể phân bào giảm nhiễm đã được kiểm tra theo phương pháp bao gồm huỳnh quang ở chỗ lai (FISH) được mô tả bởi Singh (2003). Cây màu mỡ với 2n = 40, 41, 42, 43 có nguồn gốc từ BC3 để BC6 thế hệ mới được trồng ở lĩnh vực này trong mùa hè.
Kết quả
sản xuất giống lai F1 giữa intersubgeneric Glycine max và G. tomentella, G. argyrea, và G. latifolia
tỷ Crossability
bảng 2 cho thấy tỷ lệ crossability giữa giống đậu tương và 40 và 78 nhiễm sắc thể G. tomentella