To measure cell proliferation or DN

To measure cell proliferation or DNA synthesis in the spleen cell line was assessed by its reactivity to 5-bromo2-deoxy-uridine (BrdU). The cells were inoculated at the density of 1×105 cells well. After reaching the 50% confluency, the cell culture medium was replaced by BrdU labeling medium and incubated at 28 °C for 2 h. After incubation, the labeling medium was removed and washed three times with wash buffer. Then the cells were fixed with ethanol for 20 min in −20 °C and washed with wash buffer. The fixed cells were incubated with alkaline phosphate conjugated anti-Brd U-mouse antibody for 30 min at 37 °C. After thorough washing, the cells were treated with sufficient amount of freshly prepared colour-substrate solution (BCIP) and incubated for 30 min at 25 °C, then examined under inverted microscope (Erlanger and Beiser, 1964).

Kết quả (Việt) 1:

Để đo lường điện phổ biến hoặc tổng hợp ADN trong dòng tế bào lách được đánh giá bởi phản ứng của nó đến 5-bromo2-deoxy-uridine (BrdU). Các tế bào đã được tiêm chủng ở với mật độ 1 × 105 các tế bào tốt. Sau khi đạt 50% confluency, tế bào văn hóa vừa được thay thế bằng BrdU ghi nhãn trung và ủ tại 28 ° C trong 2 h. Sau khi ủ, vừa ghi nhãn đã được gỡ bỏ và rửa 3 lần với rửa bộ đệm. Sau đó, các tế bào đã được cố định với ethanol cho 20 phút ở nhiệt độ-20 ° C và rửa sạch với rửa bộ đệm. Các tế bào cố định đã được ủ với kháng thể anti-Brd U-chuột ngoại kiềm photphat trong 30 phút ở 37 ° C. Sau khi rửa kỹ lưỡng, các tế bào đã được điều trị với số tiền đủ của tươi chuẩn bị bề mặt màu sắc giải pháp (BCIP) và ủ trong 30 phút ở 25 ° C, sau đó kiểm tra dưới kính hiển vi đảo ngược (Erlanger và Beiser, 1964).

Kết quả (Việt) 2:

Để đo lường sự tăng sinh tế bào hoặc tổng hợp DNA trong các dòng tế bào lá lách được đánh giá bằng phản ứng của mình cho 5 bromo2-deoxy-uridine (BrdU). Các tế bào được tiêm ở mật độ 1 × 105 tế bào tốt. Sau khi đạt đến confluency 50%, môi trường nuôi cấy tế bào đã được thay thế bằng BrdU vừa ghi nhãn và ủ ở 28 ° C trong 2 giờ. Sau khi ủ, các phương tiện ghi nhãn đã được gỡ bỏ và rửa ba lần với đệm rửa. Sau đó, các tế bào được cố định với ethanol trong 20 phút ở -20 ° C và rửa bằng đệm rửa. Các tế bào cố định được ủ với phosphatase kiềm liên hợp kháng thể chống Brd U-chuột trong 30 phút ở 37 ° C. Sau khi rửa kỹ lưỡng, các tế bào được điều trị với đủ lượng tươi chuẩn bị giải pháp màu nền (BCIP) và ủ trong 30 phút ở 25 ° C, sau đó quan sát dưới kính hiển vi đảo (Erlanger và Beiser, 1964).