application of SMI to neutralize in

application of SMI to neutralize intrinsic GDNF or GFRa1 functional blocking antibody was added to prevent the binding of GDNF to the respective receptor, the pro-tective effect of SMI was mostly eliminated. This would imply that the protective action of SMI is achieved at least partly through the participation of GDNF. The ELISA results suggested that SMI treatment could ele-vate the GDNF content in the culture medium. Unfortunately, the assay kit was not sensitive enough for this purpose hence the results were only a rough suggestion. In order to obtain the time course of the GDNF mRNA lev-els after the addition of SMI, SMI/DMSO was added after MPP+ had acted for 48h. Both the semi-quantitative RT- PCR and the quantitative RT-PCR showed that SMI addition led to a rapid increase in the GDNF mRNA. As early as 2 h
after SMI addition, GDNF mRNA was significantly higher than the basal level and reached a peak as high as 20–30-fold at 24–48 h. In contrast, the GFRa1 and Ret mRNA remained to unchanged. This result clearly demonstrates that the elevation of GDNF mRNA is an early event in the action of SMI andhence appears to be an important mechanism of its neuro-pro-tective action. It has been reported that extrinsic GDNF could alleviate the degeneration of dopaminergic neurons when administered either before or after injury. The above result on GDNF mRNA was obtained by adding SMI after MPP+. Therefore, it is possible that SMI could not only prevent but also repair the degeneration of dopaminergic neurons throug stimulating the intrinsic GDNF secretion. However, furtherexperiments are required to confirm this. Our data also revealed that addition of functional antibodies could only incompletely block the effect of SMI on the eleva-tion of neuron number. Therefore it is probable that some other factors may play a role in the effect of SMI on TH-posi-tive neurons. One possible factor is the brain derived neurotro-phic factor (BDNF) which has been reported to have aprotective effect against the damage of dopaminergic neurons by various injurious factors[6,23]. Whether BDNF was in- volved in the action of SMI remains to be studied. On theother hand, as shown in Fig. 3F, the effect of SMI on the neu-rite outgrowth length but not the TH-positive neuron numbers was nearly completely blocked by antibodies. One probable reason is that the protective action of GDNF on doparminer-gic neurons was more potent on the volume of cell soma and length of neurite outgrowth than on the neuron number. Taken together, we have shown that SMI has a significantneuro-protective effect on primary cultured dopaminergic neu-rons. One important route of this action is to stimulate the intrinsic GDNF expression.Acknowledgements:This work is supported partly by Chinese National Natural Science Foundation (No. 30371636) and partly by Phytop-harm Plc.

Kết quả (Việt) 1:

ứng dụng SMI để trung hòa nội tại GDNF hoặc GFRa1 chức năng chặn kháng thể đã được bổ sung để ngăn chặn các ràng buộc của GDNF với các thụ thể tương ứng, tác dụng pro-tective của SMI chủ yếu được loại bỏ. Điều này sẽ ngụ ý rằng các hành động bảo vệ của SMI là đạt được ít nhất một phần thông qua sự tham gia của GDNF. Kết quả ELISA đề nghị SMI điều trị có thể ele-vate nội dung GDNF trong phương tiện truyền thông văn hóa. Thật không may, các khảo nghiệm kit đã không đủ nhạy cảm đối với điều này mục đích vì thế kết quả đã là chỉ là một gợi ý thô. Để có được quá trình thời gian GDNF mRNA Bungari-els sau khi bổ sung SMI, SMI/DMSO được thêm vào sau khi MPP + đã hoạt động cho 48 h. Bán định lượng RT - PCR và RT-PCR định lượng cho thấy bổ sung SMI đã dẫn đến một sự gia tăng nhanh chóng trong GDNF mRNA. Càng sớm như là 2 hsau khi bổ sung SMI, GDNF mRNA là cao hơn đáng kể so với mức cơ sở và đạt đến một đỉnh cao 20-30 lần tại 24 – 48 h. Trong ngược lại, GFRa1 và Ret mRNA vẫn không thay đổi đến. Kết quả này rõ ràng chứng tỏ vị GDNF mRNA là một sự kiện đầu tiên trong hành động của SMI andhence dường như là một cơ chế quan trọng của hành động thần kinh-pro-tective của nó. Nó đã được báo cáo rằng ngoại GDNF có thể làm giảm bớt sự thoái hóa tế bào thần kinh dopaminergic khi quản lý trước hoặc sau chấn thương. Kết quả trên trên GDNF mRNA thu được bằng cách thêm SMI sau MPP +. Do đó, nó có thể SMI có thể không chỉ ngăn chặn nhưng cũng sửa chữa thoái hóa tế bào thần kinh dopaminergic c kích thích sự tiết nội tại GDNF. Tuy nhiên, furtherexperiments được yêu cầu xác nhận điều này. Dữ liệu của chúng tôi cũng tiết lộ rằng bổ sung chức năng kháng thể chỉ không đầy đủ có thể chặn tác động của SMI eleva-tion của tế bào thần kinh số. Vì vậy, nó là có thể xảy ra rằng một số yếu tố khác có thể đóng một vai trò trong các hiệu ứng của SMI trên TH posi hoạt động cùng tế bào thần kinh. Một trong những yếu tố có thể là não neurotro-phic có nguồn gốc yếu tố (BDNF) mà đã được báo cáo có aprotective tác dụng chống lại thiệt hại tế bào thần kinh dopaminergic của yếu tố nguy hiểm khác nhau [6,23]. Cho dù BDNF là trong volved trong hành động của SMI vẫn được nghiên cứu. Mặt theother, như minh hoạ trong hình 3F, tác dụng của SMI trên neu nghi thức sự cao hơn chiều dài, nhưng không phải là những con số tế bào thần kinh TH-tích cực đã gần như hoàn toàn bị chặn bởi kháng thể. Một lý do có thể xảy ra là các hành động bảo vệ của GDNF trên tế bào thần kinh doparminer-gic đã mạnh hơn vào khối lượng tế bào soma và chiều dài của sự cao hơn neurite hơn về số lượng tế bào thần kinh. Lấy nhau, chúng tôi đã chỉ ra rằng SMI có tác dụng bảo vệ significantneuro chính văn hóa dopaminergic neu-rons. Một trong những tuyến đường quan trọng của hành động này là để kích thích sự biểu hiện GDNF nội tại. Lời cảm ơn: tác phẩm này được hỗ trợ một phần bởi Quỹ khoa học tự nhiên quốc gia Trung Quốc (số 30371636) và một phần của Phytop hại Plc.

Kết quả (Việt) 2:

ứng dụng của SMI để trung hòa nội tại GDNF hoặc GFRa1 chặn chức năng kháng thể được thêm vào để tránh những ràng buộc của GDNF với các thụ thể tương ứng, hiệu ứng pro-tective của SMI đã được chủ yếu là loại bỏ. Điều này có nghĩa rằng các hành động bảo vệ của SMI đạt được ít nhất là một phần thông qua sự tham gia của GDNF. Các kết quả ELISA cho rằng điều trị SMI có thể Ele-vate nội dung GDNF trong môi trường nuôi cấy. Thật không may, bộ kit xét nghiệm là không đủ nhạy cảm cho mục đích này vì thế kết quả là chỉ có một đề nghị thô. Để có được quá trình thời gian của GDNF mRNA lev-els sau khi bổ sung SMI, SMI / DMSO đã được thêm vào sau khi MPP + đã hành động cho 48 giờ. Cả hai bán định lượng RT-PCR và định lượng RT-PCR cho thấy SMI Ngoài ra dẫn đến một sự gia tăng nhanh chóng trong GDNF mRNA. Sớm nhất là 2 h
sau SMI Ngoài ra, GDNF mRNA là cao hơn so với mức cơ bản đáng kể và đạt đến một đỉnh cao như 20-30 lần tại 24-48 h. Ngược lại, các GFRa1 và Ret mRNA vẫn để không thay đổi. Kết quả này chứng minh rõ ràng rằng độ cao của GDNF mRNA là một sự kiện đầu trong hành động của SMI andhence dường như là một cơ chế quan trọng của hành động thần kinh-pro-tective của nó. Nó đã được báo cáo rằng bên ngoài GDNF có thể làm giảm bớt sự thoái hóa của tế bào thần kinh dopaminergic khi dùng trước hoặc sau chấn thương. Kết quả trên trên GDNF mRNA đã thu được bằng cách thêm SMI sau MPP +. Do đó, có thể là SMI không chỉ có thể ngăn chặn mà còn sửa chữa sự thoái hóa của tế bào thần kinh dopaminergic throug kích thích sự tiết GDNF nội tại. Tuy nhiên, furtherexperiments được yêu cầu phải xác nhận điều này. Dữ liệu của chúng tôi cũng cho thấy rằng việc bổ sung kháng thể chức năng chỉ không đầy đủ có thể ngăn chặn ảnh hưởng của SMI trên eleva-tion của số tế bào thần kinh. Vì vậy nó là có thể xảy ra rằng một số yếu tố khác có thể đóng một vai trò trong sự tác động của SMI trên tế bào thần kinh TH-Posi-chính kịp thời. Một yếu tố có thể là bộ não có nguồn gốc yếu tố neurotro-phic (BDNF) đã được báo cáo là có tác dụng chống lại aprotective những thiệt hại của tế bào thần kinh dopaminergic bởi các yếu tố gây hại khác nhau [6,23]. Cho dù BDNF là volved trong- trong hành động của SMI vẫn còn được nghiên cứu. Trên tay theother, như thể hiện trong hình. 3F, tác dụng của SMI vào độ dài kết quả tự nhiên neu nghi thức nhưng không phải là số nơron TH dương đã gần như hoàn toàn bị chặn bởi các kháng thể. Một lý do có thể xảy ra là các hành động bảo vệ của tế bào thần kinh trên GDNF doparminer-GIC là mạnh hơn vào số lượng tế bào soma và chiều dài của quả tự nhiên neurite hơn về số lượng tế bào thần kinh. Cùng với nhau, chúng tôi đã chỉ ra rằng SMI có tác dụng significantneuro-bảo vệ trên chính dopaminergic nuôi neu-Rons. Một tuyến đường quan trọng của hành động này là để kích thích expression.Acknowledgements GDNF nội tại: Công trình này được hỗ trợ một phần bởi Quỹ khoa học tự nhiên quốc gia Trung Quốc (số 30.371.636) và một phần bởi Phytop hại Plc.