The purified lipase and phospholipa

The purified lipase and phospholipase preparations were monitored in isoelectric-focusing gel and reverse-phase HPLC column. In-gel assay and the analysis of fractions revealed that both the activities were colocalized, suggesting a single polypeptide was responsible for both the hydrolytic activities. To further confirm, radiolabeled photoactive analogs of PC and triolein were synthesized. Both the analogs were used as substrates by the purified enzyme in the dark and as irreversible inhibitors upon cross-linking under UV light (data not shown). Figure ​Figure88 shows the photoaffinity labeling of the protein with both the analogs. Labeling of a single polypeptide with both the analogs unequivocally demonstrated that the purified protein specifically interacted with triolein as well as PC analogs.

Kết quả (Việt) 1:

Các chế phẩm tinh khiết lipase và phospholipase đã được giám sát trong isoelectric tập trung gel và đảo ngược pha HPLC cột. Trong gel khảo nghiệm và phân tích của phân số tiết lộ rằng cả hai các hoạt động đã được colocalized, cho thấy một polypeptide duy nhất chịu trách nhiệm cho các hoạt động cả hai hydrolytic. Để tiếp tục xác nhận, radiolabeled chất thay bữa photoactive PC và triolein đã được tổng hợp. Cả hai chất thay bữa các đã được sử dụng như là chất nền bởi enzym tinh khiết trong bóng tối và là chất ức chế không thể đảo ngược khi qua dưới tia UV (dữ liệu không hiển thị). Con số cho thấy Figure88 photoaffinity ghi nhãn của protein với các chất thay bữa cả hai. Ghi nhãn một polypeptide duy nhất với các chất thay bữa cả hai cách dứt khoát đã chứng minh rằng tinh khiết protein cụ thể tương tác với triolein và chất thay bữa PC.

Kết quả (Việt) 2:

Các lipase và phospholipase chuẩn bị tinh sạch được theo dõi trong gel đẳng điện-tập trung và ngược pha cột HPLC. In-gel khảo nghiệm và phân tích các phân số tiết lộ rằng cả hai hoạt động này được colocalized, cho thấy một polypeptide đơn phải chịu trách nhiệm cho cả hai hoạt động thủy phân. Để xác nhận thêm, các chất tương tự quang hoạt phóng xạ của máy tính và Triolein được tổng hợp. Cả hai chất tương tự đã được sử dụng làm chất nền bằng các enzyme tinh khiết trong các chất ức chế tối và như không thể đảo ngược khi liên kết ngang dưới ánh sáng tia cực tím (dữ liệu không hiển thị). Hình Figure88 lãm các nhãn photoaffinity của protein với cả các chất tương tự. Ghi nhãn của một polypeptide duy nhất với cả các chất tương tự một cách rõ ràng chứng minh rằng protein tinh khiết đặc biệt tương tác với Triolein cũng như các chất tương tự máy tính.