The native DNA Pol I has been succe

The native DNA Pol I has been successfully used to
remove 3′ protruding DNA ends (in the absence of
dNTPs), or to fill in cohesive ends (in the presence of
dNTPs) before addition of molecular linkers. However,
the 5′→3′ exonuclease activity of DNA Pol I makes it
unsuitable for all applications that require polymerization
activity alone (e.g.to fill in cohesive ends before addition
of linkers, or to copy single-stranded DNA in the dideoxy
method for sequencing). Fortunately, it was discovered that
proteolytic digestion of E. ColiDNA Pol I (109 kDa)
generates two fragments (76 and 36 kDa). The large
fragment, also known as DNA Pol IK or Klenow fragment
(named after its inventor, (Klenow and Henningsen1970)),
contains the 5′→3′ polymerase and 3′→5′ exonuclease
(proofreading) activities of DNA Pol I, while the small
fragment exhibits the 5′→3′ exonuclease activity alone.
Since then, recombinant sources of Klenow significantly
improved the functional quality of this fragment by
eliminating contaminations due to the presence of residual
native enzyme in proteolytically treated preparations

Kết quả (Việt) 1:

Pol DNA bản địa tôi đã được sử dụng thành công đểloại bỏ 3 ' nhô ra ADN kết thúc (trong sự vắng mặt củadNTPs), hoặc để điền vào cố kết thúc (trong the presence củadNTPs) trước khi bổ sung các phân tử linkers. Tuy nhiên,hoạt động exonuclease 5′→3′ của DNA Pol tôi làm cho nókhông phù hợp cho tất cả các ứng dụng yêu cầu trùng hợphoạt động một mình (e.g.to tô ở cố kết thúc trước khi bổ sungcủa linkers, hoặc để sao chép đĩa đơn-stranded DNA trong dideoxyphương pháp cho trình tự). May mắn thay, nó được phát hiện cótiêu hóa proteolytic E. ColiDNA Pol tôi (109 kDa)tạo ra hai mảnh (76 và 36 kDa). Lớnđoạn, cũng được gọi là mảnh DNA Pol IK hoặc Klenow(đặt tên theo nhà phát minh (Klenow và Henningsen1970)),có 5′→3′ polymerase và 3′→5′ exonuclease(proofreading) hoạt động của DNA Pol I, trong khi nhỏmảnh thể hiện các hoạt động exonuclease 5′→3′ một mình.Kể từ sau đó, tái tổ hợp nguồn Klenow đáng kểcải thiện chất lượng chức năng của này mảnh bởiloại bỏ contaminations do sự hiện diện của dưmen tiêu hóa bản địa trong thực điều trị chuẩn bị

Kết quả (Việt) 2:

Các bản DNA Pol tôi đã được sử dụng thành công để
loại bỏ 3 'DNA đầu nhô ra (trong trường hợp không
dNTP), hoặc để điền vào hai đầu gắn kết (trong sự hiện diện của
dNTP) trước khi bổ sung các mối liên kết phân tử. Tuy nhiên,
5 '→ 3' exonuclease hoạt động của DNA Pol tôi làm cho nó
phù hợp cho tất cả các ứng dụng đòi hỏi trùng hợp
hoạt động một mình (egto điền vào hai đầu cố kết trước khi thêm
các mối liên kết, hoặc sao chép DNA sợi đơn trong dideoxy
phương pháp để sắp xếp) . May mắn thay, nó đã phát hiện ra rằng
tiêu hóa phân hủy protein của E. ColiDNA Pol I (109 kDa)
tạo ra hai mảnh (76 và 36 kDa). Các lớn
mảnh, còn được gọi là DNA Pol IK hay Klenow fragment
(đặt theo tên nhà phát minh của mình, (Klenow và Henningsen1970)),
chứa 5 '→ 3' polymerase và 3 '→ 5' exonuclease
(proofreading) hoạt động của DNA Pol I, trong khi nhỏ
mảnh trưng bày 5 '→ 3' exonuclease hoạt động một mình.
Kể từ đó, các nguồn tái tổ hợp của Klenow đáng kể
cải thiện chất lượng chức năng của đoạn này bằng cách
loại bỏ nhiễm bẩn do sự hiện diện của dư
enzyme có nguồn gốc trong các chế phẩm điều trị proteolytically