Phân tích HPLC. Phân tích HPLC-DAD đã được thực hiện với một hệ thống Waters HPLC được trang bị 600 máy bơm bậc bốn gradient, 717 cộng với mẫu tự động, 996 máy dò PDA, và Millennium (32) phần mềm (phiên bản 3.05.01). Việc tách sắc ký được thực hiện trên Phenomenex (Torrance, CA) cột phân tích (LUNA C18 (2) 250 mm × 4.6 mm id) đóng gói với 5 micromet silica. Nhiệt độ của cột được đặt ở 27 ° C. Rửa giải tiêu chuẩn và các chiết xuất (20 ml) được thực hiện
với chương trình dung môi gradient, tốc độ dòng chảy 1,0 ml / phút cho 25min. Pha động gồm 0.01% (v / v) axit trifluoroacetic (TFA) trong nước (A) và acetonitril (B) với gradient như sau: AB (80:20), B đã dần dần tăng lên đến 30% vào lúc 8 phút, đến 40% ở
12 phút, đến 50% ở 17 phút và trở lại 20% 17-25 phút. Cột là hơn tái cân bằng với các điều kiện ban đầu trong 5 phút trước khi tiêm tiếp theo. Các bước sóng phát hiện được đặt ở 280 nm (mua lại quang phổ trong khoảng 200-400) nm. Xác định các hợp chất đã được thực hiện trên cơ sở thời gian lưu giữ, coinjections, và mảng diode hợp quang phổ với các tiêu chuẩn. Đối với việc chuẩn bị của các đường cong hiệu chuẩn, giải pháp chứng khoán tiêu chuẩn của
các hợp chất (1 mg / 2 ml) đã được chuẩn bị trong methanol, lọc qua 0,45 micron lọc (Millipore), và thích hợp pha loãng (0,1-500 microgam /
đang được dịch, vui lòng đợi..
