AnalysisFor the estimation of bioma

Analysis
For the estimation of biomass dry weight, 10-mL samples
of culture were centrifuged (at 11,OOOg for 10 min),
the pellet was washed twice with distilled water, resuspended,
added to a predried aluminum foil boat, and
dried at 90°C to constant weight. Vancomycin in culture
filtrates was recovered by affinity chromatography using
the cell wall ligand D-alanyl-D-ala~~ine.~~ The antibiotic
concentration was measured by high-performance Iiquid
chromatography (HPLC) as rep~rted,'~ except that
a mobile phase consisting of acetonitrile : methanol : ammonium
acetate (0.2M) : water (45 : 10 : 10 : 35 v/v) was
used. A comparative microbiological assay' using B.
subtilis (ACTCC 6633) as the indicator organism was
also used on a 36-well bioassay plate (Nunc). This assay
was shown to be linear over the range tested (1-90 pg/
mL). Residual glucose was measured using a test kit
(GOD-Perid, Boehringer Mannheim), based on the glucose
oxidase reaction. Residual phosphate was measured
using a colorimetric assay based on the formation
of phosphomolybdate by the reaction of phosphate and
ammonium m~lybdate.~~ Amino acids were determined
by gradient HPLC as their o-phthaldehyde derivative^.

Kết quả (Việt) 2:

Phân tích
Đối với dự toán sinh khối trọng lượng khô, mẫu 10-mL
của văn hóa được ly tâm (ở 11, OOOg trong 10 phút),
các pellet được rửa hai lần bằng nước cất, lơ lửng,
thêm vào một lá thuyền nhôm predried, và
sấy khô ở 90 ° C đến khối lượng không đổi. Vancomycin trong văn hóa
các bộ lọc đã được phục hồi bằng sắc ký ái lực sử dụng
các tế bào ligand D-alanyl-D-ala ~~ ine. ~~ Các kháng sinh
nồng độ được đo bằng hiệu suất cao Iiquid
sắc ký (HPLC) là đại diện ~ rted, '~ ngoại trừ
một pha động gồm acetonitrile: methanol: ammonium
acetate (0.2m): nước (45: 10: 10: 35 v / v) đã được
sử dụng. Một xét nghiệm vi sinh so sánh 'bằng B.
subtilis (ACTCC 6633) là sinh vật chỉ thị đã được
cũng được sử dụng trên một tấm xét nghiệm sinh học 36-tốt (Nunc). Xét nghiệm này
được thể hiện là tuyến tính trong khoảng thử nghiệm (1-90 pg /
mL). Glucose dư được đo bằng cách sử dụng một bộ kiểm tra
(GOD-Perid, Boehringer Mannheim), dựa trên glucose
oxidase phản ứng. Phosphate còn lại được đo
bằng cách sử dụng một xét nghiệm đo màu dựa trên sự hình thành
của phosphomolybdate bởi phản ứng của phosphate và
amoni m ~ lybdate. ~~ axit amin được xác định
bằng HPLC gradient như phái sinh o-phthaldehyde họ ^.