Condensation of the protected nucle

Condensation of the protected nucleoside d(MeoTr)bzA with the protected nucleotide d[pbzA(Ac)] followed by condensation of the re- sulting dinucleotide with d[pT(Ac)] gives the trinucleotide d[(Meo Tr) -bzA-bzA-T]. The latter is next condensed with the dinucleotide d[pT anC(Ac)] to give the pentanucleotide d[(MeoTr)bzA-bzA-T-T-anc] which is purified by anion-exchange chromatography (Fig. 5). Condensation of the pentanucleotide with d[pT-T(Ac)] gives the required heptanucleotide. This product is purified by HPLC using a Bondapak C15/Porasil B column (Fig. 6). Because of the small lipophilic contribution of the thymine residues relative to the standard hydrophilic contribution of the two phosphate dissociations of the added dinucleotide, d[UpT T(Ac)], there is a relatively large difference in retention time between the product and unreacted starting material. This permits isolation of the heptanucleotide completely free of the pentanucleotide. The heptanucleo- tide is finally condensed with d[pT-anC(Ac), and the nonanucleotide is isolated by anion-exchange chromatography (Fig. 7). It is further purified after complete deprotection, by chromatography in the presence of 7M ureas (Fig. 8). Analysis by the fingerprinting method after P-phosphoryla-tion of the 5’-hydroxyl group and by HPLC using an analytical µBond-apak C18 column shows the product to be pure.

Kết quả (Việt) 1:

Sự ngưng tụ của bảo vệ nucleoside bzA d (MeoTr) với d[pbzA(Ac) được bảo vệ nucleotide] theo sau sự ngưng tụ của re-sulting dinucleotide với d[pT(Ac)] cho trinucleotide d [(Meo Tr) - bzA-bzA-T]. Thứ hai tiếp theo đặc với dinucleotide d [pT anC(Ac)] để cung cấp cho pentanucleotide d [(MeoTr) bzA-bzA-T-T-anc] đó tinh khiết bằng sắc kí trao đổi anion (hình 5). Sự ngưng tụ của pentanucleotide với d[pT-T(Ac)] cho yêu cầu heptanucleotide. Sản phẩm này tinh khiết by HPLC bằng cách sử dụng một cột Bondapak C15/Porasil B (hình 6). Vì sự đóng góp lipophilic nhỏ dư lượng thymine so với tiêu chuẩn Purifying đóng góp của hai phosphate dissociations của dinucleotide được thêm vào, d [UpT T(Ac)], đó là một sự khác biệt tương đối lớn trong thời gian lưu giữ giữa sản phẩm và vật liệu khởi đầu unreacted. Điều này cho phép sự cô lập của heptanucleotide hoàn toàn miễn phí của pentanucleotide. Thủy triều heptanucleo cuối cùng đã được ngưng tụ với d[pT-anC(Ac), và nonanucleotide cô lập bằng sắc kí trao đổi anion (hình 7). Hơn nữa nó tinh khiết sau khi hoàn thành deprotection, bằng sắc kí sự hiện diện của 7 M ureas (hình 8). Phân tích bằng phương pháp fingerprinting sau P-phosphoryla-tion của nhóm 5'-hiđrôxyl và by HPLC bằng cách sử dụng một phân tích µBond-apak C18 cột cho thấy sản phẩm được tinh khiết.

Kết quả (Việt) 2:

Ngưng tụ của các bảo vệ nucleoside d (MeoTr) bzA với các nucleotide d bảo vệ [pbzA (Ac)] theo sau bằng cách ngưng tụ của dinucleotide trị thu lại với d [pT (Ac)] mang đến cho ba nucleotide d [(Mèo Tr) -bzA- bzA-T]. Sau đó là tới ngưng tụ với dinucleotide d [pT ANC (Ac)] để cung cấp cho các [(MeoTr) bzA-bzA-TT-ANC] pentanucleotide d được tinh chế bằng anion-sắc ký trao đổi (Hình. 5). Ngưng tụ của pentanucleotide với d [pT-T (Ac)] cho các heptanucleotide yêu cầu. Sản phẩm này được tinh chế bằng HPLC sử dụng một cột Bondapak C15 / Porasil B (Hình. 6). Vì những đóng góp nhỏ ưa mỡ dư lượng thymine tương đối so với sự đóng góp ưa nước tiêu chuẩn của hai phân tích liên phosphate của dinucleotide thêm, d [UPT T (Ac)], có một sự khác biệt tương đối lớn trong thời gian lưu giữa các sản phẩm và bắt đầu không phản ứng vật chất. Điều này cho phép cô lập của heptanucleotide hoàn toàn miễn phí của pentanucleotide. Các triều heptanucleo- cuối cùng cũng ngưng tụ với d [pT-ANC (Ac), và nonanucleotide đang bị cô lập bởi anion-sắc ký trao đổi (Hình. 7). Đó là tiếp tục thanh tẩy sau khi khử bảo vệ đầy đủ, bằng sắc ký trong sự hiện diện của 7M ureas (Hình. 8). Phân tích bằng phương pháp lăn tay sau khi P-phosphoryla-tion của nhóm 5'-hydroxyl và bằng HPLC sử dụng một cột μBond-Apak C18 phân tích cho thấy các sản phẩm được tinh khiết.