Conventional methods of gel electro

Conventional methods of gel electrophoresis are carried out by placing DNA samples in a solid matrix (agarose or polyacrilamide) and inducing the molecules to migrate through the gel under a static electric field. When DNA molecules are under the influence of this electric field, they elongate and align themselves with the field, migrating toward the anode in a process called reptation. There are several parameters that affect the migration of DNA through the gel: concentration and composition of the gel, the buffer, the temperature, and the voltage gradient of the electric field. In DNA electrophoresis by the standard method however, DNA molecules larger than 20kb show essentially the same mobility in a static electric field, making differentiation between these DNA molecules impossible. The first attempts to resolve these larger fragments included using low percentage agarose gels and low voltage gradients. Even under these extreme conditions, separation of large DNA molecules was difficult. In 1984, David Schwartz was able to offer a new technique. He suggested that periodically changing the orientation of the electric field would force DNA molecules in the gel to relax upon the removal of the first field and elongate to allign with the new field. It was his assumption that this process should be size dependent. Schwartz was finally able to demonstrate the effectiveness of this technique when he successfully separted yeast chromosomes that were several hundred kilobases in length. (Birren et al., 1993)

Kết quả (Việt) 1:

Các phương pháp thông thường của gel điện được thực hiện bằng cách đặt mẫu DNA trong một ma trận rắn (agarose hoặc polyacrilamide) và gây ra các phân tử để di chuyển qua các gel trong một lĩnh vực điện tĩnh. Khi phân tử DNA dưới ảnh hưởng của điện trường, họ mọc dài ra và align mình với lĩnh vực này, di chuyển về hướng cực dương trong một quá trình được gọi là reptation. Có một số thông số có ảnh hưởng đến sự di cư của DNA thông qua các gel: tập trung và các thành phần của các gel, bộ đệm, nhiệt độ và điện áp gradient của điện trường. Trong DNA điện bằng phương pháp tiêu chuẩn Tuy nhiên, phân tử DNA lớn hơn 20kb Hiển thị di động về cơ bản giống nhau trong một lĩnh vực điện tĩnh, làm cho sự khác biệt giữa các phân tử DNA không thể. Những nỗ lực đầu tiên để giải quyết những mảnh vỡ lớn hơn bao gồm sử dụng tỷ lệ phần trăm thấp agarose gel và điện áp thấp gradient. Ngay cả dưới những điều kiện khắc nghiệt, ly thân của các phân tử DNA lớn là khó khăn. Năm 1984, David Schwartz đã có thể cung cấp một kỹ thuật mới. Ông đề nghị rằng theo định kỳ thay đổi hướng của điện trường sẽ buộc phân tử DNA trong gel để thư giãn khi gỡ bỏ lĩnh vực đầu tiên và kéo dài để allign với các lĩnh vực mới. Nó là của ông giả định rằng quá trình này nên là kích thước phụ thuộc. Schwartz đã cuối cùng đã có thể chứng minh hiệu quả của kỹ thuật này khi ông thành công separted nấm men nhiễm sắc thể là một vài trăm kilobases trong chiều dài. (Birren và ctv., 1993)

Kết quả (Việt) 2:

Phương pháp thông thường của gel điện di được thực hiện bằng cách đặt mẫu DNA trong một ma trận rắn (agarose hoặc polyacrilamide) và gây các phân tử để di chuyển qua gel dưới một điện trường tĩnh. Khi các phân tử DNA là dưới ảnh hưởng của điện trường này, chúng mọc dài ra và tự sắp xếp với lĩnh vực này, di chuyển về phía anode trong một quá trình gọi là reptation. Có một số thông số ảnh hưởng đến sự di cư của DNA qua gel: nồng độ và thành phần của gel, bộ đệm, nhiệt độ, và gradient điện thế của điện trường. Trong DNA điện theo phương pháp tiêu chuẩn Tuy nhiên, các phân tử DNA lớn hơn 20KB chương trình cơ bản di động tương tự trong một điện trường tĩnh, làm cho sự khác biệt giữa các phân tử DNA không thể. Những nỗ lực đầu tiên để giải quyết những mảnh vỡ lớn hơn bao gồm tỷ lệ sử dụng gel agarose thấp và gradient điện áp thấp. Ngay cả trong những điều kiện khắc nghiệt, tách các phân tử DNA lớn là khó khăn. Năm 1984, David Schwartz đã có thể cung cấp một kỹ thuật mới. Ông cho rằng kỳ thay đổi hướng của điện trường sẽ buộc các phân tử DNA trong gel để thư giãn sau khi việc loại bỏ các trường đầu tiên và kéo dài ra để allign với các lĩnh vực mới. Đó là giả định của ông rằng quá trình này cần được kích thước phụ thuộc. Schwartz đã có thể chứng minh hiệu quả của kỹ thuật này khi ông thành công nhiễm sắc thể nấm men separted đó là vài trăm kilobases dài. (Birren et al., 1993)