Xung gel lĩnh vực điện là một kỹ thuật được sử dụng để tách các axit deoxyribonucleic lớn (DNA) phân tử bằng cách áp dụng một ma trận gel một điện trường mà theo định kỳ thay đổi hướng. Một nhà vi sinh vật chạy một xung động lĩnh vực thử nghiệm gel electrophoresis được sử dụng trong đánh máy vi khuẩn lục [ẩn ] 1 Bối cảnh lịch sử 2 Thủ tục 3 Theory 4 Ứng dụng 5 Liên kết ngoài 6 Tham khảo Bối cảnh lịch sử [sửa] Tiêu chuẩn kỹ thuật gel điện di để tách các phân tử DNA đã tạo thuận lợi rất lớn cho nghiên cứu sinh học phân tử. Tuy nhiên, nó không thể tách phân tử rất lớn của DNA có hiệu quả. DNA phân tử lớn hơn 15-20kb di cư thông qua một gel cơ bản sẽ di chuyển với nhau một cách quy mô độc lập. Tại Đại học Columbia năm 1984, David C. Schwartz và Charles Cantor đã phát triển một biến thể của giao thức tiêu chuẩn bằng cách giới thiệu một gradient điện áp xoay chiều để cải thiện độ phân giải của các phân tử lớn hơn. [1] Kỹ thuật này được gọi là xung-field gel electrophoresis (PFGE). Sự phát triển của PFGE mở rộng phạm vi của độ phân giải cho các mảnh DNA của nhiều như hai bậc. Procedure [sửa] Cụm phân tích trong BioNumerics của Escherichia coli enteroaggregative chủng từ xung-field gel electrophoresis fingerprinting Các thủ tục cho kỹ thuật này là tương đối tương tự như thực hiện một điện di gel tiêu chuẩn ngoại trừ việc thay vì liên tục chạy điện áp một chiều, điện áp định kỳ chuyển đổi giữa ba hướng; một chạy qua trục trung tâm của gel và hai chạy ở một góc 60 độ ở hai bên. Giờ xung bằng nhau cho mỗi hướng dẫn vào cuộc di cư về phía trước ròng của DNA. Đối với các ban nhạc cực lớn (lên đến khoảng 2Mb), chuyển mạch đường dốc khoảng thời gian có thể được sử dụng mà làm tăng thời gian xung cho mỗi hướng trong quá trình của một số giờ-đi, ví dụ, tăng xung tuyến tính từ 10 giây ở 0 giờ 60 giây vào lúc 18 giờ. Quy trình này mất nhiều thời gian hơn so với điện di gel bình thường do kích thước của các mảnh vỡ đã được giải quyết và thực tế là các DNA không di chuyển theo một đường thẳng qua gel. Theory [sửa] Trong khi ở chung mảnh nhỏ có thể tìm theo cách của họ thông qua ma trận gel dễ dàng hơn các đoạn DNA lớn, chiều dài tồn tại trên ngưỡng 30-50 kb nơi mà tất cả các mảnh vỡ lớn sẽ chạy ở mức tương tự, và xuất hiện trong một gel là một ban nhạc lan tỏa lớn duy nhất. Tuy nhiên, với thay đổi định kỳ các hướng lĩnh vực, các độ dài khác nhau của DNA phản ứng với sự thay đổi ở mức giá khác nhau. Đó là, phần lớn các DNA sẽ chậm hơn để tổ chức lại mình phụ trách khi hướng lĩnh vực đang thay đổi, trong khi các phần nhỏ hơn sẽ được nhanh hơn. Trong suốt thời gian phù hợp với sự thay đổi của các hướng, mỗi băng sẽ tách ra nhiều hơn và nhiều hơn nữa, ngay cả ở độ dài rất lớn. Do đó tách các mảnh DNA rất lớn sử dụng PFGE được thực hiện tốt. Ứng dụng [sửa] PFGE có thể được sử dụng cho các kiểu gen hoặc dấu vân tay di truyền. Nó thường được coi là tiêu chuẩn vàng trong các nghiên cứu dịch tễ học của các sinh vật gây bệnh. Phân nhóm đã làm cho nó dễ dàng hơn để phân biệt giữa các chủng vi khuẩn Listeria monocytogenes và do đó liên kết môi trường hoặc thức ăn bị nhiễm phân lập lâm sàng.
đang được dịch, vui lòng đợi..