Column:size: l = 0.25 m, Ø = 4.6 mm

Column:
size: l = 0.25 m, Ø = 4.6 mm,

stationary phase: styrene-divinylbenzene copolymer R (8 µm),

temperature: 60 °C.

Mobile phase

Weigh 80.0 g of 2-methyl-2-propanol R and transfer to a 1000 ml volumetric flask with the aid of 200 ml of water R; add 100 ml of a 35 g/l solution of dipotassium hydrogen phosphate R adjusted to pH 9.0 with dilute phosphoric acid R, 200 ml of a 10 g/l solution of tetrabutylammonium hydrogen sulphate R adjusted to pH 9.0 with dilute sodium hydroxide solution R and 10 ml of a 40 g/l solution of sodium edetate R adjusted to pH 9.0 with dilute sodium hydroxide solution R; dilute to 1000.0 ml with water R.

Flow rate

1.0 ml/min.

Detection

Spectrophotometer at 254 nm.

Injection

20 µl; inject the test solution and reference solutions (e), (f) and (g).

System suitability:
resolution: minimum 2.5 between the peaks due to impurity A (1st peak) and tetracycline (2nd peak) and minimum 8.0 between the peaks due to tetracycline and impurity D (3rd peak) in the chromatogram obtained with reference solution (e); if necessary, adjust the concentration of 2-methyl-2-propanol in the mobile phase,

signal-to-noise ratio: minimum 3 for the principal peak in the chromatogram obtained with reference solution (g),

symmetry factor : maximum 1.25 for the peak due to tetracycline in the chromatogram obtained with reference solution (e).

Limits:
impurity A: not more than the area of the corresponding peak in the chromatogram obtained with reference solution (f) (3.0 per cent),

impurity B (eluting on the tail of the principal peak): not more than half the area of the peak due to impurity A in the chromatogram obtained with reference solution (f) (1.5 per cent),

impurity C: not more than the area of the corresponding peak in the chromatogram obtained with reference solution (f) (0.5 per cent),

impurity D: not more than the area of the corresponding peak in the chromatogram obtained with reference solution (f) (0.5 per cent).

Kết quả (Việt) 1:

Cột:Kích thước: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm,văn phòng phẩm giai: styren-divinylbenzene copolymer R (8 μm),nhiệt độ: 60 ° C.Giai đoạn di động Nặng 80,0 g 2-methyl-2-propanol R và chuyển giao cho một flask thể tích 1000 ml với sự trợ giúp của 200 ml nước R; thêm 100 ml dung dịch 35 g/l dipotassium hydro phosphate R điều chỉnh độ pH 9,0 với loãng axit photphoric R, 200 ml của một giải pháp 10 g/l của tetrabutylammonium hydro sulfat R điều chỉnh độ pH 9,0 với dung dịch hydroxit natri loãng R và 10 ml dung dịch natri edetate R 40 g/l điều chỉnh pH 9,0 với hydroxit natri loãng giải pháp R; pha loãng đến 1000.0 ml nước R.Tốc độ dòng chảy 1.0 ml/phút.Phát hiện Phối tại 254 nm.Tiêm 20 ml; bơm kiểm tra giải pháp và các giải pháp tài liệu tham khảo (e), (f) và (g).Sự phù hợp của hệ thống:độ phân giải: tối thiểu 2,5 giữa đỉnh do tạp chất một (1st peak) và tetracycline (2 peak) và 8,0 tối thiểu giữa các đỉnh núi do tetracycline và tạp chất D (3rd peak) trong chromatogram thu được với giải pháp tài liệu tham khảo (e); Nếu cần thiết, điều chỉnh nồng độ 2-methyl-2-propanol trong giai đoạn di động,tín hiệu-to-noise ratio: tối thiểu 3 đỉnh núi chính ở chromatogram thu được với giải pháp tài liệu tham khảo (g),yếu tố đối xứng: tối đa 1,25 cho đỉnh do tetracycline trong chromatogram thu được với giải pháp tài liệu tham khảo (e).Giới hạn:tạp chất A: không nhiều hơn khu vực đỉnh tương ứng ở chromatogram thu được với giải pháp tài liệu tham khảo (f) (3,0 phần trăm),tạp chất B (eluting trên đuôi của đỉnh chính): không nhiều hơn một nửa diện tích đỉnh do tạp chất A trong chromatogram thu được với giải pháp tài liệu tham khảo (f) (1,5 phần trăm),tạp chất C: không nhiều hơn khu vực đỉnh tương ứng ở chromatogram thu được với giải pháp tài liệu tham khảo (f) (0,5 phần trăm),tạp chất D: không nhiều hơn khu vực đỉnh tương ứng ở chromatogram thu được với giải pháp tài liệu tham khảo (f) (0,5 phần trăm).

Kết quả (Việt) 2:

Cột:
kích thước: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm,

pha tĩnh: styrene-divinylbenzene copolymer R (8 mm),

nhiệt độ:. 60 ° C

pha động

Cân 80,0 g 2-methyl-2-propanol R và chuyển giao cho một thể tích bình 1000 ml với sự trợ giúp của 200 ml nước; thêm 100 ml dung dịch 35 g / giải pháp l Dipotassium hydrogen phosphate R điều chỉnh pH 9,0 với axit loãng photphoric R, 200 ml 10 g / giải pháp l tetrabutylammonium hydro sulphat R điều chỉnh pH 9,0 với dung dịch loãng natri hydroxit R và 10 ml dung dịch 40 g / l dung dịch natri Edetate R điều chỉnh pH 9,0 với dung dịch loãng natri hydroxit R; pha loãng 1000.0 ml bằng nước

Tốc độ dòng chảy

1,0 ml / phút.

Phát hiện

quang phổ ở bước sóng 254 nm.

tiêm

20 ml; Tiêm dung dịch thử và dung dịch đối chiếu (e), (f) và (g).

Hệ thống phù hợp:
độ phân giải: tối thiểu 2,5 giữa pic của tạp chất A (1 đỉnh) và tetracycline (2 đỉnh) và tối thiểu 8,0 giữa pic với tetracycline và tạp chất D (đỉnh thứ 3) trong sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (e); nếu cần thiết, điều chỉnh nồng độ 2-methyl-2-propanol trong pha động,

tín hiệu-to-noise ratio: tối thiểu 3 cho pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (g),

yếu tố đối xứng: tối đa 1,25 cho pic tetracycline trong sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (e).

Giới hạn:
tạp chất A: không được lớn hơn diện tích pic tương ứng trong sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (f) (3,0 phần trăm),

tạp chất B (giải hấp trên đuôi của pic chính): không hơn một nửa diện tích của pic tạp chất A trong sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (f) (1,5 phần trăm),

tạp chất C: không được lớn hơn diện tích pic tương ứng trong sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (f) (0,5 phần trăm),

tạp chất D: không được lớn hơn diện tích pic tương ứng trong sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (f) (0,5 phần trăm).