Calreticulin is a functionally comp

Calreticulin is a functionally complex Ca2+ binding protein localized primarily in the
endoplasmic reticulum (ER) but is also found in the nucleus, cell membranes and extracellular
matrix.(1) Calreticulin gene (CALR) is located on chromosome 19p13.2 and contains 9 exons
and spans 4.2 kb. CALR knockout mice are born dead and display impaired cardiac development
whereas post-natal over-expression also leads to cardiac defects.(2, 3) Calreticulin protein
consists of three domains: amino terminal N-domain (residues 1 to 180), central proline-rich Pdomain (residues 181 to 290) and carboxyl terminal C-domain (residues 291 to 400).
Functionally, calreticulin is believed to participate in Ca2+homeostasis, handling of misfolded
proteins, cell adhesion, immune response to caner, phagocytosis and signaling.(4-13) Abnormal
expression of calreticulin has been described in various cancers.(12, 14-16) CALR promoter
point mutations have previously been described in schizoaffective disorders.(17)
In December, 2013, two groups reported novel CARL mutations (exon 9 deletions and
insertions) in JAK2 or MPL unmutated primary myelofibrosis (PMF) and essential
thrombocythemia (ET).(18, 19) In one of the two studies,(19) among 1107 patient samples with
myeloproliferative neoplasms (MPN), CALR mutations were not seen in polycythemia vera (PV;
n=382) but seen in ET (25%; n=311) and PMF (35%; n=203). CALR mutations were mutually
exclusive of JAK2 or MPL mutations. Accordingly, the authors included 211 additional
JAK2/MPL-unmutated cases and found CALR mutational frequencies in JAK2/MPL-negative
disease to be 67% in ET (n=289) and 88% in PMF (n=120). CALR mutations were not detected
in acute myeloid leukemia (AML; n=254), myelodysplastic syndromes (MDS; n=73), chronic
myelomonocytic leukemia (CMML; n=64) or chronic myeloid leukemia (CML; n=45). Three
© 2014 Macmillan Publishers Limited. All rights reserved.
4
patients (13%) with RARS-T (n=24) displayed CALR mutations and all three were JAK2/MPLnegative. In ET, CALR, compared to JAK2, mutations were associated with lower hemoglobin
level, lower leukocyte count, higher platelet count, lower risk of thrombosis and better survival.
In PMF, the association was with lower leukocyte count, higher platelet count and better
survival.(19)
In the second study,(18) CALR mutations were first identified in 26 of 151 patients with
MPN, including 48 PV, 62 ET and 39 PMF. As was the case in the aforementioned study, CALR
mutations occurred only in JAK2/MPL-unmutated cases (26 of 31 such cases with ET or PMF).
In a follow-up study, none of 217 patients with PV or 41 with post-PV MF harbored CALR
mutations. These mutations were also absent in JAK2/MPL-mutated ET (n=138), post-ET MF
(n=18) or PMF (n=97). On the other hand, mutational frequencies were 71%, 56% and 86% in
JAK2/MPL-unmutated ET (n=112), PMF (n=32) or post-ET MF (n=14), respectively. The
authors also detected CALR mutations in MDS (8.3%; n=120), CMML (3%; n=33), atypical
CML (3.4%; n=29) but not in CML (n=28), AML (n=48), systemic mastocytosis (n=114),
eosinophilic disorder (n=2), “idiopathic” erythrocytosis (n=5), transient abnormal myelopoiesis
(n=10), lymphoid malignancies (n=287) or solid tumors (n=502). In ET, CALR, compared to
JAK2, mutations were associated with higher platelet counts, lower hemoglobin level and
increased incidence of fibrotic transformation.
All CALR mutations seen so far in MPN involve exon 9 and were somatic insertions or
deletions; two mutations variants (type 1 and type 2)(19) were the most frequent: type 1
(L367fs*46) resulted from 52 bp deletion and was more frequent in PMF and type 2
(K385fs*47) resulted from 5-bp TTGTC insertion. In one of the two studies, these two common
variants accounted for 53% and 32% of all mutant CALR and only 3 patients were homozygous
© 2014 Macmillan Publishers Limited. All rights reserved.
5
for CALR mutations and all three displayed K385fs*47.(19) Several other distinct variants were
seen infrequently. All CALR mutations resulted in one base pair reading frame shift and a
significantly altered the C-terminal that includes loss of most of the acidic domain and KDEL
signal (ER retention motif comprised of lysine, aspartic acid, glutamic acid and leucine).
Additional laboratory studies revealed the stem cell origination of CALR mutations and did not
reveal altered distribution of the mutant protein in the ER or Golgi apparatus.(18)
Overexpression of the most frequent CALR deletion in Ba/F3 cell lines caused cytokineindependent growth and activation of signal transducer and activator of transcription 5 that was
sensitive to pharmacologic JAK2 inhibition.(19)
The current study of 254 Mayo Clinic patients defines the clinical, cytogenetic and
molecular correlates of CALR mutations in PMF and compares overall and leukemia-free
survival in the absence (triple-negative) or presence of CALR, JAK2 or MPL mutations. The
intent is to confirm the seminal observations from the above-mentioned t

Kết quả (Việt) 2:

Calreticulin là một chức năng phức tạp Ca2 + protein ràng buộc địa hoá chủ yếu ở
lưới nội chất (ER) mà còn được tìm thấy trong hạt nhân, tế bào và ngoại bào màng
ma trận. (1) gen Calreticulin (CALR) nằm trên nhiễm sắc thể 19p13.2 và chứa 9 exon
và kéo dài 4,2 kb. Chuột knockout CALR được sinh ra đã chết và hiển thị các phát triển tim bị suy giảm
trong khi sau khi sinh qua biểu hiện cũng dẫn đến dị tật tim (2, 3) protein Calreticulin.
Bao gồm ba lĩnh vực: amin thiết bị đầu cuối N-domain (dư lượng 1-180), proline trung ương -rich Pdomain (dư lượng 181-290) và thiết bị đầu cuối carboxyl C-domain (dư lượng 291-400).
Về mặt chức năng, calreticulin được cho là tham gia vào Ca2 + nội cân bằng, xử lý misfolded
protein, kết dính tế bào, phản ứng miễn dịch để Caner, thực bào và tín hiệu . (4-13) bất thường
biểu hiện của calreticulin đã được mô tả trong các bệnh ung thư khác nhau. (12, 14-16) CALR promoter
đột biến điểm trước đây đã được mô tả trong các rối loạn schizoaffective. (17)
Trong tháng mười hai, năm 2013, hai nhóm báo cáo đột biến CARL tiểu thuyết (exon 9 xóa và
chèn) trong JAK2 hoặc MPL myelofibrosis chính unmutated (PMF) và thiết yếu
tăng tiểu cầu (ET). (18, 19) Trong một trong hai nghiên cứu, (19) trong số 1.107 mẫu của bệnh nhân với
u myeloproliferative (MPN), đột biến CALR không được tìm thấy trong đa hồng cầu vera (PV;
n = 382), nhưng thấy trong ET (25%; n = 311) và PMF (35%; n = 203). Đột biến CALR là đôi bên cùng có
độc quyền của JAK2 hoặc MPL đột biến. Theo đó, các tác giả đưa thêm 211
JAK2 / trường hợp MPL-unmutated và thấy CALR tần số đột biến trong JAK2 / MPL âm
bệnh là 67% trong ET (n = 289) và 88% trong PMF (n = 120). Đột biến CALR không được phát hiện
trong bệnh bạch cầu myeloid cấp tính (AML; n = 254), hội chứng myelodysplastic (MDS; n = 73), mãn tính
bệnh bạch cầu myelomonocytic (CMML; n = 64) hoặc bệnh bạch cầu dòng tủy mãn tính (CML; n = 45). Ba
© 2014 Macmillan Publishers Limited. Tất cả quyền được bảo lưu.
4
bệnh nhân (13%) với RARs-T (n = 24) được hiển thị đột biến CALR và cả ba đều JAK2 / MPLnegative. Trong ET, CALR, so với JAK2, đột biến có liên quan với giảm hemoglobin
cấp, số lượng bạch cầu thấp, số lượng tiểu cầu cao hơn, giảm nguy cơ huyết khối và sự sống còn tốt hơn.
Trong PMF, mối liên hệ này với số lượng bạch cầu thấp, số lượng tiểu cầu cao hơn và tốt hơn
sự sống còn . (19)
Trong nghiên cứu thứ hai, (18) đột biến CALR đã được xác định lần đầu tiên trong 26 của 151 bệnh nhân với
MPN, trong đó có 48 PV, 62 ET và 39 PMF. Như trường hợp trong nghiên cứu nói trên, CALR
đột biến xảy ra chỉ trong JAK2 / MPL-unmutated trường hợp (26 trong số 31 trường hợp như vậy với ET hoặc PMF).
Trong một nghiên cứu theo dõi, không ai trong số 217 bệnh nhân với PV hoặc 41 với hậu PV MF nuôi dưỡng CALR
đột biến. Những đột biến này cũng đã vắng mặt trong JAK2 / MPL-ET đột biến (n = 138), sau ET MF
(n = 18) hoặc PMF (n = 97). Mặt khác, tần số đột biến là 71%, 56% và 86% trong
JAK2 / MPL-unmutated ET (n = 112), PMF (n = 32) hoặc ET-MF (n = 14), tương ứng. Các
tác giả cũng phát hiện đột biến CALR trong MDS (8,3%; n = 120), CMML (3%; n = 33), không điển hình
CML (3,4%; n = 29) nhưng không phải trong CML (n = 28), AML (n = 48), mastocytosis hệ thống (n = 114),
rối loạn bạch cầu ái toan (n = 2), "tự phát" erythrocytosis (n = 5), thoáng myelopoiesis bất thường
(n = 10), khối u ác tính bạch huyết (n = 287) hoặc khối u rắn ( n = 502). Trong ET, CALR, so với
JAK2, đột biến có liên quan với số lượng tiểu cầu cao hơn, mức độ hemoglobin thấp hơn
và. Tăng tỷ lệ chuyển đổi xơ
Tất cả các đột biến CALR thấy cho đến nay trong MPN liên quan đến exon 9 và đã chèn soma hoặc
xóa; hai đột biến biến thể (loại 1 và loại 2) (19) thì thường gặp nhất: loại 1
(L367fs * 46) kết quả từ 52 xóa bp và thường xuyên hơn trong PMF và loại 2
(K385fs * 47) dẫn từ TTGTC 5-bp chèn. Trong một trong hai nghiên cứu, hai phổ
biến chiếm 53% và 32% của tất cả các CALR đột biến và chỉ có 3 bệnh nhân là đồng hợp tử
© 2014 Macmillan Publishers Limited. Tất cả quyền được bảo lưu.
5
đột biến CALR và cả ba hiển thị K385fs * 47. (19) Một số biến thể riêng biệt khác đã được
nhìn thấy thường xuyên. Tất cả các đột biến CALR dẫn trong cặp một cơ sở đọc khung thay đổi và một
thay đổi đáng kể C-thiết bị đầu cuối bao gồm mất mát của hầu hết các lĩnh vực có tính axit và KDEL
tín hiệu (bí ER motif gồm lysine, acid aspartic, acid glutamic và leucine).
Phòng thí nghiệm bổ sung Các nghiên cứu cho thấy các nguyên tế bào gốc của đột biến CALR và không
tiết lộ phân phối biến đổi của protein đột biến trong bộ máy ER hoặc Golgi. (18)
biểu hiện quá mức của việc xóa CALR thường xuyên nhất trong Ba dòng tế bào / F3 ra tăng trưởng cytokineindependent và kích hoạt tín hiệu đầu dò và activator phiên mã 5 đó là
nhạy cảm với sự ức chế JAK2 dược. (19)
Các nghiên cứu hiện tại của 254 bệnh nhân Mayo Clinic xác định lâm sàng, di truyền tế bào và
tương quan phân tử của đột biến CALR trong PMF và so sánh tổng thể và bệnh bạch cầu miễn phí
tồn tại trong sự vắng mặt (triple -phủ) hoặc sự hiện diện của CALR, JAK2 hoặc MPL đột biến. Các
mục đích là để xác nhận các quan sát tinh từ t nêu trên