the WT and the mutant (Fig. 4D). Li

the WT and the mutant (Fig. 4D). Like ROC1, HAZ1 expression
is restricted to the outermost cells during early embryogenesis
but is detected in the outer layer of the ventral part
during later stages (Ito et al., 2004). Its expression was also
significantly reduced in the mutant embryos (Fig. 4E).
The epithelium of the scutellum functions in transporting
nutrients from the endosperm to the embryo during germination.
Rice α-amylase 1 (RAmy1A) is expressed on the
dorsal side of that epithelium, facing the endosperm tissue
(Sugimoto et al., 1997). Its gene expression was also reduced
in the osmpk6-1 embryos (Fig. 4F). Transcripts of HB genes,
encoding HD-ZIPIIIs, were negatively affected in mutant
embryos (Fig. 4G–J). These analyses indicate that mutations
in MPK6 influence embryo development at the early globular
stage, before the formation of a radial pattern.
SCARECROW (SCR) in Arabidopsis is specifically localized
to the endodermis cell layer, which includes the cortex/
endodermis initial cells that correspond to the L2 layer (Di
Laurenzio et al. 1996). As an ortholog of SCR in rice, OsSCR
is preferentially expressed in the endodermis cell layer, including
the cortex (Di Laurenzio et al., 1996).
A meristem-defective Arabidopsis mutant, pinhead/zwille
(pnh/zll), has a flat meristem and fails to maintain the indeterminate
state of the SAM (McConnell and Barton, 1995; Lynn
et al., 1999). PNH/ZLL is expressed in the central region of
the early embryo, probably corresponding to the provascular
region. The rice ortholog OsPNH1 is also expressed in the
future vascular regions of leaf primordia (Nishimura et al.,
2002) and has been used as an L3 vascular tissue marker
(Kamiya et  al., 2003). Expression of these two L2 and L3
marker genes, OsSCR and OsPNH1, was decreased in osmpk6
embryos (Fig. 4K, L).
Class 1 KNOTTED-like homeobox genes, such as
KNOTTED1 in maize (Smith et  al., 1995), Oryza sativa
homeobox 1 (OSH1) in rice (Sato et al., 1996), and SHOOT
MERISTEMLESS in Arabidopsis (Long et  al., 1996), are
expressed in the indeterminate cells around the SAM. At
the early embryo stages before cell differentiation, they are
expressed in the presumptive SAM region. Therefore, OSH1
has been used as a marker for studying the apical region in rice
embryos (Sato et al., 1996; Kamiya et al., 2003). We noted that
transcript levels of OSH1 were also decreased in the mutant
embryos (Fig.  4M). These results support previous findings
that the mutants do not differentiate embryonic organs.
To improve our understanding of how osmpk6 mutations
affect genes involved in basic pattern formation, we monitored
the spatial expression of molecular marker genes. Because
ROC1 is specifically expressed in the L1 protoderm (Ito et al.,
2002), we performed RNA in situ hybridization experiments.
In WT embryos, ROC1 was exclusively detected in the outermost
cells of globular-stage embryos at 3 DAP (Fig. 5A),
when no distinct protoderm layer was yet visible. This indicates
that differentiation of the L1 layer is determined shortly
after fertilization. That gene was also preferentially expressed
in the outermost cells of coleoptilar-stage embryos at 5 DAP,
when a protoderm layer structure was evident (Fig. 5C). In
osmpk6-1 embryos, ROC1 was weakly expressed in the outer
portions (Fig.  5B, D). Transcripts of the L3 marker gene

Kết quả (Việt) 1:

WT và đột biến (hình 4 d). Giống như ROC1, HAZ1 biểubị hạn chế cho các tế bào ngoài cùng trong thời gian sớm embryogenesisnhưng được phát hiện trong các lớp bên ngoài của phần bụngtrong giai đoạn cuối (Ito và ctv., 2004). Biểu hiện của nó cũnggiảm đáng kể trong đột biến phôi (hình 4E).Biểu mô của các chức năng scutellum trong vận chuyểnchất dinh dưỡng từ nội nhũ để phôi thai trong thời gian nảy mầm.Gạo α-amylase 1 (RAmy1A) được thể hiện trên cácmặt lưng của đó biểu mô, phải đối mặt với các tế bào nội nhũ(Sugimoto et al., 1997). Biểu hiện gen của nó cũng đã được giảmtrong phôi osmpk6-1 (hình 4F). Bảng điểm của HB gien,mã hóa HD-ZIPIIIs, đã ảnh hưởng tiêu cực trong đột biếnphôi (hình 4G – J). Các phân tích chỉ ra rằng đột biếnMPK6 ảnh hưởng phôi thai phát triển tại các đầu cầuSân khấu, trước khi hình thành một mô hình bố trí hình tròn.Bù NHÌN (SCR) ở Arabidopsis đặc biệt bản địa hoáđể lớp tế bào endodermis, bao gồm vỏ não /tế bào ban đầu endodermis tương ứng với các lớp L2 (DiLaurenzio et al. 1996). Như là một ortholog của SCR trong gạo, OsSCRxteoit được bày tỏ trong lớp tế bào endodermis, bao gồm cảvỏ não (Di Laurenzio et al., 1996).Một mô phân sinh khiếm khuyết Arabidopsis đột biến, đầu kim/zwille(pnh/zll), có một mô phân sinh bằng phẳng và không duy trì việc không xác địnhbang SAM (McConnell và Barton, 1995; Lynnet al., 1999). PNH/ZLL được thể hiện trong vùng Trung tâmphôi thai sớm, có lẽ tương ứng với provascularkhu vực. Gạo ortholog OsPNH1 cũng được thể hiện trong cácvùng mạch trong tương lai của lá primordia (Nishimura et al.,2002) và đã được sử dụng như một điểm đánh dấu mô mạch L3(Kamiya et al., 2003). Biểu hiện của những hai L2 và L3dấu hiệu gen, OsSCR và OsPNH1, được giảm trong osmpk6phôi (hình 4K, L).Lớp 1 KNOTTED như homeobox gen, chẳng hạn nhưKNOTTED1 ở ngô (Smith và ctv, 1995), Oryza sativahomeobox 1 (OSH1) trong gạo (Sato và ctv., 1996), và BẮNMERISTEMLESS trong Arabidopsis (Long ctv., 1996), làthể hiện trong các tế bào không xác định xung quanh thành phố SAM. Tạiphôi thai giai đoạn đầu trước khi sự khác biệt của tế bào, bọn chúngthể hiện trong vùng SAM ngai vàng. Vì vậy, OSH1đã được sử dụng như một điểm đánh dấu để nghiên cứu vùng đỉnh gạophôi (Sato và ctv., 1996; Kamiya et al., 2003). Chúng tôi lưu ý rằngbảng điểm cấp của OSH1 đã được cũng giảm trong người đột biếnphôi (hình 4 M). Các kết quả hỗ trợ phát hiện trước đórằng những người đột biến không phân biệt cơ quan phôi.Để cải thiện sự hiểu biết của chúng tôi về làm thế nào osmpk6 đột biếnảnh hưởng đến gen liên quan đến sự hình thành mô hình cơ bản, chúng tôi theo dõinhững biểu hiện không gian đánh dấu phân tử gen. Bởi vìROC1 cụ thể được bày tỏ trong L1 protoderm (Ito et al.,năm 2002), chúng tôi thực hiện RNA trong situ lai thí nghiệm.Trong phôi WT, ROC1 độc quyền được phát hiện trong các ngoài cùngCác tế bào của cụm sao cầu giai đoạn phôi tại 3 DAP (hình 5A),Khi không có lớp riêng biệt protoderm là chưa nhìn thấy được. Điều này cho thấysự khác biệt của các lớp L1 xác định một thời gian ngắnsau khi thụ tinh. Gen đó cũng tích được thể hiệntrong các tế bào ngoài cùng của coleoptilar giai đoạn phôi tại 5 DAP,Khi một cấu trúc lớp protoderm đã rõ ràng (hình 5 c). Ởphôi osmpk6-1, ROC1 là yếu thể hiện ở bên ngoàiphần (hình 5B, D). Bảng điểm của các gen marker L3

Kết quả (Việt) 2:

WT và đột biến (Hình. 4D). Giống như ROC1, biểu HAZ1
được giới hạn cho các tế bào ngoài cùng trong phôi đầu
nhưng được phát hiện ở các lớp ngoài của phần bụng
trong giai đoạn sau (Ito et al., 2004). Biểu hiện của nó cũng đã được
giảm đáng kể trong phôi đột biến (Hình 4E.).
Biểu mô của các chức năng lớp vảy trong vận chuyển
chất dinh dưỡng từ nội nhũ để phôi trong nảy mầm.
Α-amylase 1 (RAmy1A) Gạo được thể hiện trên các
mặt lưng mà biểu mô, phải đối mặt với các mô nội nhũ
(Sugimoto et al., 1997). Biểu hiện gen của nó cũng đã được giảm
ở phôi osmpk6-1 (Hình. 4F). Bảng điểm của các gen HB,
mã hóa HD-ZIPIIIs, đã bị ảnh hưởng tiêu cực trong đột biến
phôi (Hình. 4G-J). Các phân tích chỉ ra rằng những đột biến
trong phát triển phôi thai ảnh hưởng MPK6 tại sao cầu đầu
sân khấu, trước sự hình thành của một mô hình xuyên tâm.
Scarecrow (SCR) trong Arabidopsis là cụ thể địa phương
đến lớp endodermis di động, trong đó bao gồm vỏ não /
endodermis tế bào ban đầu tương ứng với lớp L2 (Di
Laurenzio et al. 1996). Là một ortholog của SCR trong gạo, OsSCR
được ưu tiên bày tỏ trong lớp endodermis di động, bao gồm cả
vỏ não (Di Laurenzio et al., 1996).
Một cây Arabidopsis đột biến mô phân sinh bị lỗi, đầu kim / zwille
(pnh / zll), có một căn hộ mô phân sinh và không duy trì sự không xác định
trạng thái của SAM (McConnell và Barton, 1995; Lynn
et al., 1999). PNH / ZLL được thể hiện ở các khu vực trung tâm của
các phôi ban đầu, có thể tương ứng với provascular
khu vực. Các ortholog gạo OsPNH1 cũng được thể hiện trong các
vùng có mạch tương lai của sơ khởi lá (Nishimura et al.,
2002) và đã được sử dụng như một điểm đánh dấu L3 mô mạch
(Kamiya et al., 2003). Biểu hiện của hai L2 và L3
gen marker, OsSCR và OsPNH1, đã giảm trong osmpk6
phôi (Hình. 4K, L).
Class 1 thắt nút giống như gene homeobox, như
KNOTTED1 ở ngô (Smith et al., 1995), Oryza sativa
homeobox 1 (OSH1) trong hạt gạo (Sato et al., 1996), và SHOOT
MERISTEMLESS trong Arabidopsis (Long et al., 1996), được
thể hiện trong các tế bào không xác định xung quanh SAM. Ở
các giai đoạn phôi sớm trước khi biệt hóa tế bào, họ được
thể hiện trong các khu vực SAM khoán. Do đó, OSH1
đã được sử dụng như một điểm đánh dấu để nghiên cứu vùng đỉnh trong gạo
phôi (Sato et al, 1996;.. Kamiya et al, 2003). Chúng tôi lưu ý rằng
mức bảng điểm của OSH1 cũng đã giảm trong đột biến
phôi (Hình. 4M). Những kết quả hỗ trợ phát hiện trước đó
rằng các đột biến không phân biệt cơ quan của phôi thai.
Để cải thiện sự hiểu biết của chúng ta về cách osmpk6 đột biến
ảnh hưởng đến gen tham gia vào việc hình thành mô hình cơ bản, chúng tôi giám sát
các biểu hiện không gian của các gen marker phân tử. Bởi vì
ROC1 được thể hiện cụ thể trong protoderm L1 (Ito et al.,
2002), chúng tôi thực hiện RNA trong các thí nghiệm chỗ lai.
Trong phôi WT, ROC1 được độc quyền phát hiện ở ngoài cùng
tế bào của phôi hình cầu giai đoạn 3 DAP (Hình. 5A ),
khi không có lớp protoderm biệt là chưa nhìn thấy được. Điều này chỉ ra
rằng sự khác biệt của lớp L1 được xác định ngay
sau khi thụ tinh. Gen đó cũng được ưu tiên thể hiện
trong các tế bào ngoài cùng của phôi coleoptilar giai đoạn 5 DAP,
khi một cấu trúc lớp protoderm là hiển nhiên (Hình. 5C). Trong
phôi osmpk6-1, ROC1 được yếu thể hiện ở bên ngoài
phần (Hình. 5B, D). Bảng điểm của các gen đánh dấu L3