cA sửa đổi phiên bản của giao thức của Williams et al. (1990) đã được
áp dụng. Phản ứng khuếch đại được thực hiện trong 25 gl lượng
có chứa magnesium-free 1 x đệm Taq DNA (Promega),
0,2 mM dNTP sẽ trộn (Pharmacia), 0,2 gm mồi (operon Technologies,
Inc .; bộ D, K, L, M, O, P và S), hai đơn vị Taq DNA
polymerase (Promega), 2raM MgC12 và 115ng của gen
DNA, phủ lên bằng một giọt dầu khoáng tinh khiết. Khuếch đại
được thực hiện trong một chu trình nhiệt Perkin Elmer- Cetus DNA
lập trình cho một chu kỳ predenaturation của 1 phút ở 94 ~ và
40 chu kỳ của 1 cơn mưa biến tính ở 94 ~ 1 phút ủ ở 36 ~
và 2rain kéo dài ở 72 ~ sản phẩm khuếch đại được
phân tích bằng điện trong 2 ~ -TBE gel agarose tại 3.12 V /
cm 3 h. RAPD loci được đặt tên rOPX #, trong đó X là mồi
thư bộ và # số lượng của lớp sơn lót theo bộ. Khi có nhiều
hơn một ban nhạc có thể được ghi bàn cho một mồi riêng, một số
đã được bổ sung để xác định mỗi locus.
đang được dịch, vui lòng đợi..
