A new solid-phase enzyme immunoassa

A new solid-phase enzyme immunoassay measuring the gelatin-binding capacity of plasma fibronectin has been developed. This assay is based on the direct and high-affinity interaction between fibronectin and gelatin coated to polyvinyl chloride plates. The amount of fibronectin bound to gelatin is then measured by sequential incubation with a specific rabbit anti-human fibronectin antiserum, with horseradish peroxidase-conjugated goat anti-rabbit IgG antibodies and with substrate. The final degradation of the substrate is read at 492–650 nm in an ELISA processor. The assay allows the accurate detection of fibronectin concentrations ranging from 1 to 20 μg/ml, is inhibited by the addition of gelatin to plasma, is highly reproducible (interplate CV < 10%), requires 100 μl of plasma only and has been fully automated. Significant linear correlations were noted between total antigenic fibronectin (measured by laser nephelometry) and fibronectin gelatin-binding capacity in plasma from 310 blood donors. Both parameters were higher in men than in women and significantly increased according to age. Dissociation between immunoreactive fibronectin and fibronectin gelatin-binding capacity was observed in two polytraumatized patients. This enzyme immunoassay therefore provides a new method to investigate functional alterations of the gelatin-binding domain of fibronectin in various pathological conditions.

Kết quả (Việt) 1:

Một immunoassay rắn pha enzyme mới đo sức chứa gelatin-ràng buộc plasma fibronectin đã được phát triển. Khảo nghiệm này dựa trên sự tương tác trực tiếp và cao-mối quan hệ giữa fibronectin và gelatin tráng với Tấm polyvinyl clorua. Số lượng fibronectin bị ràng buộc để gelatin sau đó đo bằng tuần tự ủ bệnh với một cụ thể thỏ chống nhân fibronectin antiserum, với kháng thể IgG chống thỏ cải ngựa chia peroxidase dê và với chất nền. Suy thoái cuối cùng của bề mặt được đọc tại 492-650 nm trong một bộ xử lý ELISA. Các khảo nghiệm cho phép phát hiện chính xác fibronectin nồng độ khác nhau, từ 1 đến 20 μg/ml, là ức chế bằng cách bổ sung gelatin để plasma, là đánh giá cao thể sanh sản nhiều (interplate CV < 10%), yêu cầu 100 μl plasma chỉ và đã được hoàn toàn tự động. Mối tương quan tuyến tính đáng kể đã được ghi nhận giữa tất cả fibronectin kháng nguyên (đo bằng laser nephelometry) và năng lực ràng buộc gelatin fibronectin trong huyết tương từ các nhà tài trợ máu 310. Cả hai tham số này cao hơn ở nam giới hơn ở phụ nữ và tăng đáng kể theo tuổi. Phân ly giữa immunoreactive fibronectin và fibronectin gelatin-ràng buộc khả năng được quan sát thấy ở hai polytraumatized bệnh nhân. Này enzym immunoassay do đó cung cấp một phương pháp mới để điều tra các thay đổi chức năng của tên miền gelatin-ràng buộc của fibronectin trong điều kiện bệnh lý khác nhau.

Kết quả (Việt) 2:

Một pha rắn miễn dịch enzyme mới đo công suất gelatin mang tính ràng buộc Fibronectin plasma đã được phát triển. Xét nghiệm này được dựa trên sự tương tác trực tiếp và có ái lực cao giữa Fibronectin và gelatin phủ cho các tấm polyvinyl clorua. Lượng Fibronectin ràng buộc với gelatin khi đó được đo bằng cách ủ tuần tự với một con thỏ cụ thể Fibronectin chống con người kháng huyết thanh, với dê kháng thể IgG chống thỏ peroxidase liên hợp cải ngựa và với chất nền. Sự thoái hóa cuối cùng của bề mặt được đọc tại 492-650 nm trong một bộ xử lý ELISA. Xét nghiệm này cho phép phát hiện chính xác nồng độ Fibronectin khác nhau, từ 1 đến 20 mg / ml, bị ức chế bởi việc bổ sung gelatin để plasma, tái sản xuất là rất cao (interplate CV <10%), yêu cầu 100 ml chỉ plasma và đã được hoàn toàn tự động . Mối tương quan tuyến tính đã được ghi nhận giữa tổng Fibronectin kháng nguyên (đo bằng nephelometry laser) và công suất gelatin ràng buộc Fibronectin trong huyết tương từ 310 người hiến máu. Cả hai thông số này ở nam giới cao hơn ở phụ nữ và tăng lên đáng kể theo tuổi. Phân ly giữa Fibronectin immunoreactive và năng lực gelatin ràng buộc Fibronectin đã được quan sát ở hai bệnh nhân polytraumatized. Do đó, xét nghiệm miễn dịch enzyme này cung cấp một phương pháp mới để điều tra thay đổi chức năng của miền gelatin mang tính ràng buộc Fibronectin trong điều kiện bệnh lý khác nhau.