Giới thiệu
Phosphate nước muối đệm (viết tắt là PBS) là một dung dịch đệm thường được sử dụng trong nghiên cứu sinh học. Nó là một giải pháp mặn chứa natri clorua, natri phosphate, và (trong một số công thức) kali clorua và kali photphat. Các bộ đệm giúp duy trì độ pH không đổi. Các thẩm thấu và ion nồng độ của dung dịch thường phù hợp với những cơ thể con người (đẳng trương).
Ứng dụng
PBS có nhiều công dụng vì nó là đẳng trương và không độc hại cho tế bào. Nó có thể được sử dụng để pha loãng các chất. Nó được sử dụng để rửa container có chứa các tế bào. PBS có thể được sử dụng như một chất pha loãng trong các phương pháp để làm khô phân tử sinh học, như các phân tử nước bên trong nó sẽ được cấu trúc xung quanh chất (protein, ví dụ) để được 'khô' và cố định vào một bề mặt rắn. Các màng mỏng của nước liên kết với các chất ngăn chặn sự biến tính hay thay đổi cấu khác. Đệm cacbonat có thể được sử dụng cho các mục đích tương tự nhưng với hiệu quả ít hơn. PBS có thể được sử dụng để có một quang phổ chiếu khi đo sự hấp thụ protein trong ellipsometry.
Phụ gia có thể được sử dụng để thêm chức năng. Ví dụ, PBS với EDTA cũng được sử dụng để buông tha các tế bào thuộc và co cụm. Kim loại hóa trị hai như kẽm, tuy nhiên, không thể được thêm vào như là điều này sẽ dẫn đến lượng mưa. Đối với những loại ứng dụng, bộ đệm của Good được khuyến khích.
Chuẩn bị
Có rất nhiều cách khác nhau để chuẩn bị PBS. Một số công thức không chứa kali, trong khi những người khác có chứa canxi hoặc magiê [1]. Một trong các chế phẩm phổ biến nhất được mô tả dưới đây.
Một cổ phiếu 10 lít 10x PBS có thể được chuẩn bị bằng cách hòa tan
800 g NaCl,
20 g KCl,
144 g Na2HPO4 · 2H2O
24 g KH2PO4
8 lít nước cất.
Sau khi trộn xong, đầu lên giải pháp cuối cùng để 10 L. Độ pH của các cổ phiếu 10X là sẽ có khoảng 6.8, nhưng khi pha loãng để 1x PBS cần thay đổi để 7.4.When làm cho dung dịch đệm, đó là thực hành tốt để luôn luôn đo pH trực tiếp bằng máy đo pH. Nếu cần thiết, độ pH có thể được điều chỉnh bằng acid hydrochloric hoặc natri hydroxit.
Mở pha loãng, các kết quả 1x PBS nên có nồng độ cuối cùng của 137 mM NaCl, 10 mM Phosphate, 2,7 mM KCl, và độ pH 7.4.
Chuẩn bị khác được mô tả trong Nhân bản phân tử của Sambrook, Fritsch và Maniatis, Apendix B.12 [2] như sau:
Đối với 1 lít 1X PBS, chuẩn bị như sau:
Bắt đầu với 800 ml nước cất:
Thêm 8 g NaCl.
Thêm 0,2 g KCl.
Thêm 1,44 g Na2HPO4.
Thêm 0,24 g KH2PO4.
Điều chỉnh pH đến 7,4 bằng HCl.
Thêm nước cất để tổng khối lượng của 1 lít.
Bôi dung dịch vào dung dòch và khử trùng bằng nồi hấp (20 phút, 121 ° C, chu kỳ chất lỏng ). Bảo quản ở nhiệt độ phòng.
Tài liệu tham khảo
Dulbecco, R. et al. (1954): Mảng bám hình thành và phân lập các dòng thuần với virus bại liệt. Trong: J. Exp. Med. vol. 99 (2), tr. 167-182. PMID 13130792
Sambrook, Fritsch, và Maniatis (1989) Molecular Cloning:. Một tay Phòng thí nghiệm, 2nd ed, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, khối lượng 3, apendix B.12
Các phần của bài viết này là từ "Phosphate nước muối đệm. Trong Wikipedia, bách khoa toàn thư miễn phí. Lấy ngày 17 Tháng Chín năm 2008, từ http://en.wikipedia.org/wiki/Phosphate_buffered_saline. "Bài viết này đã được xem xét cho chính xác khoa học và được sử dụng theo GNU Free Documentation License của Wikipedia (GFDL).
đang được dịch, vui lòng đợi..
