First, an aliquot of the total seme

First, an aliquot of the total semen was thawed and washed three
times in phosphate-buffered saline. Then, sperm cells were diluted to a
concentration of 10 × 106 spermatozoa/ml, and 25 ml was mixed with
50 ml of 1% low-melting point agarose (Sigma Aldrich, St Louis, MO,
USA) in distilled water. Quickly, 15 ml of the mixture was placed on two
different pre-treated slides for gel adhesion (1% low-melting point
agarose), covered with coverslips and allowed to gel on a cold plate at
48C for 5 min. Next, coverslips were carefully removed and slides were submerged
for 30 min in two lysing solutions (Comet lysis solutions, Halotech,
Madrid, Spain) and washed for 10 min in tris borate EDTA (TBE) (0.445 M
Tris–HCl, 0.445 M Boric acid and 0.01 M EDTA). For the neutral Comet
assay, electrophoresis was performed in the TBE buffer at 20 V (1 V/cm)
for 12 min and 30 s, with a subsequent wash in 0.9% NaCl for 2 min. For
the alkaline Comet assay, the slide was incubated in a denaturing solution
(0.03 M NaOH and 1 M NaCl) for 2 min and 30 s at 48C, and electrophoresis
was then performed in 0.03 M NaOH buffer at 20 V (1 V/cm) for
4 min. Both neutral and alkaline slides were then incubated in the neutralizing
solution (0.4 M Tris–HCl, pH 7.5) for 5 min, in TBE for 2 min and
finally dehydrated in an ethanol series of 70, 90 and 100% for 2 min each

Kết quả (Việt) 1:

Trước tiên, một aliquot tinh dịch tất cả tan và rửa balần trong dung dịch muối đệm phosphat. Sau đó, các tế bào tinh trùng đã được pha loãng với mộtnồng độ 10 × 106 spermatozoa/ml, và 25 ml được pha trộn với50 ml của 1% nóng chảy thấp điểm agarose (Sigma Aldrich, St Louis, MO,Mỹ) trong nước cất. Một cách nhanh chóng, 15 ml của hỗn hợp đã được đặt trên haislide trước được điều trị khác nhau cho gel bám dính (1% nóng chảy thấp điểmagarose), được bảo hiểm với coverslips và cho phép để gel trên một tấm lạnh tại48C cho 5 phút. Tiếp theo, coverslips đã được gỡ bỏ một cách cẩn thận và slide đã ngập nướctrong 30 phút trong hai giải pháp lysing (sao chổi lysis giải pháp, Halotech,Madrid, Tây Ban Nha) và rửa cho 10 phút ở tris borat EDTA (TBE) (0.445 MTris–HCl, 0.445 M axit Boric và 0,01 M EDTA). Cho sao chổi trung lậpkhảo nghiệm, điện được thực hiện trong vùng đệm TBE lúc 20 V (1 V/cm)cho 12 phút và 30 s, với một rửa tiếp theo trong 0,9% NaCl cho 2 phút choCác khảo nghiệm sao chổi kiềm, nắp trượt được ủ trong một giải pháp denaturing(0.03 M NaOH và 1 M NaCl) cho 2 phút và 30 s lúc 48 C, và điệnsau đó được thực hiện trong vùng đệm NaOH 0.03 M tại 20 V (1 V/cm) cho4 phút. Trung lập và kiềm trang trình bày sau đó đã được ủ trong các cách vô hiệu hóagiải pháp (0,4 M Tris-HCl, pH 7,5) trong 5 phút, ở TBE cho 2 phút vàcuối cùng mất nước trong một loạt ethanol của 70, 90 và 100% trong 2 phút

Kết quả (Việt) 2:

Đầu tiên, phần nổi của tổng tinh dịch đã được làm tan băng và rửa ba
lần trong đệm phosphat mặn. Sau đó, các tế bào tinh trùng được pha loãng với một
nồng độ 10 × 106 tinh trùng / ml và 25 ml được trộn với
50 ml dung dịch 1% nóng chảy thấp điểm agarose (Sigma Aldrich, St Louis, MO,
USA) trong nước cất. Nhanh chóng, 15 ml hỗn hợp đã được đặt trên hai
trang khác nhau trước khi điều trị cho độ bám dính gel (1% nóng chảy thấp điểm
agarose), được phủ coverslips và cho phép để gel vào một tấm lạnh ở
48C trong 5 phút. Tiếp theo, coverslips đã được gỡ bỏ một cách cẩn thận và slide bị ngập
trong 30 phút trong hai giải pháp lysing (giải pháp ly giải Comet, Halotech,
Madrid, Tây Ban Nha) và rửa sạch cho 10 phút trong tris EDTA borat (TBE) (0,445 M
Tris-HCl, 0,445 M Boric axit và 0,01 M EDTA). Đối với các Comet trung
khảo nghiệm, điện đã được thực hiện trong bộ đệm TBE tại 20 V (1 V / cm)
cho 12 phút và 30 giây, với một rửa tiếp theo trong 0,9% NaCl trong 2 phút. Đối với
các khảo nghiệm Comet kiềm, các slide được ủ trong một giải pháp biến tính
(0,03 M và NaOH 1 M NaCl) trong 2 phút và 30 giây tại 48C, và điện
sau đó đã được thực hiện trong 0,03 M NaOH đệm tại 20 V (1 V / cm ) cho
4 phút. Cả hai slide trung tính và kiềm sau đó được ủ trong các trung hòa
dung dịch (0,4 M Tris-HCl, pH 7,5) trong 5 phút, trong TBE trong 2 phút và
cuối cùng bị mất nước trong một loạt ethanol 70, 90 và 100% cho mỗi 2 phút